Использование эксплантатов трахеи куриных эмбрионов и цыплят для изучения возбудителей инфекционных респираторных болезней птиц

• Автор: Чупина, Ольга Андреевна
• Шифр специальности: 03.00.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Владимир
• Количество страниц: 142 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ ,

1.1. Определение болезни, история изучения

1.2. Эпизоотическая ситуация по ИБК, экономический ущерб

1.3. Организмы, восприимчивые к вирусу ИБК

1.4. Филогенетическая характеристика вируса ИБК

1.5. Морфология вируса ИБК

1.5.1. Поверхностные структуры

1.5.2. Геном

1.6. Механизм репликации вируса ИБК

1.7. Ранний патогенез ИБК
1.8. Тканевой тропизм возбудителя и клинические проявления инфекции ИБК
1.9. Патологоанатомические и гистологические изменения
у птиц при заболевании ИБК
1 Антигенные свойства вируса ИБК
1 Природа иммунного ответа при ИБК
. Особенности иммунной системы кур
. Формирование иммунного ответа при ИБК
. Локальный иммунитет при ИБК
1 Выделение вируса
. Сбор образцов для выделения вируса ИБК
. Системы для выделения вируса ИБК
1. Трахеальная органная культура
1 Использование ТОК для исследования
прочих возбудителей
1 Заключение по обзору литературы
2. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Материалы
2.1.1. Материалы для анализа эпизоотической ситуации по ИБК в различных странах мира и Российской Федерации
2.1.2. Куриные эмбрионы
2.1.3. Птица
2.1.4. Сыворотки
2.1.5. Вирус ИБК
2.1.6. Возбудители других инфекционных болезней
2.2. Методы исследования
2.2.1. Оптимизация методики приготовления и поддержания трахеальной органной культуры
2.2.2. Оценка цилиарной активности в ТОК
2.2.3. Определение чувствительности ТОК к возбудителям, вызывающим респираторные заболевания птиц
2.2.4. Выделение изолятов вируса ИБК
2.2.5. Количественный учет вируса ИБК
2.2.6. Оценка патогенности изолятов вируса ИБК
2.2.7. Определение безвредности живой вакцины против ИБК
2.2.8. Оценка иммунобиологических свойств отечественных изолятов вируса ИБК
2.2.8.1. Постановка реакции нейтрализации в ТОК
2.2.8.2. Перекрестное заражение
2.2.9. Подтверждение идентичности выделенных изолятов вируса ИБК
2.2 Определение антител к вирусу ИБК в сыворотках крови кур
2.2 Определение патогенности полевых изолятов ii для восприимчивых животных
2.2 Статистическая обработка результатов экспериментов
2.3. Результаты собственных исследований
2.3.1. Эпизоотическая ситуация по ИБК
2.3.1.1. Антигенный спектр вируса ИБК
2.3.1.2. Эпизоотическая ситуация по ИБК в России
2.3.2. Оптимизация методики приготовления, поддержания
ТОК, изучение чувствительности к вирусу ИБК
2.3.2.1. Оптимизация способа приготовления колец ТОК
2.3.2.2. Влияние способа культивирования ТОК
2.3.2.3. Влияние степени сформированноети тканей
трахеи на качество ТОК
2.3.2.4. Подбор поддерживающей среды для ТОК
2.3.3. Чувствительность ТОК эмбрионов кур к вирусу ИБК
2.3.4. Чувствительность ГОК к вирусам, вызывающим респираторные расстройства у птиц
2.3.5. Чувстствительность ТОК к возбудителям респираторного микоплазмоза и микоплазмозного синовита птиц
2.3.6. Исследование иммунобиологических свойств патогенных изолятов вируса ИБК, выделенных на территории РФ
2.3.6.1. Исследование изолята Щелковский вируса ИБК
2.3.6.2. Исследование биологических свойств изолята
вируса ИБК, выделенного в Краснодарском крае
2.3.7. Оценка антигенного родства изолятов вируса ИБК, выделенных на территории РФ
2.3.7.1. Получение гипериммунных сывороток
2.3.7.2. Реакция нейтрализации на ТОК
2.3.7.3. Оценка протективности вакцины, приготовленной
га изолята Щелковский вируса ИБК
2.3.8. Безвредность живой вакцины против ИБК с учетом сохранения ЦА трахеи иммунизированных цыплят
2.4. Обсуждение результатов исследований
3. ВЫВОДЫ
4. ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
5. СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЯ
ВВЕДЕНИЕ


