Молекулярно-генетическое исследование остеопороза

• Автор: Селезнева, Лиана Ильдусовна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Уфа
• Количество страниц: 119 с. : 108 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1 .Эпидемиология остеопороза

1.2.Классификация остеопороза.

1.3.Патогенез постменопаузального остеопороза.

1.4.Рентгеновская денситометрия в диагностике остеопороза

1.5.Генетические факторы риска развития остеопороза.

1.5.1. Ген цени коллагена 1 типа

1.5.2. Ген рецептора витамина V

1.5.3. Ген рецептора эстрогенов 1.

1.5.4. Ген кальцитонина
1.5.5. Гены цитокинов , I1, 1, I1
1.5.6. Ген фактора некроза опухоли и система .
1.5.7. Ген белка 5 5 и сигнальный путь.
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1.Материалы исследования
2.2.Методы исследования.
2.2.1. Выделение геномной ДНК
2.2.2. Полимеразная цепная реакция синтеза ДНК.
2.2.3. Рестрикционный анализ.
2.2.4. Метод электрофореза.
2.2.5. анализ.
2.2.6. Секвенирование
2.3. Статистическая обработка результатов.
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1.Исследование полиморфных вариантов гена альфа1 цепи
коллагена первого типа 1 у женщин из Волго
Уральского региона России.
3.1.1. Изучение полиморфных локусов Т, i и гена в этнических группах ВолгоУральского региона
3.1.2. Анализ ассоциаций полиморфных локусов , i и 6 и гаплотипов гена с риском развития переломов.
3.1.3. Анализ ассоциаций полиморфных локусов , i и I6 гена I с
остеопорозом
3.1.4. Анализ ассоциаций полиморфных локусов 7, i и и гаплотипов гена с уровнем МПКТ
3.2. Исследование полиморфных вариантов гена белка 5, связанного
с рецептором липопротеина низкой плотности 5 у женщин
из ВолгоУральского региона России
3.2.1. Изучение полиморфных локусов СТ, СТ,
гена 5 в этнических группах ВолгоУральского региона.
3.2.2. Анализ ассоциаций полиморфных локусов СТ,
СТ, I5 гена 5 с риском развития переломов.
3.2.3. Анализ ассоциаций полиморфных локусов СТ,
СТ, гена 5 с риском развития
остеопороза.
3.2.4. Анализ ассоциаций полиморфных локусов СТ,
СТ, гена 5 с уровнем МПКТ.
3.3. Исследование полиморфных вариантов гена рецептора
витамина V у женщин из ВолгоУральского региона
России
3.3.1. Изучение полиморфного локуса гена V в
этнических группах ВолгоУральского региона
3.3.2. Анализ ассоциаций полиморфных локусов I, I и Iи гаплотипов гена V с риском развития переломов.
3.3.3. Анализ ассоциаций полиморфных локусов I, I и I гонг V с остеопорозом
3.3.4. Анализ ассоциаций полиморфных локусов I, I и I и гаплотипов гена V с уровнем МПКТ.
3.4. Исследование полиморфного варианта ТЛААп гена витамин
связывающего белка . у женщин из ВолгоУральского
региона России
3.4.1. Изучение полиморфного локуса ТАААп гена в этнических группах ВолгоУральского региона.
3.4.2. Анализ ассоциаций полиморфного локуса ТАААп гена с риском развития переломов
3.4.3. Анализ ассоциаций полиморфного локуса ТАААп гена с риском развития остеопороза
3.4.4. Анализ ассоциаций полиморфного локуса ТАААп гена с уровнем МПКТ
3.5. Исследование полиморфного варианта САгена кальцитонина
у женщин из ВолгоУральского региона
России
3.5.1. Изучение полиморфного локуса СА гена в этнических группах ВолгоУральского региона России
3.5.2. Анализ ассоциаций полиморфного локуса СА гена
с риском развития переломов.
3.5.3. Анализ ассоциаций полиморфного локуса СА гена
с риском развития остеопороза.
3.5.4. Анализ ассоциаций полиморфного локуса СА гена
с уровнем МПКТ
3.6. Исследование полиморфных вариантов гена рецепторов
эстрогенаа у женщин из ВолгоУральского региона
России
3.6.1. Изучение полиморфных локусов с.ТС и с.4I гена I в этнических группах ВолгоУральского региона.
3.6.2. Анализ ассоциаций полиморфных локусов о.ТС, с. и ТАп и гаплотипов гена 1 с риском развития переломов
3.6.3. Анализ ассоциаций полиморфных локусов с.ТС, с. и ТАп гена 1 с риском развития остеопороза.
3.6.4. Анализ ассоциаций полиморфных локусов с.ТС, . и ТА гена 1 с показателями МПКТ
3.7. Исследование уровня эстрадиола и кальцитонина в сыворотке
крови у женщин постменопаузального возраста.
3.7.1. Исследование уровня эстрадиола и кальцитонина в группах женщин с переломами и без переломов.
3.7.2. Анализ ассоциаций уровня эстрадиола и кальцитонина с показателями минеральной плотности костной ткани
3.7.3. Анализ ассоциаций уровня эстрадиола с полиморфными вариантами с.ТС, . и ТАптонг .
