Трансдукция сигнала интерлейкина-1 по сфингомиелиновому пути при стрессе: модулирующее действие глюкокортикоидных гормонов и низкомолекулярных пептидов

• Автор: Пиванович, Ирина Юрьевна
• Шифр специальности: 03.00.04, 14.00.16
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2002
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 150 с.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК УСЛОВНЫХ ОБОЗНАЧЕНИЙ.

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Интерлейкнн1 и внутриклеточная рапсдукдия его сигнала.

1.1.1. Семейство молекул интерлейкина1

1.1.2. Особенности продукции интсрлсйкика1 и его основные биологические

эффекты

1.1.3. Рецепторы интсрлсйкика1. Формирование рсценторассоинированного

комплекса, обеспечивающего траисдукцию сигнала цнтокина

1.1.4. Обзор известных путей сигнальной трансду киии

1.1.4.1. Сфингомнелиновый путь сигнальной трансдукцнн интерлейкина1.
1.1.4.2. Ней гральная сфингомиелиназа ключевой фермент
сфингомнелннового пути сигнальной транслукцнн
1.1.4.3. Некоторые биологические эффекты вторичного мессенджера сфингомнелннового пути сигнальной зрансдукции церамида и
его производного сфингозина
1.2. Стрессиндуцироваплые изменения функций нейроэндокринной и
иммунной систем организма
1.2.1. Влияние стресса на защитные реакции организма.
1.2.2. Функциональные взаимодействия интерлейкина
и глюкокортикоидных гормонов в развитии стрессрсакцпг
1.2.3. Иммуномодулируюиис свойства интерлейкина1 и
глюкокортикоидных гормонов.
1.2.4. Эндогенные неп гиды как коммуникационные сигналы
между иммунной и нейроэндокринной системами
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Общие условия работы
2.2. Экспериментальные животные
2.3. Экспериментальные модели
2.3.1. Модели экспериментального стресса.
2.3.2. Модель экспериментального понижения уровня корт икос герона
в крови мышей адрсиалэктомня.
2.3.3. Модель экспериментального повышения уровня кортикостерона
в кропи мышей глококоргикоидная нагрузка.
2.4. Опенка влияния препаратов рИЛ1 р. дсксаметазона. эпиталона и
вилона на активность нейтральной сфингомнелиназы в мембранной фракции Р2 коры головного мозга и мембранах тнмоцитои мышей
но модифицированному методу И.О.,
2.4 1. Получение мембранной фракции Р2 из коры больших полушарий
головного мозга мышей но методу i и соавт. .
2.4.2. Получение мембран из тимоцитов мышей по модифицированному
методу i .
2.4.3. Определение удельной активности нейтральной сфингомнелиназы по модифицированному методу и . .
Оценка влияния препаратов рИЛ1 р. лексамсгазоиа. эпиталона и
вилона на активность нейтральной сфингомнелиназы
2 5. Прямой радиоиммунологический метод определения концентрации
кортикостерона в крови мышей Гончаров Н.I. и соавт.,
2.6. Определение концеш рации ИЛ1а в крови мышей
радноиммунологическим меюдом
2.7. Определение величины гуморального иммунного ответа
2.7.1. Определение количества антитслообразуюших клеток ДОК
в селезенке.
2.7.2. Определение обших тигров антител АТ в сыворотке крови.
2.8. Статистическая обработка результатов следования
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВЛДЯ
3.1. Исследование трансдукции сигнала интерлейкина1 р но сфишомне
лнновому пути в мембранах нервных клеток и гимошпов мышей
3.1.1. Зависимость уровня базальной активности нейтральной сфингомнелинаэы и Р2фракцни коры головного мозга н мембранах
тимоцитов мышей от концентрации белка в препаратах мембран
3.1.2. Влияние шерлсйкнна на активность нсйральнон сфинго
мнелнназы в мембранах нервных клеток и тимоцитов мышей
3.2. Анализ изменения трансдукции сигнала интерлейкина1Р по сфишомнелииовому пути в мембранах нервных клеток и тимоцитов мышей в условиях стресса и при модификациях уровня
эндогенных глюкокортикоидных гормонов в крови, вызванных адрсналэктомней и введением гидрокортизона в различных дозах
3.2.1. Влияние ротационного и комбинированного стрсссорных воздействий на уровень кортнкостсрона и интерлейкина1а в кровн мышей и
на величину гуморального иммунною ответа
3.2.2. Влияние ротационного и комбинированною стрсссорных воздействий на активность нейтральной сфингомиелиназы
в Р2фракцни коры головного мозга и мембранах тимоцитов мышей
3.2.3. Изменение активности нейтральной сфингомиелиназы в Р2фракции коры головного мозга и мембранах тимоцитов мышей после адрсналэктомни и введения гидрокортизона
3.3. Эффекты действия эниталона и вилона на трансдукц ю сигнала интерлейкина0 по ефннгомнелиновому пути в мембранах нервных
клеток и тимоцитов мышей.
3.3.1. Влияние эпнталона и вилона на активность нейтральной сфингомиелиназы в мембранах нервных клеток и тимоцитов мышей
