Характеристика спектра генов, дифференциально транскрибирующихся в ВИЧ-ассоциированных и спонтанных лимфомах человека

• Автор: Ненашева, Валентина Валерьевна
• Шифр специальности: 03.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 129 с. : ил.

ВВЕДЕНИЕ.

ЧАСТЬ I. ЛИМФОИДНЫЕ НЕОПЛАЗИИ ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

1. Характеристика различных популяций нормальных лейкоцитов

1.1. Тлимфоциты популяции и их функции

1.2. Нормальные киллерные клетки НКклстки,

. Влимфоциты популяции, их образование и функцииЛ

.1. Перестройки генов иммуноглобулинов, сопровождающие процесс развития Влимфоцитов

.2. Популяции активированных Влимфоцитов и процессы, происходящие в центрах размножения Влимфоцнтах.

3. Роль цитокинов в созревании Влимфоцитов

2. Характеристика лимфоидных заболеваний

2.1. Классификация лимфом

2.1.1. Ранние классификации лимфом.
2.1.2. классификация
2.1.3. классификация.
2.2. Диффузные Вкрупноклеточные лимфомы .
2.2.1. Молекулярногенетические характеристики
3. Вирусассоциированнмс лимфоидные заболевания
3.1. Вирусы, ассоциированные с лимфомогенезом
3.1.1. РНКсодержащие вирусы приматов.
3.2. ВИЧ1 ассоциированные лимфомы
3.2.1. Молекулярные особенности ВИЧассоциированных лимфом.
3.2.2. Механизмы ВИЧассоциированного лимфомогенеза
ЧАСТЬ II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
ЧАСТЬ III. РЕЗУЛЬТАТЫ ЭКСПЕРИМЕНТОВ.
1. Поиск генов, экспрессия которых изменяется в клетках ВИЧассоциированных лимфом.
1.1. Предварительная характеристика лимфом, использованных в работе.
1.2. Создание библиотек вычтенных лимфомоспецифических кДНК.
1.2.1. Вычитающая гибридизация
1.2.2. Дифференциальный скрининг вычтенных клонотек кДНК.
1.2.2.1. Вторичный дифференциальный скрининг клонотеки кДНК, полученной в результате прямого вычитания обогащенной популяции кДНК лимфомы 1 против суммарной популяции кДНК лимфомы 2.
1.2.2.2. Характеристика нуклеотидных последовательностей кДК, селектированных в результате прямого вычитания обогащенная популяция
кДНК лимфомы 1 против суммарной популяции кДНК лимфомы 2.
1.2 Вторичный дифференциальный скрининг клонотеки кДНК, полученной в результате обратного вычитания обогащенной популяции
кДНК лимфомы 2 против суммарной популяции кДНК лимфомы
1.2.2.4. Характеристика нуклеотидных последовательностей кДНК, специфичных для лимфомы 2, селектированных в результате обратного вычитания обогащенная популяция кДНК лимфомы 2 против суммарной популяции кДНК лимфомы 1.
Анализ экспрессии лимфомоспецифических генов в ВИЧассоциированных лимфомах
1 и 2 и в нормальных Влимфоцитах с помощью Нозернблотгибридизации
Сравнительный анализ экспрессии некоторых лимфомоспецифических генов из ВИЧассоциированных лимфом в образцах спонтанных лимфомах по сравнению с
нормальными В и Тлимфоцитами
Анализ экспрессии некоторых выявленных лимфомоспецнфичных генов в нормальных и иммортализованных вирусом 8У фибробластах человека.
4.1. Анализ экспрессии онкогена хе в нормальных и иммортализованных фибробластах человека
4.2. Анализ экспрессии генов кальпаина, транспортного белка ТАР2 и онкогена атуЬ в нормальных и иммортализованных фибробластах человека.
4.3. Анализ экспрессии генов интерлейкинов и их рецепторов в нормальных и иммортализованных фибробластах человека
4.4. Анализ экспрессии некоторых митохондриальных генов в нормальных и иммортализованных фибробластах человека
4.5. Анализ экспрессии гена 5Л7 и гена, кодирующего рибосомный белок , дифференциально транскрибирующихся в лимфоме 2 по сравнению с лимфомой 1, в нормальных и иммортализованных фибробластах человека
4.6. Анализ экспрессии гена , повышенно транскрибирующегося в клетках ЦЛ обезьян, ассоциированной с IV, в нормальных и иммортализованных фибробластах человека
ЧАСТЬ IV. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
1. Характеристика генов, дифференциально транскрибирующихся в ВИЧассоциированных лимфомах.
2. Гены, специфичные только для ВИЧассоциированных лимфом, и гены, экспрессия которых изменяется в , ассоциированных и не ассоциированных со СПИДом
3. Гены, изменение экспрессии которых происходит уже на ранних стадиях злокачественной трансформации клетки
ВЫВОДЫ.
ЛИТЕРАТУРА


