Адаптация микоплазм (Mycoplasma Gallisepticum S6) к неблагоприятным условиям

• Автор: Музыкантов, Алексей Александрович
• Шифр специальности: 03.00.04, 03.00.07
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Казань
• Количество страниц: 165 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ.

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1.1. Общая характеристика микоплазм

1.1.1. Современные представления о классификации, таксономии и филогении микоплазм

1.1.2. Клеточная биология микоплазм особенности морфологии и ультрацитоструктуры .

1.1.3. Геномика и протеомика представителей класса i особенности молекулярной биологии микоплазм

1.1.4. Генетически опосредованная вариабельность белков адгезии микоплазм

1.2. Микоплазмы и микоплазмозы.

1.2.1. Взаимодействие микоплазм с высшими эукариотами особенности инфекций ii

1.2.2. Феноменология фитомикоплазмозов морфология и молекулярногенетические особенности взаимодействия микоплазм с клетками растений
1.3. Адаптация аспорогенных бактерий к неблагоприятным условиям среды морфофизиологические, ультрацитоструктурные, метаболические, молекулярногенетические и патогенные
особенности.
ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ.
2.1. Культивирование М. ii 6 на искусственных
питательных средах
2.2. Определение количества жизнеспособных клеток
М. ii 6
2.3. Приготовление проб для трансмиссивной электронной микроскопии
2.4. Оценка токсичных и генотоксичных эффектов клеток
М. ii 6
2.5. Выделение и очистка ДНК
2.6. Приготовление проб ДНК М. ii 6 для атомносиловой микроскопии
2.7. Амплификация фрагментов ДНК М. ii 6 с помощью
полимеразной цепной реакции
2.8. Электрофорез ДНК в агарозном геле
2.9. Клонирование и ссквснированис фрагментов ДНК
М ii 6.
2 Анализ нуклеотидных и аминокислотных последовательностей
i ii
2 Разделение белков клеток М. ii 6 методом двумерного электрофореза и их идентификация
2 Инфицирование растений Vi i . и Vi i . клетками . ii 6.
2 Статистическая обработка данных
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Особенности морфофизиологии, ультраструктуры и пролиферации клеток М. ii 6, образующихся в
разных условиях культивирования
3.2. Особенности амплификации нуклеотидных последовательностей
ряда генов клеток М. ii 6, образующихся в разных условиях культивирования.
3.3. Сравнительный анализ полипептидов клеток М. ii 6,
образующихся в разных условиях культивирования.
3.4. Особенности генотоксичности клеток М. ii 6, образующихся в разных условиях культивирования.
3.5. Фитопатогенность М. ii 6 и ее особенности у клеток микоплазмы, образующихся в разных условиях культивирования.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Экспериментальные данные и методические приемы, изложенные в работе, могут быть использованы в медицинских, ветеринарных, сельскохозяйственных, биологических и биотехнологических учреждениях, занимающихся разработкой способов диагностики и контроля микоплазменных инфекций, а также в учебном процессе, в том числе курсах лекций по биохимии, молекулярной биологии, микробиологии, стрсссологии и физиологии растений в ВУЗах. Связь работы с научными программами и собственный вклад автора в исследовании. Работа в гг. КИББ КазНЦ РАН по теме Взаимодействие микоплазм с высшими организмами на молекулярногенетическом уровне гос. Исследования автора, как исполнителя данной темы, поддержаны грантами ГК . ФЦП Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития научнотехнологического комплекса России на годы по приоритетным направлениям Живые системы по теме Сравнительный протеомный анализ вегетативных форм и наноклеток ii для создания технологии контроля микоплазменных инфекций и РФФИ 7а Молекулярные основы адаптации микоплазм М ii к биогенным и абиогенным стрессорам белки наноформ и их гены, гг. И.А. Тарчевекий НШ НШ,,4. Научные положения диссертации и выводы базируются на результатах собственных исследований автора. Минздрава РФ оценку генотоксичности клеток М. ШэерИсит Б6 и ианоскопию молекул ДНК на базе КГУ биологопочвенный факультет, кафедра микробиологии и физический факультет, кафедра оптики и нанофотоники, соответственно. Клетки М. Шяерйсит , выращенные на полноценной питательной среде и в неблагоприятных условиях при ограничении субстрата и понижении температуры, имеют существенные различия по морфологии и ультраструктуре. Длительное культивирование М. ШзерИсит в неблагоприятных условиях приводит к превращению вегетативных форм ВФ клеток микоплазмы в некультивируемые формы НФ. Переход ВФ в НФ М. ДНК микоплазмы. ВФ и НФ клеток М. НзерИсит различаются по экспрессированным белкам. Клетки М ii проявляют фитопатогенность в отношении специфичного и неспецифичного индикаторов фитомикоплазмозов. Адаптация М. НУ сопровождается изменениями генотоксичности, а также фитопатогенности миконлазмы. Апробация работы. Результаты диссертационной работы доложены на ой Международной Пущинской школеконференции молодых ученых Биология наука XXI века Пущино, , XII Всероссийской научнопрактической конференции, посвященной 0летию со дня рождения В. Всероссийском, с международным участием, конгрессе студентов и аспирантов биологов Симбиоз Россия Казань, . Публикации. По теме диссертации опубликовано научных работ, в том числе 2 статьи в рецензируемых журналах, рекомендуемых ВАК. Структура и объем работы. Диссертация изложена на 4 страницах машинописного текста состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследований, результатов собственных исследований, заключения, выводов и списка использованной литературы. В работе представлено таблиц и рисунка. Список цитируемой литературы содержит 7 источников, из них в отечественных изданиях. Термин микоплазма, оставаясь родовым названием род , повсеместно употребляется в более широком смысле для обозначения всех представителей класса i. Название класса происходит от двух латинских слов тоi мягкий и кожа, отражая структурную особенность клеток микоплазм отсутствие клеточной стенки. Принципы классификации микоплазм впервые были сформулированы в работах Д. Эдварда и Е. Фройнда , . В е основу были положены морфологические признаки клеток, особенности биохимии и сведения о среде обитания микоплазм, в дальнейшем дополненные данными молекулярногенетического анализа нуклеотидных последовагельностей геномов некоторых видов микоплазм Скрипаль, i, , . К настоящему времени известно уже более 0 видов микоплазм i, . Основные характеристики и таксономия класса i отражены в работах Борхсениус и др. Род I 7 видов, не гидролизуют мочевину, оптимум роста при С, размер генома 0 тьтс. Вид ii размер генома н. Род II 7 видов, размер генома 0 тыс. Порядок II Семейство I Род I 6 видов, размер генома 0 тыс. Род II видов, размер генома 0 тыс. Семейство II i Род I i вида, размер генома 0 тыс. С, спиралевидные формы Порядок III Семейство I Род I видов, размер генома тыс. Порядок IV Семейство I Род I 4 вида, размер генома тыс. Род II 1 вид, размер генома тыс. Неидентифицированный таксономический статус количество видов неизвестно, размер генома 0 тыс.