Окислительная модификация белков при экспериментальном гломерулонефрите

• Автор: Дебель Махди Мустафа
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 129 с. : ил

Оглавление

Список сокращений

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Активные формы кислорода

1.2. Специализированная антиоксидантная защитная

система организма

1.2. ГСупероксиддисмутаза

1.2 .2. Ка гал аза

1.2.3. Пероксидаза

1.2.4. Глютатион пероксидаза

1.2.5. глютатионтрансферазы
1.3. Активные формы кислорода при патологических состояниях
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Объекты исследования 5
2.2. Определение концентрации белка
2.3. Определение активности каталазы
2.4. Определение активности супероксиддисмутазы
2.5. Определение общих липидов
2.6. Определение триацилглицеридов ТАГ
2.7. Определение холестерина
2.8. Определение мочевины
2.9. Определение содержания остагочного азота
2 Определение содержания малонового альдегида в сыворотке крови, эритроцитах и почках крыс
2 Определение содержания карбонильных групп в белках плазмы крови и почках крыс
2 Определение образования битирозинов и окисления триптофана в белках плазмы крови и ткани почек
2 Электрофоретические методы
2Выделение и очистка каталазы крыс
2 Исследование параметров обмена каталазы
2 Статистическая обработка результатов эксперимента
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТОВ
3.1. Морфологическое исследование почек при экспериментальной модели хронического гломерулонсфрита
3.2. Исследование липидного обмена в крови и почках крыс при гломерулонефрите
3.3. Перекисное окисление липидов
3.4. Исследование белкового обмена в крови и почках крыс при гломерулонефрите
3.5. Активность прооксидантной системы у крыс
3.5.1. Спонтанная окислительная модификация белков сыворотки
крови и почек крыс при гломерулонефрите
3.5.2. Металлкатализируемое окисление белков
3.5.3. Спектрофлуометрическая регистрация окисления триптофана и образование битирозина
3.6. Оценка степени фрагментации окисленных белков
3.7. Активность антиоксидантной системы
3.8. Обмен каталазы в эритроцитах, печени и почках интактных
крыс и у животных при гломерулонефрите
3.9. Влияние экстракга караганы колючей на некоторые
биохимические показатели крови и почек крыс
при гло,мерулонефрите
Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


В последние годы в литературе стали появляться факты, указывающие на то, что дисбаланс между окислительным воздействием на клетки почек и их антиоксидантной защиты играет основную роль в механизме патологии гломерулярных заболеваний. i . Цель и задачи исследования. Основной целью работы являлось исследование интенсивности окислительного стресса с использованием в сравнительной оценке комплекса биохимических показателей крови и почек экспериментальных животных, в том числе отражающих состояние антиоксидантной ферментативной системы и степень окислительного повреждения белков и липидов на экспериментальной модели хронического гломерулонефрита нефрит Хейманна. Выбор экспериментальной модели хронического гломерулонефрита у крыс. Проведение сравнительного анализа нарушений белкового и липидного обменов и ПОЛ в плазме крови, эритроцитах и почках экспериментальных животных при хроническом гломерулонефрите. Проведение сравнительного анализа состояния антиоксидантной защитной и прооксидантной систем с целью оценки окислительного стресса в процессе развития гломерулонефрита у крыс. Расчет скорости накопления, распада и время функционирования каталазы в крови, почках и печени интактных животных и крыс с гломерулонефритом. Научная новизна работы. В результате проведенных исследований были изучены в сравнительном аспекте нарушения белкового и липидного обменов в плазме крови, эритроцитах и почках экспериментальных животных при хроническом гломерулонефрите. Полученные данные свидетельствуют о глубоких нарушениях белкового обмена и отражают степень повреждения почечных клубочков и характер поражения функции почек. О чем свидетельствует снижение гломерулярной функции почек, характеризующейся потерей белка тканями организма. Основным достижением данной работы представляется всесторонний анализ интенсивности окислительной деструкции белков по степени окисления триптофана и образованию битирозина в системе Фентон, а также по увеличению уровня карбонильных групп в белковых молекулах крови и почек крыс при хроническом гломерулонефрите. Показана целесообразность использования данных методик для оценки состояния прооксидантной системы у больных с почечной недостаточностью. Проведено комплексное исследование основных показателей ферментативной антиоксидантной защитной системы крови, эритроцитов и почек экспериментальных животных при гломерулонефрите. Выявлена определенная взаимосвязь между уровнем окислительной модификации белков тканей с показателями ферментативной антиоксидантной системы крови и почек у крыс с гломерулонефритом. В работе были впервые рассчитаны параметры кругооборота скорости синтеза и распада, время функционирования катал азы интактных животных и крыс при гломерулонефрите. Установлено, что резкое падение активности каталазы в крови, почках и печени крыс при развитии гломерулонефрита обусловлено резким снижением скорости его биосинтеза накопления в этих тканях. Научнопрактическая значимость работы. Работа носит экспериментальнотеоретический характер. Результаты исследования расширяют и углубляют представления о неиммунных молекулярных механизмах патогенеза хронического гломерулонефрита. Полученные результаты использовались в лекционных курсах и лабораторном практикуме на кафедре биохимии для студентов СанкПетербургской Государственной химикофармацевтической Государственной академии. Апробация работы. Материалы, использованные в диссертационной работе, докладывались и представлялись на У1 Международной конференции Биоантиоксидант Москва, Россия, , IX Российском национальном конгрессе Человек и лекарство Москва, Россия, , X нефрологическом семинаре СПб, Россия, . Публикации. По теме диссертации опубликовано 7 работ. Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 9 машинописных страницах состоит из введения, обзора литературы, экспериментальной части описания материалов и методов исследования, результатов собственных исследований, обсуждения результатов, выводов и списка цитируемой литературы 8 источников. Материал диссертации проиллюстрирован рисунками и содержит таблиц.