Недавно проведенные эксперименты подтвердили существование общего предшественника лимфоидных клеток Влимфоцитов, Тлимфоцитов и натуральных киллеров лимфоидной стволовой клетки i, . Вклеточной линии, а другая часть мигрирует в тимус и дифференцируется там в Тлимфоциты, дендритные клетки лимфоидного происхождения и натуральные киллеры i, . Тлимфоцнты популяции и их функции. Она состоит из хелперных Тлимфоцитов Тх и цитотоксических Т лимфоцитов Тц, причем субпопуляция Тхелперов подразделяется на Тх1 и Тх2клетки, различающиеся по спектру сскрстируемых цитокинов. Именно Тхелперы на начальной стадии ответа распознают антиген, представляемый антигенпрезентирующими клетками, и способствуют развитию каскада реакций, приводящих в итоге к формированию эффекторного звена цитотоксических клеток и антител. Одна из субпопуляций Тх взаимодействует с Вклетками, помогая им размножаться, созревать и образовывать антитела. Другая субпопуляция Тх взаимодействует с мононуклеарными фагоцитами, способствуя разрушению локализованных в них микроорганизмов. Субпопуляция Тц осуществляет разрушение клеток организма, зараженных вирусами или иными внутриклсточно размножающимися патогенными микробами. Распознавание антигена Тклетками происходит только при том условии, что он презентирован на поверхности других клеток в комплексе с молекулами главного комплекса гистосовместимости ГКГ. В распознавании участвует специфичный к антигену Ткл сточный рецептор ТкР, функционально и структурно сходный с поверхностным Iантигенсвязывающим рецептором Влимфоцитов. ТкР служит маркером Тлимфоцитов. Он представляет собой гетеродимер из двух соединенных дисульфидными связями полипептидных цепей и встречается в двух вариантах. ТкР первого типа образован цепями аир, ТкР второго типа, сходный по структуре, образован цепями у и 5. Примерно Тклеток в крови представляют собой арТклетки, остальные 5 убТклетки. РТклетки различаются по экспрессии 4 или 8. Клетки, несущие маркер 4, в основном являются Тхклстками и распознают антигены, к которым они специфичны, в комплексе с ГК Г класса II. Клетки, экспрессирующие 8, обладают преимущественно цитотоксической активностью Тц и способны узнавать антигены в комплексе с молекулами ГКГ класса I. Небольшая часть аРТклеток не экспрессирует ни 4, ни 8. РТклетки 4 и 8 подразделяются на функционально различные сублопуляции и по профилю секреции цитокинов. Тх 4 сскрстируют I2 и I и участвуют в активации цитотоксических Тклеток и в местных воспалительных реакциях, т. Тх2 4 сскрстируют I4, I5, I6 и I и более эффективны в стимуляции В клеток к пролиферации и образованию антител, поэтому их функции связаны с защитой организма от микробов, размножающихся внеклеточно гуморальный иммунитет, уб Тклетки относительно часто встречаются в эпителии слизистых оболочек и, повидимому, играют важную роль в защите слизистых оболочек организма от инфекции Ройт А. Нормальные кнллерные клетки НКклетки, . НКклетки у человека составляют до лимфоцитов периферической крови. Относительно специфичны для НКклеток мембранные маркеры , , , кроме того, на поверхности экспрессируются 2, , , , , 2. НКклетки не экспрессируют ни Вклеточных, ни Тклеточных антигенсвязывающих рецепторов Ройт А. Натуральные киллеры функционально отличаются от Т и Вклсток своей способностью лизировать i vi клетки определенных опухолевых линий но не свежеудаленных опухолей без предварительной иммунизации ii . На этом основанно их участие в противоопухолевом иммунитете. Кроме того, они могут участвовать в воспалительной реакции, активируя макрофаги. Влимфоцнты популяции, их образование и функции. I. Молекулы I синтезируются конститутивно. Они встроены в цитоплазматическую мембрану клетки и функционируют как антигенспецифичные рецепторы. Встретив и распознав антиген, Влимфоциты размножаются и дифференцируются в плазматические клетки, которые образуют и выделяют в растворимой форме большие количества таких рецепторных молекул иммуноглобулинов, называемых антителами. Благодаря своей идентичности исходным рецепторным молекулам, они строго специфично взаимодействуют с тем антигеном, который первоначально активировал Вклетки.