Функция лимфотоксина в организации вторичных лимфоидных органов мыши

• Автор: Туманов, Алексей Валерьевич
• Шифр специальности: 03.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 140 с. : ил

Оглавление СТР

Введение
Обзор литературы. Роль ЛТ и ФНО цитокинов в развитии и функционировании вторичных лимфоидных органов.

Вторичные лимфоидные органы

и ФНО многофункциональные цитокины

1. Роль I и ФНО в развитии вторичных лимфоидных органов.

1.1. Развитие лимфатических узлов

1.2. Развитие

1.3. Развитие пейеровых бляшек.

1.4. Роль ФНО в развитии ЛУ и ПБ.

1.5. Механизмы развития 34 клеток

1.6. Развитие лимфоидной ткани, ассоциированной со слизистой носоглоточной полостью .
1.7. Развитие селезенки
2. Роль I и ФНО в поддержании упорядоченной структуры вторичных лимфоидных органов во взрослом организме.
2.1. Структура вторичных лимфоидных органов во взрослом организме
пластична и зависит от системы ФНОЛТ.
2.2. Роль ФНОЛТ цитокинов в организации структуры маргинальной
2.3. Какие клетки, экспрессирующие ЛТ и ФНО, нужны для поддержания правильной структуры вторичных лимфоидных
органов
2.4. Поддержание упорядоченной структуры селезенки, ЛУ и ПБ по
разному регулируется ФНО и ЛТ.
2.5. Хемокины как посредники ЛТ и ФНО в организации структуры лимфоидных органов
Материалы и методы исследований
Конструирование нокаутирующего вектора для гена ЛТр.
Культивирование и трансфекция ЕБ клеток. Анализ гомологичной
рекомбинации в ЕБ клетках. Получение нокаутных мышей
Клонирование сБМЛ хемокинов СХСЫЗ, ССЬ, ССЫ9. Выделение
Анализ РНК экспрессии методом РНКпротекции. Радиоактивное
мечение проб и гибридизация.
Проточная цитометрия
Мыши. Анализ тимусзависимого иммунного ответа. Пересадки
лимфоцитов и клеток костного мозга
1п вПи гибридизация.
Иммуногистология
Выделение ЭС из селезенки.
Результаты и обсуждение
1. При помощи метода кондиционного генетического нокаута получены
мыши с инактивацией гена ЛТр специфично в Т и В клетках
2. Лимфотоксин, экспрессирующийся на поверхности В лимфоцитов, необходим для поддержания упорядоченной структуры селезенки
3. Поддержание упорядоченной структуры ЛУ и ПБ, в отличие от
селезенки, не зависит от экспрессии ЛТ комплекса на В клетках
4. Экспрессия ЛТ на поверхности В клеток не существенна для
регуляции ЛТ зависимых генов хемокинов ВЬС, ЭЬС, ЕЬС.
5. Экспрессия ЛТ на поверхности В клеток не существенна для миграции ПС и ЫК в селезенку
6. Т и В клетки, экспрессирующие ЛТ комплекс, кооперируют в поддержании упорядоченной структуры селезенки
7. Нарушенный гуморальный иммунный ответ на тимусзависимые
антигены в ВЛТр КО и Т,ВЛТ3 КО мышах.
8. Другие сигналы с В и Т лимфоцитов кооперируют в развитии РПС
в ЛУ и ПБ.
Таблица 1.
Список литературы


В отличие от первичных лимфоидных органов, где происходит первичная диффсренцировка и обучение Т и В клеток при встрече со своим или, образно говоря, виртуальным, антигеном, в пределах вторичных лимфоидных органов происходит распознавание реального чужеродного антигена, который может быть захвачен специализированными клетками в пределах органа или же принесен из периферии антигенпрезентирующими клетками. Вторичные лимфоидные органы располагаются на стратегически важных путях попадания антигена в организм, таким образом, позволяя быстро и качественно реагировать на вторжение чужеродных антигенов. К вторичным лимфоидным органам относятся селезенка, лимфатические узлы ЛУ, пейеровы бляшки ПБ и организованные лимфоидные структуры, ассоциированные со слизистыми поверхностями желудочнокишечного, дыхательного и мочеполового трактов. Наиболее хорошо изучены селезенка, ЛУ и ПБ. , i i i и i i i I. Также иногда выделяют третичные лимфоидные органы, которые не являются стабильно организованной лимфоидной тканью, а развиваются преимущественно в нелимфоидных органах при различных патофизиологический ситуациях. В применении к третичных лимфоидных органов также употребляют термин лимфоидный неоорганогенез , . Несмотря на разное внешнее проявление и различные механизмы развития, вторичные лимфоидные органы обладают сходными чертами это четкая компартментализация Т и В клеточных зон, а также существование специализированного стромального микроокружения, которое не только поддерживает правильную структуру органа, но и обеспечивает молекулярные сигналы, способствующие оптимальной миграции и активации лейкоцитов крови. При отсутствии или нарушении структуры вторичных лимфоидных органов нарушается ответ на некоторые антигены, вирусы и бактериальные патогены . i, . . . i . и ФИО многофункциональные цитокины. Лимфотоксин и фактор некроза опухолей ФИО принадлежат к суперсемейству цитокинов ФИО. Эти цитокины объединяются с семейство на основании структурного сходства их внеклеточных Сконцевых доменов, которые взаимодействуют с рецепторами комплементарного суперсемейства ФНОрецепторов. Считается, что большинство лигандов и рецепторов являются тримерами. . . Гены, кодирующие три члена этого семейства ЛГа, ЛТр и ФНО, генетически сцеплены и находятся в пределах кб в локусе ФНО внутри локуса, кодирующего гены главною комплекса гистосовместимости на хромосоме мыши v . I ЛТа и ФНО, не имеет растворимой формы, но образует мембранные комплексы с ЛТа состава ЛТсцЬТр ЛТсхгЬТР i . i . Наиболее хорошо изученным является мембранный комплекс Ii I , экспрессирующимся преимущественно клетками нелимфоидного происхождения . . i , . Секретируемые формы ЛТа и ФНО являются растворимыми гомотримерами и взаимодействуют с рецепторами ФНО типа I р или р и II р или р . В отличие от ФНО, который может экспрессироваться многими видами клеток в организме, ЛТ экспрессируется преимущественно клетками лимфоидного происхождения . В году при анализе мышей с инактивацией гена ЛТа КО были получены сенсационные результаты у мышей отсутствовали лимфатические узлы ЛУ, пейеровы бляшки ПБ, а также была нарушена структура селезенки и гуморальный иммунный ответ i . . Дальнейшие исследования показали, что фенотип ЛТрР КО мышей был во многом похож на фенотип ЛТа КО мышей . . . . . Инактивация гена ФНО или ФНОР1 также приводит к дефектам структуры вторичных лимфоидных органов, однако менее серьезным, чем в ЛТа КО или ЛТрР КО i . i . В отличие от ЛТ, ФНО шрает существенную роль в иммунном ответе на многие патогены i .