Окисление феназепама в биологических мембранах

• Автор: Метешкин, Юрий Валентинович
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1983
• Место защиты: Одесса
• Количество страниц: 164 c. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

ГЛАВА I. ХИМИЧЕСКИЕ, ФИЗИКОХИМИЧЕСКИЕ И БИОЛОГИЧЕСКИЕ

СВОЙСТВА ФЕНАЗЕПАМА.

IЛ. Синтез феназепама, его метаболитов, их химические и физикохимические свойства

1.2. Фармакологические свойства феназепама

ГЛАВА 2. МЕТАБОЛИЗМ И КИНЕТИКА РАСПРЕДЕЛЕНИЯ ФЕНАЗЕПАМА

2.1. Основные пути биохимической трансформации феназепама в организме экспериментальных животных

2.2. Метаболизм 5бром2хлор2аминобензофе

2.3. Распределение феназепама и его метаболитов

в тканях и органах различных видов животных.
ГЛАВА 3. ИССЛЕДОВАНИЕ ОКИСЛЕНИЯ ЛЕКАРСТВ НА ЦЕЛОСТНОМ
ОРГАНИЗМЕ,ИЗОЛИРОВАННЫХ КЛЕТКАХ И МИКРОСОМАХ
3.1. Целостный организм
3.2. Изолированные гепатоциты .
3.3. Микросомы.
РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ ОБ
СУВДЕНИЕ
ГЛАВА 4. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
4.1. Методы исследования окисления феназепама, проводимые на целостном оргизме
4.2. Выделение субклеточных фракций из гомогена
та печени крыс и мышей .Л
4.3. Методика и выделения изолированных гепатоцитов белых крыс
4.4. Методы определения активности ферментов окисления ксенобиотиков микросомной
фракции печени крыс .
4.4.1. Активность НАДШцитохром Р4 ре
дуктазы
4.4.2. Определение содержания цитохрома
4.4.3. Определение содержания цитохрома
4.4.4. пГидроксилазная активность
4.4.5. Деметилирующая активность
4.4.6. Глюкозо6фосфатная активность.
4.4.7. Определение содержания Д1К и ШК
4.4.8. Дыхательная активность микросом
4.5. Спектральные изменения комплекса цитохрома
Р4 с феназепамом и 3оксиметаболитом
4.6. Постановка опытов .
4.7. Определение феназепама и его метаболитов в
постинкубационных жидкостях и в продуктах экскреции аналитические методы определения .
4.8. Математическая обработка
4.8.1. Регрессионный анализ .
4.8.2. Оптимизация метода экскрецшЛфеназепама и его метаболитов из гомоге
натов печени крыс .
4.8.3. Дисперсионный анализ .
4.8.4. Особый вариант двухфакторного дис
персионного комплекса достоверность различий двух рядов регрессии
4.8.5. Расчет электронной плотности молекул 1,4бенздиазепинов .
ГЛАВА 5. ВЫВЕДЕНИЕ ФЕНАЗЕПАМА И ЕГО МЕТАБОЛИТОВ ИЗ ОРГАНИЗМА РАЗЛИЧНЫХ ВИДОВ ЭКСПЕРИМЕНТАЛЕНЫХ ЖИВОТНЫХ
5.1. Метаболизм и экскреция феназепама у кроликов
5.2. Экскреция феназепама и его метаболитов у
диких норок
5.3. Метаболизм феназепама в организме кур
ГЛАВА 6. ОКИСЛЕНИЕ ФЕНАЗЕПАМА В ИЗОЛИРОВАННЫХ ГЕПАТОВДТАХ
БЕЛЫХ КРЫС .
6.1. Распределение феназепама и его метаболитов в субклеточных фракциях гепатоцитов крыс и
мышей
ГЛАВА 7. ОКИСЛЕНИЕ ФЕНАЗЕПАМА МИКРОСОМАМИ ПЕЧЕНИ
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ
7.1. Метаболизм феназепама в микросомах печени экспериментальных животных .
7.2. Ферментативная кинетика окисления феназепама монооксигеназами микросом печени животных .
7.3. Механизмы реакций окисления феназепама
в биологических мембранах
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ ПРЕДЛОЖЕНИЯ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Метод массспектрометрии позволил тщательно изучить структуру феназепама и его метаболитов, благодаря своей высокой информативности и чувствительности. Молекула феназепама, под действием электронного удара, распадается на фрагменты, которые характерны для других 1,2дигидроЗН1,4бенздиазепин2онов 5 . При отщеплении от молекулярного ионарадикала образуется интенсивный пик, вследствие влияния сильного электронакцепторного