Влияние холестерина на плазматические мембраны опухолевых и нормальных клеток

• Автор: Иванова, Лидия Ивановна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 116 c. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ
ВВЕДЕНИЕ .

Глава I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Холестерин биологических мембран .

1.1.1. Холестерин как структурный компонент биомембран .

1.1.2. Влияние холестерина на активность

меыбраносвязанных ферментов .

1.1.3. Участие холестерина биомембран в

регуляции процессов клеточной пролиферации

1.2. Холестерин и канцерогенез

1.2.1. Холестерин плазмы крови и развитие новообразований

1.2.2. Регуляция биосинтеза и распада холестерина в опухолевых клетках
1.2.3. Холестерин плазматических мембран опухолевых клеток
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Сравнительное исследование содержания липидов в нормальных и в опухолевых клетках.
3.2. Встраивание и выведение холестерина из
плазматических мембран опухолевых и нормальных клеток с помощью липосом .
3.2.1. Характеристика липосом .
3.2.2. Изменение липидного состава опухолевых и нормальных клеток при встраивании и выведении холестерина из плазматических мембран .
3.3. Изменение микровязкости липидов мембран опухолевых и нормальных клеток при встраивании и выведении холестерина
3.4. Активность Иа, КАТФазы и 5нуклеотидазы при изменении отношения холестеринфосфолипиды в опухолевых и нормальных клетках .
3.5. Влияние встраивания холестерина в плазматические мембраны клеток гепатомы Зайделя, опухоли яичвиков и лимфобластного лейкоза Ь на
их перевиваемость
Глава 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ .
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Измерить содержание холестерина, фосфолипидов, активности Иа, КАТФазы и 5вуклеотидазы в опухолевых и вормальных клетках. Исследовать изменение отношения холестеринфосфолипиды в опухолевых и нормальных клетках при экспериментальном встраивании и извлечении холестерина. Исследовать микровязкость фосфолипидного бислоя мембран опухолевых и нормальных клеток при изменении молярного отношевия холестеринфосфолипиды. Выяснить взаимосвязь между ыикровязкостью мембран опухолевых и нормальных клеток и активностью мембраносвязанных ферментов ыа, КАТФазы и 5нуклаотидазы. Выяснить влияние встраивания холестерина в клетки гепатомы Зайделя, лимфобластного лейкоза Ы2Ю и асцитной опухоли яичников на их перевиваемость экспериментальным животным. Научная новизна и практическая ценность работы. Полученные данные свидетельствуют о снижении активности Иа, КАТФазы и бьнуклеотидазы в расчете на миллиграм фосфолипидов в этих клетках. Показано, что эффективность встраивания и выведения холестерина из плазматической мембраны опухолевых и нормальных клеток зависит от величины исходного показателя молярного отношения холестеринфосфолипиды. Наиболее существенное повышение содеркания холестерина наблюдалось в опухолевых клетках, для которых были характерны самые низкие исходные звачения отношения холестеринфосфолипиды. Выявлено, что встраивание холестерина в клетки трех типов асцитных опухолей и двух типов нормальных клеток сопровождается увеличением микровязкости липидов мембран, оцененной с помощью флюоресцентных и спиновых зондов. При выведении холестерина из обогащенных им мембран наблюдалось уменьшение микровязкости фосфолипидного бислоя мембран. Для опухолевых и нормальных клеток продемонстрирована регуляторная роль холестерина по отношению к активности ферментов плазматической мембраны На, КАТФазы и 5нуклеотидазы. При увеличении микровязкости мембран, вследствие встраивания холестерина, наблюдалось уменьшение активности Иа, КАТФазы и 5нуклеотидазы, и наоборот, при снижении микровязкости липидной фазы мембран, обогащенных холестерином, после его выведения наблюдалось возрастание активности этих ферментов. Положение о регуляторной роли холестерина нашло подтверждение в опытах по перевивке опухолевых клеток, в которое было встроено дополнительное количество холестерина. В этой части работы продемонстрировано цитостатическое действие холестерина на клетки некоторых асцитных опухолей. Данные о сникении отношения холестеринфосфолипиды в опухолевых клетках могут быть использованы при разработке новых диагностических подходов в онкологии, а результаты по цитостатическому действию холестерина на опухолевые клетки для разработки новых методов противоопухолевой терапии. Глава I. I.I. I.I. Согласно современным представлениям мембраны клеток млекопитающих в своем составе содержат нейтральные липиды и фосфолипиды. Нейтральные липиды представлены исключительно холестерином, тогда как фосфолипиды весьма гетерогенны по составу. Холестерин рассматривается как структурный компонент липидвого бислоя плазматических мембран клеток v, . По данным многих исследователей внутриклеточные мембраны содержат значительно меньше холестерина или не содержат его вообще Ашап . . v, . О структурной роли холестерина, локализованном в мембране, судят в настоящее время по взаимодействию его с другими липидными компонентами мембраны, фосфолипидами. Рассматривая взаимодействие холестерина с фосфолипидами в биомембранах, следует прежде всего обратить внимание на количественное соотношение этих липидных компонентов, определяющее во многом свойства мембраны. Молярное отношение холестеринфосфолипиды в плазматической мембране лимфоцитов человека и мыши равно 0, и 0,, а в лейкемических лимфоцитах 0, и 0, соответственно i, . Плазматические мембраны эритроцитов, а также ыиелиновые мембраны нервных клеток характеризуются высоким молярвым отношением холестеринфосфолипиды 0, и 1, соответственно i, , .