Исследование фактора некроза опухолей- α и дефензинов при инфаркте миокарда и некоторых инфекционных заболеваниях

• Автор: Панютич, Елена Анатольевна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1992
• Место защиты: Минск
• Количество страниц: 102 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК ОСНОВНЫХ СОКРАЩЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ.

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Структура ФИО и молекулярные механизмы действия.

1.2. Биохимические изменения под действием ФНО

1.3. Системные эффекты ФНО

1.4. Определение ФНО в биологических образцвх.

1.5. ФНО при инфекционных заболеваниях

1.6. ФНО при не инфекционных заболеваниях.

1.7. Нейтрофилы и ФНО.

1.8. Дефензшш.
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Материалы исследований.
2.2. Методы исследований .
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Цитотоксическая активность образцов сыворотки к плазмы крови здоровых доноров при определении содержания ФНО в биотесте.
3.2. Цитотоксическая активность сывороток крови больных инфекционными заболеваниями и инфарктом миокарда.
3.3. Определение содержания ФНО в биологических образцах с помощью иммуноферментного анализа
3.4. Имлунсферментный анализ для определения уровня ФНО при некоторых инфекционных заболеваниях и инфаркте миокарда.
3.5. Ишуноферментный анализ для определения уровня дофензинов
3.6. Исследование уровня дефензинов при некоторых инфекционных заболеваниях и инфаркте миокарда
3.7. ляциошшй анализ уровня ФНО и уровня дефензинов
Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ
ВЫВОДЫ.
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Стимуляторами синтеза ФНО являются липополисахарид, многие микроорганизмы и продукты их жизнедеятельности 4 , вирусы и их компоненты 7, , а также сам ФНО и другие цитокины. ФНО оказывает широкий спектр воздействий на многие ткани, в том числе на эндотелий сосудов, повышая его адгезивность и провоцируя тромбообразование . Действие ФНО затрагивает жировой, белковый и углеводный обмены. В результате влияния ФНО на транскрипционном и трансляционном уровнях в печени снижается образование альбумина и трансферрина 4 и одновременно усиливается биосинтез определенного спектра острофазных белков . Исследователи неоднократно пытались выявить взаимосвязь между увеличением синтеза ФНО при заболеваниях и их течением. В литературе имеются данные об изменении уровня ФНО в сыворотке крови при сепсисе , менингите , ревматоидном артрите 7, системной красной волчанке 6 и некоторых других патологиях. Участие ФНО в развитии многих заболеваний не исследовано. В связи с этим существует проблема создания и совершенствования тест систем для определения минимальных количеств ФНО в биологических образцах. Дефензины или i i1,2,3,4 представляют собой группу катионных пептидов с молекулярной массой 34 кДа. Дефензины составляют 57 общего белка нейтрофилов человека, являются их специфическими маркерами и служат основными факторами бактерицидного эффекта нейтрофилов. Активация нейтрофилов сопровождается их дегрануляцией и выходом дефензинов в межклеточное пространство . При этом создаются предпосылки для реализации цитотоксического действия по отношению к клеткам различных тканей . Известен ряд заболеваний с выраженными тканевыми поражениями, в патогенезе которых важная роль принадлежит нейтрофилам ревматоидный артрит, инфаркт миокарда, эмфизема и др. Участие дефензинов в развитии данных и других заболеваний не исследовано. Практически не изучено взаимодествие дефензинов с цитокинами, в частности, с ФНО. Исследование участия ФНО и дефензинов в развитии некоторых заболеваний может быть перспективным как для совершенствования теоретических представлений об их патогенезе, так и для разработки новых прогностических критериев, важных для практической медицины. Исследовать уровни ФНО и дефензинов в сыворотке и плазме крови и определить их прогностическое значение при инфаркте миокарда и некоторых инфекционных заболеваниях. Задачи исследований. ФНО в сыворотке и плазме крови. Создать ишуноферментные тестсистемы для количественного определения ФНО и дефензинов в сыворотке и плазме крови. Исследовать цитотоксическую активность ФНО в крови больных инфарктом миокарда и различными инфекционными заболеваниями в биотесте. Иследовать концентрации ФНО в крови больных инфарктом миокарда и некоторыми инфекционными заболеваниями, используя иммуноферментный анализ ИФА. Изучить закономерности дегрануляции нейтрофилов i vi. Исследовать содержание дефензинов в крови больных инфарктом миокарда и некоторыми инфекционными заболеваниями, используя ИФА. Основные методические подходы. В исследования включали образцы сыворотки и плазмы крови здоровых доноров и больных лиц обоего пола, разного возраста. Для определения биологической активности ФНО в сыворотке и плазме использовали цитотоксическиЯ биотест на мышиных фибробластоидных клетках линии 9. Для идентификации ФНО применяли нейтрализующие моноклональные антитела. Содержание ФНО в крови здоровых доноров, больных инфарктом миокарда и инфекционными заболеваниями исследовали также в ИФА на основе мышиных моноклональных и кроличьих поликлональных антител. Концентрации дефензинов определяли в ИФА на основе двух типов моноклональных антител. Научная новизна и теоретическая значимость работы. Впервые показано различие в использовании сыворотки и плазмы крови для определения уровня ФНО в биотесте и в иммунофзрментном аназе. Проведен анализ неспецифической цитотоксической активности сывороток крови, что позволило установить адекватные биологические образцы для проведения исследований.