Болезнь может сопровождаться поражением почек, а среди поголовья несушек обычно отмечается снижение яйценоскости и ухудшение качества яиц. В отдельных случаях заболевание имеет название инфекционный бронхит птиц . Впервые ИБК выявили в США, в Северной Дакоте, в г. Инфекционную природу болезни установили в г. Вирусная природа инфекционного бронхита кур была подтверждена в г. О , а в г. ИБК признали и С. В. , которым впервые удалось культивирование вируса ИБК. Впоследствии вирус был назван вирусом инфекционного бронхита кур . Заболевание быстро распространилось и в г. ИБК уже был зарегистрирован во многих птицеводческих хозяйствах Северной Америки. Далее, по мере развития средств диагностики, ИБК был зарегистрирован в Палестине г. Европе в Нидерландах г. Англии г В настоящее время заболевание регистрируется практически повсеместно. Считалось, что все выделенные варианты возбудителя принадлежат к одному серотипу, однако в г. К г. Отмечалось, что разнообразие биологических особенностей штаммов осложняло диагностику и профилактику заболевания , 4. В нашей стране впервые ИБК описал в г. П. С. Сопиков, наблюдавший это заболевание у цыплят, выведенных из импортного яйца. В птицеводческих хозяйствах промышленного типа ИБК был отмечен А. С. Митропольским в г. Болезнь регистрируется во всех странах с развитым промышленным птицеводством , , , 2, 0, 7. Показано, что при оптимальном содержании поголовья появление инфекционного бронхита в хозяйстве снижает доходы на по сравнению с гипотетическим стадом, свободным от ИБК 0. В совокупности, вред, наносимый ИБК, делаег его самой большой отдельной проблемой среди факторов экономического ущерба, связанных с инфекционными заболеваниями, в Великобритании, а возможно, и в других странах со схожим спектром заболеваний и мерами по борьбе с ними. Фактически, ИБК распространен по всему миру . Экономический ущерб складывается из снижения эффективности потребляемых кормов, привесов бройлеров во время откорма, снижении качества яиц и смертности. Поэтому ИБК постоянно признается американскими исследователями единственной наиболее общей болезнью как бройлеров, так и курнесушек . Среди цыплят раннего возраста с нефротической формой ИБК смертность является обычной 1, 9. Смертность среди бройлеров иногда может достигать 0. Ранние публикации сообщают о смертности, в основном при ассоциации с вторичной инфекцией. Однако наиболее серьезные последствия инфекции выражаются в ухудшении качества несушек и заметном отставании в росте выживших цыплят , . В дополнении к этому ИБК признан инициатором патологического процесса,
приводящего к аэросаккулиту iii, что приводит к значительным экономическим потерям вследствие выбраковки бройлеров в период откорма. Высокозаразная природа заболевания и многочисленность серотипов вируса ИБК осложняют попытки предотвращения заболевания иммунизацией и повышают их цену . До недавнего времени считалось, что естественными хозяевами для вируса ИБК являются только куры. К инфекционному бронхиту восприимчивы цыплята всех возрастов и взрослые птицы, не имеющие иммунитета к вирусу ИБК 4. Тем не менее, сообщения из Великобритании подтверждают, что и фазаны в естественных условиях могут быть хозяевами вируса ИБК , а в условиях фермы они восприимчивы к ИБК в той же степени, что и цыплята. При этом наблюдается также снижение яйценоскости и высокая смертность. Однако некоторые виды фазанов явно невосприимчивы к ИБК, или, возможно, не каждый штамм вируса ИБК способен их инфицировать. Антитела к вирусу ИБК находили у индеек , куропаток и пингвинов в природе. Выделить от них данный вирус пока не удавалось 6. Коронавирус, сходный с вирусом ИБК, выделяли от диких водоплавающих птиц 4, 5, от содержащихся в неволе павлинов и попугаев 4, 5, от голубей 5. Сравнение нуклеотидной последовательности фрагмента гена 1 пяти изолятов вируса ИБК, выделенных в Китае от больных цыплят с признаками угнетения и респираторного поражения, а именно I, 2, 3, II4, и голубя показало их выраженное сходство между собой, составлявшее до ,6 нуклеотидной гомологии, и отличие от референтных штаммов.