Аутоантитела к ДНК в сыворотке крови здоровых лиц

• Автор: Коликова, Юлия Олеговна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Казань
• Количество страниц: 127 с. : ил

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ.
ГЛАВА 1. УЧАСТИЕ ИММУННОЙ СИСТЕМЫ В РЕГУЛЯЦИИ ФИЗИОЛОГИЧЕСКИХ ПРОЦЕССОВ В ОРГАНИЗМЕ.

1.1. Естественные аутоантитела в сыворотке крови.

1.2. Происхождение аутоантител.

1.3. Аутоантитела к ДНК

характеристика и биологическое значение.

1.3.1. Выявление аутоантител к ДНК в сыворотке крови здоровых лиц.

1.3.2. Взаимодействие антиДНК аутоантител с ДНК.

1.3.3. Свойства аутоантител к ДНК

1.3.4. Биологическая активность аутоантител к ДНК
1.4. Интеграция функциональных систем организма в поддержании гомеостаза
1.4.1. Взаимосвязь иммунной и эндокринной систем.
1.4.2. Возраст и содержание половых гормонов.
1.4.3. Возрастные изменения иммунной системы.
Заключение по обзору литературы.
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
2.1. Оборудование и реактивы
2.2. Объект исследования
2.3. Определение аутоантител к ДНК методом иммуноферментного анализа.
2.3.1. Подбор оптимальной концентрации конъюгата.
2.3.2. Определение специфичности аутоантител
к нативной и денатурированной ДНК
2.3.3. Статистическая обработка результатов
2.4. Осаждение иммуноглобулинов сыворотки крови
сульфатом аммония.
2.5. Обессоливание препаратов иммуноглобулинов
методом гельфильтрации.
2.6. Электрофорез иммуноглобулинов в полиакриламидном геле
2.7. Аффинная хроматография иммуноглобулинов
на ДНКцеллюлозе
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТОВ.
3.1. Содержание аутоантител к ДНК в сыворотке крови в норме
3.2.Уровень содержания аутоантител к ДНК
у здоровых лиц разных возрастных групп
3.3. Аутоантитела к ДНК в сыворотке крови мужчин и женщин
3.4. Специфичность аутоантител здоровых лиц
к нативной и денатурированной ДНК.
3.5. Выделение и характеристика аутоантител к ДНК.
3.5.1. Приготовление аффинных сорбентов
3.5.2. Выделение аутоантител к ДНК из сыворотки крови
3.5.3. Фракционирование аутоантител к ДНК
3.5.4. Фракционный состав аутоантител к ДНК сыворотки
крови мужчин и женщин
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.
ВЫВОДЫ.
ЛИТЕРАТУРА


Полученные результаты указывают на необходимость использования в качестве точки отсчета при оценке уровня содержания аутоантител к ДНК в сыворотке крови больных аутоиммунными заболеваниями уровень аутоантител к ДНК в сыворотке крови здоровых людей соответствующего возраста и пола. ДНК, может быть использован для ранней диагностики аутоиммунных заболеваний и выявления групп риска с учетом половой принадлежности здоровых лиц. Основные результаты исследований докладывались на III Республиканской научнотехнической конференции молодых ученых и специалистов Казань, научнопрактической конференции молодых ученых Казанской государственной медицинской академии Казань, XII юбилейной конференции Ферменты микроорганизмов Казань, VIII Всероссийском съезде неврологов Казань, II Российской конференции молодых ученых России с международным участием Москва, IV научнопрактической конференции молодых ученых и специалистов Республики Татарстан Казань, III Съезде Биохимического общества СанктПетербург, , а также на ежегодных итоговых научных конференциях Казанского государственного университета в г. По материалам диссертации опубликовано работ. ГЛАВА 1. Аутоантитела ААТ это антитела, циркулирующие в сыворотке крови здоровых индивидуумов в отсутствие преднамеренной специфической иммунизации антигеноммишеныо i . Среди публикаций довольно часто встречается еще одно название таких ААТ естественные ААТ. Впервые ААТ были обнаружены в сыворотке крови пациентов с аутоиммунными заболеваниями, характерной чертой которых является гиперпродукция ААТ к отдельным эндогенным антигенам АГ организма. Впоследствии в литературе стали появляться данные об обнаружении в сыворотке крови практически здоровых людей и неиммунизированных животных ААТ к самым различным макромолекулам и тканям собственного организма Добродеева и Суслонова, i . Iii . i . Было показано, что ААТ, содержащиеся в сыворотке крови здоровых лиц, способны реагировать с актином, тубулином, тиреоглобулином, миоглобином, фетуином, трансферрином, альбумином, цитохромом, коллагеном, инсулином i . Сидорова, . Мнение о том, что аутореактивность является непременным атрибутом патологического состояния, преобладало среди иммунологов вплоть до х гг прошлого столетия. Открытие способности антител реагировать с вариабельными областями аутогенных , привело к рассмотрению аутореактивности как важного элемента нормальной иммунной системы. Следствием этой гипотезы явилось предположение о том, что ААТ прежде всего развивались для распознавания своего, а способность антител к распознаванию несвоего была приобретена позже , . Семенов, . Диапазон специфичностей естественных аутореактивных ААТ человека для узнавания соответствующего набора аутоантигенов закладывается еще в раннем онтогенезе и остается стабильным на протяжении всей жизни . При сравнении спектра антигенной реактивности АЛТ в сыворотке крови детей 24 года, взрослых лет и пожилых людей старше лет, было показано, что аутореактивный репертуар I здоровых индивидуумов гомогенен как среди представителей каждой возрастной группы, так и между группами ix . . В частности, репертуар аутореактивности естественных ААТ у некоторых здоровых людей сохранялся неизмененным спустя лет ix . Необходимо подчеркнуть, что в данном случае речь идет именно о наборе специфичностей ААТ, а не об уровне их содержания, который с возрастом может подвергаться колебаниям. В литературе приводится интересное сравнение индивидуальный набор аутоантигенов и, соответственно, набор ААТ к ним в цельной сыворотке, по сути, являются своеобразным антительным аналогом отпечатка пальца каждого индивидуума , . Реактивность ААТ по отношению к аутоантигенам в цельной сыворотке не идентична активности, наблюдаемой в препаратах очищенных ААТ, поскольку в цельной сыворотке аутореактивность ААТ как бы замаскирована . Леках и др. .