Формирование белково-протеиназного комплекса и технологических достоинств пшеницы на основе направленного изменения агрофона

• Автор: Суслянок, Георгий Михайлович
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1996
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 201 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

В В Е Д Е Н И Е.

1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Общая характеристика протеолитических

ферментов

1.2. Протеолитические ферменты растений.

1.3. Протеолитические ферменты семян

растений.

1.4. Протеолитические ферменты пшеницы

1.5. Белковые ингибиторы протеаз растений.

1.6. Белковые ингибиторы протеаз пшеницы

2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
И С С Л Е Д О В А Н И Й
2.1. Агрохимическая характеристика почв.
2.2. Характеристика исследуемых образцов зерна
2.3. Определение содержания белка и активности протеиназ.
2.3.1. Подготовка образцов к исследованию.
2. 3. 2. Определение белка по методу Лоури
2.3.3. Определение активности протеиназ по методу Ансона.
2.4. Определение активности ингибиторов протеиназ

2.4.1. Выделение белковых ингибиторов протеиназ
2.4.2. Определение активности ингибиторов трипсина.
2.4.3. Выделение ферментных препаратов
нейтральных протеиназ
2.4.4. Определение активности ингибиторов нейтральных протеиназ.
2.5. Определение фракционного состава белков.
2.6 Определение молекулярных масс белковых фракций зерна пшеницы методом гельхроматографии на
сефадексе йЮО.
2.7. Анализ мукомольных и хлебопекарных свойств
зерна озимой пшеницы.
3. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
3.1. Формирование технологических достоинств зерна пшеницы на основе направленного изменения агрофона
3.1.1. Влияние агрофона на физические показатели качества зерна озимой пшеницы.
3.1.2. Влияние агрофона на химические показатели качества зерна озимой пшеницы.
3.2. Влияние агрофона на формирование белковопротеиназного комплекса зерна озимой пшеницы
3.2.1. Активность нейтральных протеиназ, автолитическая способность, активность ингибиторов трипсина и нейтральных протеиназ зерна пшеницы, выращенного на различных агрофонах
3.2.2. Фракционный состав белков зерна озимой
пшеницы, выращенного на различных агрофонах
3.3. Технологическая характеристика зерна озимой
пшеницы, выращенного на различных агрофонах
3.3.1. Характеристика мукомольных свойств исследуемого зерна пшеницы
3.3.2. Оценка хлебопекарного достоинства муки из исследуемого зерна пшеницы
3.3.3. Улучшение хлебопекарного достоинства муки из зерна пшеницы, выращенного на различных агрофонах.
ВЫВОДЫ.
С II И С О К ЛИТЕРАТУРЫ
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность


Из зеленой водоросли i i с помощью фракционирования сульфатом аммония и хроматографией на фенилсефарозе и гидроксилапатите выделена и очищена Са2зависимая протеиназа i, x, . Из гриба i i выделен комплекс протеаз, проявляющих активность в области слабощелочных значений . С помощью метода дискэлектрофореза в присутствии ДДС и желатины показано, что протеиназы представлены двумя группами ферментов с молекулярной массой 00 и 00 Д. Кладницкая, Валуева, Мосолов и др. Из корней кукурузы выделена протеиназа, специфичность которой изучали с использованием в качестве субстратов бычьего сывороточного альбумина и нитратредуктазы из vi. В обоих случаях исследуемая протеиназа расщепляла связь, в образовании которой участвовала карбоксильная группа аланина. , , . К кислым отнесены две протеазы, локализованные в клеточных стенках развивающихся листьев овса. В цитоплазме была обнаружена нейтральная протеаза V V, V , . Активность нейтральной протеиназы, выделенной из экстракта листьев овса методом электрофокусирования в ПААТ, подавлялась ингибиторами металлопротеиназ V V, V , V , . Исследование активности кислой протеазы клубеньков люцерны позволило установить, что максимальная активность фермента наблюдается при 5,0. , V, . К группе металлоферментов относятся хорошо известные гураин из коры и корней i, агаваин из агавы сизаль Мосолов, . В растениях обнаружены также пептидазы , , , . Хотя наличие у растений ферментов этого типа показано давно, количество работ, посвященных изучению их свойств, до последнего времени ограничено. Янсен с сотрудниками , , , и Жубер , выделили из оболочек плодов цитрусовых аминопептидазу и карбоксипептидазу С. Уэллсом , из молодых растений фасоли. По данным Эштона и Дамена , , в семядолях тыквы содержатся два фермента со свойствами лейцинаминопептидазы. В листьях красного клевера обнаружена лейцинаминопептидазаi, i, . В картофеле обнаружена митохондриальная процессирующая пептидаза, которая удаляет концевые сигнальные последовательности у белков, импортируемых в митохондрии. Фермент не нуждается в добавлении ионов металлов, но ингибируется ЭДТА и 1. , i, . Открытыми остаются вопросы, связанные с механизмом регуляции активности протеиназ растений, а также их физиологической роли. Проведен ряд исследований активности протеолитических ферментов в зеленом соке люцерны, клевера, злаковых трав, листьев сахарной свеклы, люпина, вики, гречихи и водяного перца, в ходе которых было установлено, что она колеблется в широких пределах 47. В щелочном растворе 8,5 активность протеаз резко снижается, особенно для соков люцерны и вики i, , . Установлено увеличение протеолитической активности в период старения листьев и репродуктивных органов Кондратьев, Камалова, . Протеолитические ферменты растений представляют собой довольно разнообразную группу ферментов и их дальнейшее изучение представляет несомненный интерес для исследователей. Протеолитические ферменты играют важную роль в процессах жизнедеятельности семян растений. Связь между активностью протеолитических ферментов и процессом прорастания семян была показана еще классическими работами А. Н.Баха, А. И.Опарина и их сотрудниками Бах, Опарин, Венер, Опарин, Балабуха, Бах, Опарин, . Наличие зависимости между активностью протеаз и процессом прорастания впоследствии подтверждено работами многих исследователей Проскуряков, Бундель, Бухарина, Кретович, Токарева, Благовещенский, Колобкова, Кудряшева, , i . Шутов, Белозерский, . Современная научная литература располагает большим числом данных о многочисленных ферментах в покоящихся и прорастающих семенах растений Левицкий, Типисева, Витол, Колеснов, Ибрагимов, Ахмедов, Ли, . Исследованию протеиназ семян растений посвящены работы ТахаЛабашАбазида , Шаненко , ТерМовсесян , Дунаевского и др. Ихсановой , Диаби , Карпиленко .