заместителя. Кроме этого, у феназепама существует специфический путь расщепления, где происходит отщепление атома хлора, с образованием трех молекулярных ионрадикалов , 7б . Как будет сказано далее, массспектрометрический метод позволил подробно изучить дислокацию гидроксильных групп в ароматических ядрах метаболитов феназепама, тем самым предоставив возможность получить полную картину биотрансформации этого препарата в организме экспериментальных животных. С Основные свойства феназепама, как и ряда других производных 1,4бенздиазепинов, связаны с наличием относительного положительного заряда на атоме азота 4 вследствие смещения электронной плотности неподеленной электронной пары по ДВОЙНОЙ СВЯЗИ группировки 4. При кислотном гидролизе феназепама в жестких условиях образуются 2аминобензофенон и хиназолин2он . Благодаря уменьшению электронной плотности у атома азота, за счет электронноакцепторного эффекта атома брома, в седьмом положении, а также оттягиванию 5Гэлектронного облака к атому хлора хлорфенильного заместителя, феназепам довольно легко восстанавливается на ртутнокапельном электроде. Восстановление протекает по азометиновой связи, аналогично другим 1,2дигидроЗН1,4бенздиазепин2онам, с образованием 7бром5охлорфенил1,2,3, 4тетрагидро5Н1,4бенздиазепин2она 8 . Феназепам обладает ярко выраженным транквилизирующим, седативным, противосудорожным, миорелаксантным, снотворным и активирующим действием. Важной отличительной особенностью фармакологического действия феназепама является высокая дифференцированность и избирательность действия, что отличает его от диазепама, нитразепама и лоразепама. По своему противосудорожному действию антагонизм с коразолом феназепам показал наибольшую активность 0,7 мгкг. Также довольно высокая активность была показана при использовании в качестве судорожного агента тиосемикарбазида ЭД 0,2 мг кг, который в определенной степени отражает действие препарата на ГАМКэргическую систему 3 . Наряду со способностью повышать порог агрессивной реакции, феназепам устраняет агрессивное поведение животных, вызываемое действием электрического тока. Так, агрессивность устранялась при внутрибрюшинном введении феназепама в дозе 0,51,0 мгкг крысам и 0,2,0 мгкг мышам, что значительно превосходит в этом показателе диазепам. В условиях конфликтной ситуации, феназепам, в дозе 0,51,О мгкг, нормализует поведение крыс, устраняя беспокойство и напряжение, нарушения картины электрокардиограмм и дыхания. Феназепам обладает отчетливым снотворным действием, проявляющимся в зависимости от вводимой дозы, потенцированием гексеналового сна и его пролонгированием. Важным является то, что феназепам потенцирует и пролонгирует гексеналовый сон в дозах, которые не вызывают нарушение координации движений. Аналогично существующим транквилизаторам, феназепам способен изменять, в зависимости от дозы, спонтанную двигательную активность у мышей. Так, двигательная активность животных увеличивается в 1,6 раза, по сравнению с контролем, при малой дозе феназепама 0, мгкг. Постепенное повышение доз до 0,51,0 иг кг приводит к снижению двигательной активности в 2 раза за два часа. По своему активирующему и седативному действию феназепам близок по активности к другим транквилизаторам бенздиазепинового ряда . Очень важное свойство феназепама его низкая токсичность, что отличает его от некоторых других транквилизаторов бенздиазепинового ряда. Так, ДЦзд феназепама в 3,7 2,5 и 2,4 раза выше, чем у хлордиазэпоксида, диазепама и нитразепама, соответственно, и только немного уступает лоразепаму ЛЦд лоразепама в 1, раза выше, чем у феназепама 0 .