Генетическое своеобразие локуса рецептора липопротеинов низкой плотности в Санкт-Петербургской популяции

• Автор: Захарова, Фаина Михайловна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2001
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 119 с. : ил

СОДЕРЖАНИЕ.
Содержание

Список сокращений.

Введение

1. Обзор литературы

1.1 Клиническая и биохимическая характеристика СГ.

1.1.1 Метаболизм холестерина

1.1.2 Семейная гиперколестеринемия.

1.2 Рецептор ЛНП ключевой белок в метаболизме холестерина

1.2.1 Клеточный цикл рецептора ЛНП.

1.2.2 Структура гена и мРНК рецептора ЛН1.

1.2.3 Структура рецептора ЛНП
1.3 Классификация мутаций в гене рецептора ЛНП.
1.4 Изучение нейтральной вариабельности гена рецептора ЛШ.
1.5 Методы тестирования функциональной активности рецептора ЛНП
1.6 Проблема в изучении связи генотипфенотип при СГ.
2. Материалы и методы
2.1 Пациенты
2.2 Выделение ДНК из свежей и замороженной крови.
2.3 Полимеразная цепная реакция
2.4 Анализ амплификата электрофорезом в ПААГ.
2.6 Гетеродуплексный анализ
2.7 ББСРанализ .
2.8 Секвенирование ДНК.
2.9 Рестрикционный анализ
2. Статистические методы, использованные в работе
3. Результаты
3.1 Поиск мутаций и полиморфизмов в гене рецептора ЛНП.
3.1.1 Поиск мутаций в гене рецептора ЛНП .
3.1.2 Идентификация полиморфизмов в гене рецептора ЛНП.
3.2. Изучение частоты встречаемости полиморфизмов, обнаруженных в исследуемых экзонах гена рецептора ЛНП.
4. Обсуждение
4.1 Поиск мутаций в гене рецептора ЛНП у больных СГ в СанктПегербурге
4.2 .Анализ данных по частоте встречаемости полиморфизмов, обнаруженных в исследуемых экзонах гена рецептора ЛНП.
5. Выводы
Список литературы


Сопоставить полученные данные с частотами аллелей этих ПДРФ, определенных для групп СГ и здоровых лиц в других Европейских популяциях. Научная новизна полученных результатов. В результате проведенного исследования выявлены пять мутаций СХ, Н9Н, Е7Х, Е, Т в гене рецептора ЛНП у больных с СГ, причем две из них Н9Н и Е являются новыми. Японии, впервые была обнаружена нами в Европе в СанктПетербурге. Впервые в Северозападном регионе проведено изучение ряда характерных для нашей популяции генетических полиморфизмов и исследованы частоты их встречаемости. Показано генетическое своеобразие локуса рецептора ЛНП в СанктПетербургской популяции. Научнопрактическая и теоретическая значимость работы. Теоретический интерес представляют описанные впервые в гене рецептора мутации у пациентов с СГ Мутации Н9Н, . X, 1 уникальны и характерны только лля Российской популяции, мутации СХ и 5I впервые обнаружены в России. Впервые в СанктПетербурге обнаружены четыре полиморфизма длин рестрикционных фрагментов I ПДРФ. 1 ПДРФ, тс II ПДРФ, v П ПДРФ. 1 ПДРФ, определена частота встречаемости аллелей полиморфизмов в исследуемой выборке и проведено сравнение полученных данных с частотами аллелей этих же полиморфизмов в Европе. Показано, что аллели i II ПДРФ, I ПДРФ и v II ПДРФ встречаются с одинаковой частотой в группе с СГ и в группе контроля, а аллели с сайтом I ПДРФ и без сайга ПДРФ встречались чаще в группе контроля, чем в группе с СГ. Практическая ценность работы заключается в разработке методов быстрой детекции с помощью специфических эндонуклеаз идентифицированных нами мутаций. Выявление данных мугаций с помощью экспресс диагностики может быть использовано для генетического консультирования и своевременнот лечения больных СГ. Так, своевременное использование лекарственных препаратов например, статинов позволяет значительно снизить у больных СГ риск развития атеросклероза и предотвратить у них развитие тяжелых форм ИБС. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ. Клиническая и биохимическая характеристика СГ. Метаболизм холестерина. Синтез холестерина. В организме взрослого человека содержится около 0 г холестерина примерно 2 мг холестерина на 1 г массы тела Климов и Никульчева, . Синтез холестерина осуществляется в клетках почти всех органов и тканей, но его количества, значимые для метаболизма организма в целом, синтезируются в печени , в стенке тонкой кишки 5 и в коже 5, а основным путем поступления холестерина в клетки является рсцепторолосредованный эндоцитоз. Процесс синтеза холестерина, в первом приближении, можно разделить на три стадии 1 синтез мевалоновой кислоты, 2 образование сквалена из мевалоновой кислоты и 3 циклизация сквалена и образование холестерина Климов и Никульчева, . Реакцией, лимитирующей скорость синтеза холестерина, является восстановление 3гидрокси3метилглутарилкофермента А ГМГКоА в мевалоновую кислоту стадия 1. Данная реакция катализируется ГМГ КоА редуктазой. Холестерин является одним из важнейших строительных компонентов клеточных мембран. Его присутствие уменьшает текучесть липидного слоя, оказывает влияние на проницаемость мембран для малых водорастворимых молекул и увеличивает упругость и механическую прочность бислоя. Именно поэтому плазматические мембраны эукариот содержат примерно одну молекулу холестерина на каждую молекулу фосфолипида. Другим важным свойством холестерина является то, что он является предшественником синтезируемых в организме стероидов гормонов, витамина и, желчных кислот. Катаболизм холестерина протекает в печени окисление холестерина в желчные кислоты, в надпочечниках и плаценте образование из холестерина кортикоидных гормонов, в ткани семенников и яичников образование половых стероидных гормонов Климов и Никульчева, . Транспорт холестерина из мест его основного синтеза печени и кишечника осуществляется через кровь в составе липопротеинов, которые проникают в клетки других тканей и органов главным образом рсцепторопосрелованным эндоцитозом.