Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО
Змачинская, Татьяна Брониславовна
03.00.04, 14.00.36
Кандидатская
2003
Нижний Новгород
119 с. : ил
Стоимость:
499 руб.
Введение
Глава I. Обзор литературы
1.1. Препараты иммуноглобулинов
1.2. Методы фракционирования плазменных белков
1.2.1. Разделение белков путем адсорбции
1.2.2. Разделение белков путем осаждения
1.2.3. Методы получения комплекса иммуноглобулинов — М, А
Глава II. Материалы и методы исследований
11.1. Материалы
И.2. Методы
П.2.1. Количественное определение содержания
классов иммуноглобулинов
П.2.2. Определение молекулярного состава исследуемых препаратов
методом колоночной гель-хроматографии
11.2.3. Определение электрофоретической однородности белков методом электрофореза на пленках из ацетата целлюлозы
П.2.4. Определение общих липидов
11.2.5. Определение белкового состава исследуемых препаратов
методом иммуноэлектрофореза
П.2.6. Определение содержания белка, показателей цветности,
прозрачности
П.2.7. Определение активности плазминогена
11.2.8. Определение уровня антител
11.2.9. Определение пирогенности, токсичности
И.2.10.Методы статистической обработки
Глава III. Результаты и их обсуждение
III. 1. Разработка комплексной технологической схемы выделения иммуноглобулинов с целью максимального использования иммунологического потенциала плазмы крови
111.1.1. Распределение иммуноглобулинов
по фракциям в процессе спиртового метода
фракционирования плазмы крови человека
III. 1.2. Усовершенствование технологии спиртового
фракционирования плазмы крови в процессе получения высокоочищенных препаратов иммуноглобулинов
для внутримышечного введения
III. 1.3. Технологические аспекты дополнительного
извлечения иммуноглобулина О из осадка Б
Ш.1.4. Разработка метода получения комплекса
иммуноглобулинов - и 1§А
Ш.2. Характеристика полученных препаратов иммуноглобулинов
Ш.2.1. Физико-химические и биологические свойства
иммуноглобулина для внутримышечного введения
111.2.2. Характеристика иммуноглобулина в,
выделенного из осадка Б
111.2.3. Показатели качества комплексного иммуноглобулинового препарата, содержащего 1§0, ^А,
Заключение
Выводы
Список литературы
Обозначение фракций плазмы:
Осадок А8 - фракция I Кона (фибриноген, антигемофильный фактор) Центрифугат А8 - супернатант после отделения фракции I Кона (содержит все основные белки плазмы - альбумин, а-, (К у-глобулины) Центрифугат А - фракция 1У+У Кона (альбумин, а-глобулины, церулоплазмин)
Осадок А - фракция ІІ+ІІІ Кона (^О, ^А, 1§М, а- и Р-глобулины)
Осадок Ах - фракция 11+111 Кона после повторного переосаждения (^О, ^А, ^М, а- и Р-глобулины)
Центрифугат Ах - супернатант после повторного переосаждения фракции ІІ+ІІІ Кона (следовые количества белков плазмы)
Осадок Б - фракция III Кона (^в, 1§А, ^М, а- и Р-глобулины)
Осадок Бх - фракция ІІ+ІІІ Кона после дополнительного извлечения 1§Сл из осадка Б (^в, 1§А, 1цМ, а- и Р-глобулины)
Осадок В - фракция II Кона (І£0)
Список сокращений
БСА - бычий сывороточный альбумин ВИЧ - вирус иммунодефицита человека ДЭАЭ - диэтиламиноэтил ИГ - иммуноглобулин
ИГВВ - иммуноглобулин для внутривенного введения ИГВМ - иммуноглобулин для внутримышечного введения ИЭФ - иммуноэлектрофорез ЛУК - ледяная уксусная кислота ПЭГ - полиэтиленгликоль РП - регламент производства ТХУ - трихлоруксусная кислота ФС - фармакопейная статья ФСП - фармакопейная статья предприятия 1§А - иммуноглобулин А 1§И - иммуноглобулин в - иммуноглобулин М
ГЛАВА III. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Ш.1. Разработка комплексной технологической схемы выделения иммуноглобулинов с целью максимального использования иммунологического потенциала плазмы крови
111.1.1. Распределение иммуноглобулинов по фракциям в процессе спиртового метода фракционирования плазмы крови человека
Базовой основой разработки комплексной технологической схемы выделения иммуноглобулинов служил метод фракционирования с помощью этанола (52, 53, 99, 125). Достоинством данного способа является возможность фракционирования больших объемов плазмы и одновременного получения нескольких препаратов. Проведение процесса при отрицательных температурах и бактериостатическое действие этанола позволяют проводить процесс в нестерильных условиях. Нижегородское предприятие по производству бактерийных препаратов использует, так называемый, вариант Б спиртового метода (рис. 1), который наряду с ^О, из фракций, образующихся в процессе очистки иммуноглобулинов, позволяет получать альбумин, фибринолизин, церулоплазмин. К недостаткам данной технологии следовало отнести длительный цикл производства, связанный с необходимостью выстаивания полуфабрикатов в течение 1-3 месяцев для удаления нестабильных белков и примесей, отсутствие воспроизводимых методов извлечения ^А, и большие потери по стадиям фракционирования и, как результат этого, низкий выход целевого продукта. В 70-е годы для варианта Б были разработаны методы выделения ^А, 1^М и проводилось дополнительное извлечение ^О. Однако, метод получения ^А, при масштабировании плохо воспроизводился и не вошел в производство, а технология дополнительного извлечения была запрещена, так как анализ качества препаратов, включая ви-
Название работы | Автор | Дата защиты |
---|---|---|
Регуляция полиферментных комплексов дегидрогеназ 2-оксокислот | Буник, Виктория-Лариса Ивановна | 2001 |
Нейроспецифический белок 10-40-4: идентификация, выделение и некоторые физико-химические и иммунологические свойства | Клюшник, Татьяна Павловна | 1984 |
Использование термостабильных ДНК-полимераз для анализа возбудителей вирусных и бактериальных инфекций методом полимеразной цепной реакции | Глухов, Александр Иванович | 1998 |