Влияние природных и синтетических полимеров на биохимические свойства липаз из различных источников

• Автор: Тульская, Екатерина Валерьевна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 138 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

УСЛОВНЫЕ ОБОЗНАЧЕНИЯ И СОКРАЩЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. Обзор литературы.

1. Ли политические ферменты.

1.1. Липаза из поджелудочной железы свиньи

1.2. Липаза из гриба рода Мпсог.

1.3. Липаза, выделенная из бактерий рода

1.4. Кинетика липолиза

2. Общие принципы иммобилизации ферментов.

2.1. Носители для иммобилизации ферментов.

2.2. Мегоды иммобилизации ферментов.
3. Особенности иммобилизации липаз.
3.1. Адсорбция
3.2. Ковалентная иммобилизация липаз
3.3. Включение или микрокапсулирование
Глава 2. Материалы и методы.
1. Перечень используемых реакгивов.
2. Методики приготовления растворов
2.1. Приготовление рабочего раствора субс фата
2.2. Приготовление растворов липаз
2.3. Приготовление растворов полиэлектролитов.
3. Методы и приборы.
3.1. Методы и аппаратура для измерения активности липаз
3.2. Исследование липазы в комплексах с полиэлекфолптами методом межфазной тензиометрии
4. Статистическая обработка результатов
Глава 3. Результаты собственных исследований и их обсуждение
1. Влияние белкового окружения на активность липаз из различных источников.
2. Влияние полиэлектролитного окружения на активность липаз
из поджелудочной железы свиньи и гриба vi
3. Регуляция активности липаз путем направленного изменения условий среды.
3.1. Влияние среды на активность липаз из поджелудочной железы свиньи и гриба vi.
3.2. Влияние температуры на активность липаз из поджелудочной железы свиньи и гриба vi.
3.3. Влияние температуры на активность липаз в комплексе с синтетическими полиэлектролитами
3.3.1. Изменение активности липазы из поджелудочной железы свиньи в комплексе с полиэлектролитами при увеличении температуры.
3.3.2. Изменение активности липазы из гриба vi
в комплексе с полиэлектролитами при увеличении температуры
4. Изучение динамического поверхностного натяжения систем липазы из поджелудочной железы свиньи с природными и синтетическими полиэлектролитами
4.1. Измерение динамического поверхностного натяжения
растворов липазы из поджелудочной железы свиньи в смеси с природным полимером бычьим сывороточным альбумином
4.2. Измерение динамического поверхностного натяжения
растворов липазы из поджелудочной железы свиньи в смеси с полиглутаминовой кислотой.
4.3. Измерение динамического поверхностного натяжения
растворов липазы из поджелудочной железы свиньи в смеси с полилизииом.
4.4. Измерение динамического поверхностного натяжения
растворов липазы из поджелудочной железы свиньи в трехкомпонентном комплексе с полиЬлизином и поли
глутаминовой кислотой .
4.5. Измерение динамического поверхностного натяжения растворов липазы из поджелудочной железы свиньи в смеси с полистиролсульфонатом натрия.
4.6. Измерение динамического поверхностного натяжения растворов липазы из поджелудочной железы свиньи в смеси с полидиаллилдимстиламмоний хлоридом.
4.7. Измерение динамического поверхностного натяжения растворов липазы из поджелудочной железы свиньи в трехкомпонентном комплексе с полистиролсульфонатом натрия и полидиалли диметилам моний хлоридом
5. Модели ферментативных супрамолекулярных наноразмерных
систем.
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Установлено значительное увеличение ферментативной активности и стабильности липаз в полимерных системах при возрастании температуры, что имеет большую практическую ценность для новых биотехнологических и биохимических методов. Полученные параметры динамического поверхностного натяжения систем липазы с природными и синтетическими полимерами важны как для понимания механизмов основных биохимических процессов в организме животных, так и для применения в биомедицинской диагностике. Результаты диссертационной работы используются для обучения студентов 3, 4 и 5 курсов ветеринарнобиологического факультета ФГОУ ВПО МГАВМиБ но специальности Биохимия. Основные положения практической значимости работы отражены в 3 патентах РФ 0, 1, 6 Зайцев С. Ю., Каштиго Т. В., Тульская Е. В., Царькова М. С., Коршикова . Данные но влиянию природного полимера бычьего сывороточного альбумина на активность липаз из различных источников. Данные по влиянию синтетических полиэлектролитов полистирол сульфоната натрия и полидиаллилдимегиламмоний хлорида на активность липаз из различных источников. Данные по влиянию температуры на активность липаз из различных источников в системах с указанными синтетическими полиэлектролитами. Параметры динамического поверхностного натяжения систем панкреатической липазы с синтетическими и природными полимерами. Включение липазы в системы с полиэлсктролитами в определенных соотношениях как эффективный способ регулирования каталитической активности липаз из различных источников. Модели супрамолекулярных наноразмерных систем, представляющих собой различные типы комплексов липазы, поликатиона, полианиона и эмульгированного триацилглицерола. ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 1. Липолитические ферменты липазы играют валеную роль в обмене липидов у животных 7, 8, , 4. Они относятся к классу гидролаз класс 3. Почти все липолитические ферменты относятся к подкласу 1 и являются гидролизами эфиров. Традиционно липолитические ферменты относят к гидролазам эфиров карбоновых кислот КФ 3. Липазы способны катализировать 4 типа реакций таких как 1 гидролиз липидов и эфиров, 2 этерификация, 3 трансэтерификация, 4 перенос ацильных групп , 1. Многие липазы имеют сродство к гидрофобным поверхностям, поверхностям эмульсионных частиц и мембранам , . Липазы, используемые в данной работе это гидролазы сложных эфиров глицерина и жирных кислот, т. Панкреатическая липаза фермент, который преимущественно вырабатывается поджелудочной железой, а также выделяется в небольших количествах слюнными железами и слизистыми оболочками желудка, легких и кишечника . Липаза принимает участие в расщеплении нейтральных жиров, поступающих в кишечник с пищей , 9. Кроме того, этот фермент нашел широкое применение при исследованиях в области химии липидов и биохимии, поскольку он специфически гидролизует сложные эфиры третичных спиртов. Это его свойство широко использовалось для анализа и синтеза жиров и других глицеридов , , , 2. Панкреатическая липаза рис. ООО у свиньи и оптимум 8, . Позиционная специфичность по отношению к первичным эфирным связям имеется, но не во всех случаях. Данный фермент расщепляет триглицериды, находящиеся в эмульгированном состоянии 8. Рис. Липаза из поджелудочной железы свиньи Млекопитающие не способны усваивать поступающие с пищей триглицериды в интактном виде. Для всасывания григлицеридов в кишечном тракте необходимо, чтобы они были частично гидролизованы. Этот гидролиз осуществляется пищеварительными липазами, которые продуцируются у млекопитающих в поджелудочной железе, а у низших животных в соответствующих ей органах например, у костистых рыб в диффузном панкреасе, у членистоногих в гепатопанкреасе. У млекопитающих фермент образуется в ацинарных клетках поджелудочной железы и накапливается в зимогенных гранулах, которые содержат набор пищеварительных ферментов или их проферментов 1. Из этих гранул липаза высвобождается в специальный проток, по которому панкреатический сок поступает к месту своего назначения в тонкий кишечник. Данных, свидетельствующих о наличии профермента, или зимогена липазы, не имеется, и нет никаких причин думать, что таковой существует.