Некоторые компоненты белков и липидов мембран субклеточных фракций мозга крыс при гипероксии

• Автор: Сулейманов, Альфред Кимович
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1983
• Место защиты: Ростов-на-Дону
• Количество страниц: 205 c. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение.

Глава I. Обзор литературы. II

1.1.Биохимические механизмы кислородной интоксикации II

1.2. Особенности химического состава и структуры мембран субклеточных фракций головного мозга

Глава 2. Постановка эксперимента и методы исследования

2.1. Постановка эксперимента.

2.2. Методы исследования.

2.2.1. Выделение субклеточных фракций больших полушарий головного мозга крыс

2.2.2. Электронная микроскопия субклеточных фракций больших полушарий головного мозга крыс
2.2.3. Исследование включения Слейцина в белки мембран субклеточных фракций больших полушарий головного мозга крыс. .
2.2.4. Дискэлектрофорез мембранных белков субклеточных фракций больших полушарий головного мозга крыс
2.2.5. Определение аминокислотного состава белков мембран субклеточных фракций больших полушарий головного мозга крыс .
2.2.6. Выделение неочищенных протеолипидов мембран субклеточных фракций больших полушарий головного мозга крыс и измерение их флуоресценции
2.2.7. Анализ жирных кислот липидов мембран субклеточных фракций больших полушарий головного
ыозга крыс методом газожидкостной хроматографии .
2.2.8. Выделение и фракционирование ганглиозидов больших полушарий и среднего мозга крыс. . .
2.2.9. Количественное определение содержания ганглиозидов .
2.2 Статистическая обработка результатов. . Глава 3. Результаты исследования белкового и липидного
компонентов мембран субклеточных фракций больших полушарий ыозга крыс при действии гипероксии .
3.1. Исследование белкового и липидного компонентов миелина больших полушарий мозга крыс при действии разных режимов гипероксии .
3.1.1. Включение Слейцина в белки миелина при гипероксии .
3.1.2. Аминокислотный состав белков миелина при гипероксии
3.1.3. Дискзлектрофоретическое разделение белков и исследование интенсивности флуоресценции протеолипидов миелина при гипероксии
3.1.4. Высшие жирные кислоты липидов миелина при гипероксии 0,3 МПа кислорода, 2 часа .
3.2, Исследование белкового и липидного компонентов мембран синаптосом больших полушарий ыозга крыс при действии разных режимов гипероксии
3.2.1. Включение Слейцина в белки мембран синаптосом при гипероксии
3.2.2. Аминокислотный состав белков мембран синаптосом при гипероксии. .
3.2.3. Дискэлектрофоретическое разделение белков и исследование интенсивности флуоресценции протеолипидов мембран синаптосоы при гипероксии
3.2.4. Высшие жирные кислоты липидов мембран синаптосом при гипероксии 0,3 МПа кислорода, 2 часа
3.3. Исследование белкового и липидного компонентов мембран митохондрий больших полушарий мозга крыс при действии разных режимов гипероксии .
3.3.1. Включение Слейцина в белки мембран митохондрий при гипероксии .
3.3.2. Аминокислотный состав белков мембран митохондрий при гипероксии . .
3.3.3. Дискзлектрофоретическое разделение белков и исследование интенсивности флуоресценции протеолипидов мембран митохондрий при гипероксии
3.3.4. Высшие жирные кислоты липидов мембран митохондрий при гипероксии 0,3 МПа кислорода,2 часа
3.4. Исследование белкового и липидного компонентов мембран микросом больших полушарий мозга крыс
при действии разных режимов гипероксии .
3.4.1. Включение Слейцина в белки мембран микросом при гипероксии.
3.4.2. Аминокислотный состав белков мембран микросом
при гипероксии .
3.4.3. Дискэлектрофоретическое разделение белков и исследование интенсивности флуоресценции протеолипидов мембран микросом при гипероксии . . Ю
3.4.4. Высшие жирные кислоты липидов мембран микросом при гипероксии 0,3 МПа кислорода, 2 часа . . ПЗ
3.5. Ганглнозиды больших полушарий и среднего мозга .
крыс при разных режимах пшероксии
Глава 4. Обсуждение результатов
Выгоды.
Литература