3.3.2. Сочетанное влияние интерлейкина. эпнталона и вилона
на активность нейтральной сфингомиелиназы в мембранах нервных
клеток и тимоцитов мышей.
3.3.3. Изучение влияния эпиталона и вилона на активность нейтральной сфингомиелиназы н нервных и иммунокомпетентныч клетках мышей, подвергнутых действию ротационного и комбинированного стрессов
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ.
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Приоритетный характер носят результаты исследования, указывающие на стимулирующее действие низкомолекулярных пептидов вилона и эпиталона в условиях i vi на активность НСМазы и их модулирующее влияние на трансдумшю сигнала ИЛ1р по СМ пути в мембранах нервных клеток и тимоцитов мышей. Впервые покатано нормализующее действие вилона и эпиталона в определенных концентрациях на измененную под действием иммуносунрессирующсго и иммуностимулирующего стрессов активность НСМазы в Р2фракцин коры головного мозга и мембранах тимоцитов экспериментальных животных. Представленная работа посвящена анализу изменений трансдукцин сигнала ИЛ1 по сфингомнс. ГК гормонов в крови, в мембранах нервных клеток и тимоцитов мышей. Работа носит фундаментальный характер, и ее значение заключается, прежде всего, в установлении того факта, что активация НСМазы является общим звеном в клеточномолекулярных механизмах реализации взаимодействия нервной и иммунной систем организма при дестабилизирующих воздействиях. Установленные в работе изменения активности НСМазы в клеткахмишенях, индуцированные действием экспериментального стресса и модификацией уровня эндогенных глюкокортнкондов в кропи животных, могут рассматриваться как один из информативных показателей стрессиндуцированных изменений функций иммунной системы организма. СМ пути сигналов известных биологически активных веществ, в том числе и ИЛ1. Установленное нормализующее действие нммуномодулирующих пептидов на измененную при действии стрессов различной длительности и интенсивности активность НСМазы в мембранах нервных клеток и тимоцнтов экспериментальных животных, а также, проявление пептидами совместно с ИЛ1 б модулирующих эффектов на активность фермента в клеткахмишенях, является предпосылкой для дальнейшего исследования стресспротективаых и иммунорегулирующих свойс1в этих препаратов. Изменение активности ПСМазы, отражающее икгснсивность трансдукции сигнала ИЛ по СМ пути, является информативным показателем, который может быть использован для тестирования эффектов действия фармакологических препаратов и различною рода воздействий. Интерлейкин активирует нейтральную сф и шомпол и пазу в мембранах нервных клеток и тимоцнтов мышей. Иммуностимулирующий ротационный стресс увеличивает активность НСМазы в мембранах как нервных клеток, так и тимоцнтов мышей, а иммуносупрссснрующий комбинированный вызывает ее угнетение. Модификации уровня эндогенных глюкокортикоидных гормонов В крови, вызванные адреналэктомией у мышей и внутрибрюшинным введением гидрокортизона в низкой и высокой дозах, вызывают изменение активности НСМазы в мембранах нервных клеток II тимоцн тов. ПСМазы, измененную при действии ротационного и комбинированного стрессорных воздействий. Пептиды внлон и эпиталон модулируют эффекты действия ИЛ на активность НСМазы в мембранах нервных клеток, а вилон в мембранах гимоциюв мышей. Диссертация изложена на 0 страницах машинописного текста, построена традиционным образом и состоит из следующих разделов введение, обзор литературы в двух подглавах, материалы и методы, результаты исследования в трех нодглавах, обсуждение полученных результатов и выводы. Библиографический список использованной литературы содержит 6 источников, подавляющее большинство которых работы последнего десятилетия. Текст иллюстрирован рисунками. По теме диссертации опубликовано научных работ в центральных отечественных и зарубежных журналах, а также в сборниках по материалам Всероссийских и Международных конференций. Материалы работы докладывались и обсуждались па заседании СанктПетербургского научною общества иммунологов . ФинскоРоссийской Зимней Школы Твярмиыне, Финляндия. Российских и Международных научных форумах, в том числе 1й Мсдикобиологичсской Конференции молодых ученых СанктПетербурга . Конференции молодых у ченых с между народным участием Фундаментальные науки и прогресс клинической медицины Москва, Х, Международном Конгрессе но нейронммуномодуляции Лугано, Швейцария, , 4м Конгрессе Российской Ассоциации Аллергологов и Клинических Иммунологов РААКИ Москва, .