3.7.4. Анализ ассоциаций уровня кальцитонина с полиморфным локусом СА гена
3.8. Анализ межгенных взаимодействий в детерминации риска развития переломов у женщин русской и татарской этнической принадлежности.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Эстрогены оказывают прямое действие на ОБ, снижая их пролиферацию, также под влиянием эстрогенов в ОБ снижается секреция интерлейки на ИЛР, интерлейкина6 ИЛ6, фактора некроза опухолиа ФНОа активных стимуляторов резорбирутощей активности i, . Изменения, которые развиваются в костной ткани вследствие недостаточности функции яичников, имеют комплексную природу. Дефицит эстрогенов, приводящий к увеличению числа и активности ОК, является ключевым звеном в патогенезе постменопаузального 1. Известно, что с наступлением менопаузы наблюдается существенное увеличение скорости ремоделирования костной ткани iii, . Высокая активность ОК вызывает перфорацию трабекул в месте резорбции, что ведет к нарушениям микроструктуры костной ткани и снижению ее плотности i, . Кроме гипоэстрогении, важная роль в развитии постменопаузального ОП принадлежит недостаточной секреции прогестерона. В пременопаузе уровень прогестерона снижается достаточно быстро и опережает снижение концентрации эстрадиола. Прогестерон стимулирует функции ОБ, активирует синтез цитокинов и инсулиноподобного фактора роста II ИФР ii, . Потеря костного вещества при постменопаузальном ОП более выражена в трабекулярной кости, где процессы костного ремоделирования протекают более активно. Поэтому первые признаки ОП появляются в позвонках, которые на состоят из трабекулярной ткани. При ОП происходит истончение и кортикальной кости вследствие усиления резорбции на эндостальной поверхности, что приводит к прогрессирующей порозности внутреннегокоркового слоя греч. Таким образом, современные данные указывают на то, что кость представляет собой ткань с высоким уровнем обменных процессов. В течение всей жизни происходят процессы перестройки и обновления костных структур, в основе которых лежит активность костных клеток, прежде всего ОБ и ОК. Сущность патогенеза постменопаузального ОП сводится к вызванному дефицитом половых гормонов нарушению процесса ремоделирования кости в сторону преобладания резорбции костной ткани над ее формированием. За последние годы было разработано много неинвазивных методов исследования костной ткани, позволяющих с высокой точностью определять минеральную костную массу и минеральную плотность костной ткани МПКТ как во всем скелете, так и в отдельных его участках. Во многих одномоментных и проспективных популяционных исследованиях было продемонстрировано, что при каждом снижении МГПСТ на 1 стандартное отклонение риск перелома возрастает примерно в 1, раза i, . Для оценки МПКТ в настоящее время используют рентгеновские, фотонные и ультразвуковые денситометры, а также количественная компьютерная томография. Самой высокой разрешающей способностью и точностью измерения обладают приборы, основанные на методе двухэнергетической рентгеновской абсорбциометрии ДРА, X. При исследовании вычисляются следующие параметры минеральная костная масса, выраженная в граммах на 1 см длины обследованного участка кости и МПКТ, выраженная в граммах на 1 см2 площади обследованного участка кости. Современные модели двухэнергетических костных денситометров позволяют измерять МПКТ поясничного отдела позвоночника, проксимальных отделов бедра, костей предплечья и всего тела. Для оценки изменений МПКТ у больного по сравнению с нормой разработаны два критерия Т и . По критерию МПКТ у больного сравнивают со среднестатистической нормой для того же возраста, а по Ткритерию с нормой, соответствующей пику костной массы. В обоих случаях результат выражают в стандартных квадратичных отклонениях от референтной нормы. Согласно рекомендациям ВОЗ, если снижение костной массы у пациентов определяется в пределах от 1,0 до 2,5 от пиковой костной массы, то можно говорить об остеопении. Диагноз остеопороза ставят в том случае, когда МПКТ снижена более чем на 2,5 по Ткритсрию, а наличие при этом хотя бы одного перелома свидетельствует о тяжелом остеопорозе , . В клинической практике измерение МПКТ с помощью аппаратов ДРА проводится с целью диагностики остеопороза, а также оценки динамики изменения МПКТ в результате лечения. Данные многочисленных исследований говорят о существенном вкладе генетических факторов в развитие остеопороза.