Регуляция поступления кислорода в ткани за счет урежения дыхания, уменьшения скорости кровотока и др. При гипероксичесной патологии резко возрастает содержание свободного, физически растворенного кислорода в плазме крови Прикладовицкий, Жиронкин, Карташев, Титов, , поступление в ткани мозга кислорода становится очень высоким, исчерпываются или повреждаются системы антиоксидантной защиты. Происходит окисление глутатиона . Герасимов и др. Сгаро, i, . Либе и др. Шерстнева, i . Н2О2 vi, , i, , . Установлено, что в мембранах существуют две системы перекисного окисления липидов ферментативная и неферментативная Каган и др. Ферментативная система активна в присутствии ионов железа, пирофосфата, восстановленного НАДФ Метелица, , vi, . Неферментативная система требует для своей работы ионы двухвалентного железа и аскорбат , а, б. Основной вклад в интенсификацию ПОЛ при гипероксии вносит аекорбатзависимая неферментативная система Кесельман, Клокова, . Гипероксия имеет четко выраженный мембранный эффект. Показано, что в ходе кислородного отравления происходит повреждение и гемолиз эритроцитов и выход гемоглобина в кровь Маслова, Громова, Внуков и др. Лукаш и др. Шерстнева, . С помощью электронной микроскопии обнаружены тигролиз и вакуолизация нейронов коры больших полушарий и таламуса ii, , , явления быстрого набухания в ганглиозных клетках Самойлик, . У животных в судорожной стадии кислородной интоксикации наблюдались набухание митохондрий коры больших полушарий и изменение их внутренней структуры Хлобыстов, Федоренко, . Показано изменение проницаемости клеточных мембран для ионов К4 и На, угнетение активного транспорта Са в митохондриях мозга и печени Мацынин, Федоров, , i,
. Важную роль в изменении проницаемости мембран для ионов и ключевых субстратов может играть уменьшение содержания восстановленных НАД и НАДФ при гипероксии i, , , i, . Действие гипероксии на мембраны мозга проявляется и в нарушении гематоэвцефалического барьера. Шерстнев, Внуков, Шерстнев, . Важную роль в кислородной патологии играет нарушение проницаемости мембран лизосом Лукаш и др. АШвоп, . Нарушение проницаемости лизосом мозга приводит к повышению в цитоплазме активности таких ферментов, как кислые протеиназы, ДНКазы, фосфатазы и др. Карташева, Чихачев, Лукаш и др. Выход из лизосом кислых пептидгидролаз широкого спектра действия и атака ими эндогенных субстратов клетки является одним из важнейших звеньев усиления сдвигов метаболизма в мозгу при гипероксии Кричевская, Лукаш, . Изменение структуры и функции мембран при гипероксии может быть обусловлено рядом причин. Среди них необходимо отметить образование лизоформ липидов и усиление их удаления из мембран Аристархова и др. Суслова, Владимиров, , влияние про
дуктов ПОЛ на стабильность структурных белков мембран Древаль, , на активность ферментов, участвующих в создании ионного градиента Шерстнева, Каган и др. Модификация мембран при гипероксии затрагивает как фосфолипидный, так и белковый компонент. В фосфолипидах мозга, легких и эритроцитов происходит увеличение содержания лизофосфатидилхолина и фосфатидилинозитов на фоне снижения количества фосфатвдилхолина и фосфатидилэтаноламина Кесельман, Френкель и др. При остром кислородном отравлении 0,7 МПа в мозгу крыс увеличивается экстрагируемость водонераствориыых белков детергентами тритон X 0, додецилсульфат натрия, изменяется их электрофоретический спектр Древаль, . В экстрагируемых белках показано повышенное содержание гидрофобных аминокислот и изменение в содержании серусодержащих аминокислот. Эти данные свидетельствуют о нарушении белоклипидных комплексов и усилении солюбилизации гидрофобных белков мембран мозга Древаль, . Одним из возможных механизмов повреждения мембран при гипероксии может быть образование поперечных сшивок между молекулами белка, приводящее к образованию полимерных продуктов. Так, при индукции ПОЛ была обнаружена олигомеризация интегральных белков мембран родопсина Погожаева и др. Сазависимой АТФазы саркоплазматического ретикулума Корчагин и др. Федорова, а, б.