Функции фактора некроза опухолей, производимого отдельными типами клеток, в аутоиммунитете

• Автор: Круглов, Андрей Алексеевич
• Шифр специальности: 03.00.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 110 с. : ил.

Оглавление

Список сокращений

ВВЕДЕНИЕ

ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

История открытия, клонирование, регуляция экспрессии фактора некроза опухолей.

Сигнальные пути, активируемые фактором некроза опухолей

ФИО в аутоиммунных заболеваниях

Роль ФНО в ревматоидном артрите

Блокировка ФНО как метод лечения ревматоидного артрита

Рассеянный склероз и роль ФНО в этом заболевании

Модель экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита

ФНО в экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Эксперименты с мышами
Молекулярнобиологические методы
Иммунологические и клеточные методы
РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ
Трансгенные мыши, экспрессирующих гены ФНОЛТ локуса человека, и мыши с нокином человеческого ФИО как модели для изучения блокировки ФНО в аутоиммунитете.
Характеристика мышей, в которых н ФНО дслстироваи в клетках,
индуцирующих образование лимфоидных органов.
Развитие артрита у мышей с делецией гена ФНО зависит от способа
индукции заболевания.
Подавление проявлений артрита блокаторами Ф0
Развитие артрита, индуцируемого коллагеном, в мышах с
ткансспсцифической делецией ФИО
Ингибирование артрита, индуцируемого коллагеном, у мышей,
гуманизованных по гену ФИО специфическими антителами к ФИО человека
Развитие экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита у ФИО дефицитных мышей
Протекание ЭЛЭ в мышах с делецией гена ФИО в макрофагах и
нейтрофилах роль ФИО на ранних стадиях заболевания
ЭЛЭ в мышах с делецией ФИО в лимфоцитах и в I роль ФИО,
производимого Iклетками.
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЦИТИРОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ


ФНО мыши найден еще один сайт для связывания кВ, которого нет в гомологичной позиции в человеческом геноме КиргаяЬ с а. Шаоуа а. Ьакюу а. Рдя, Ггйг АР1, АР2, СНВРЬ, СЮЕ, ЫРАТ, БР1. Сравнительно большое число транскрипционных факторов, способных взаимодействовать с регуляторными областями гена ФНО, отражает достаточно сложный механизм регуляции транскрипции ФНО и многоуровневый контроль экспрессии гена в ответ на разные физиолог ические стимулы в разных клетках иммунной системы. ЫРкВ, с. ФНО. ФИО Киргаяй е а, Ь. В другой работе Ша1ога е д. В2 и кВ2а сайтами, которая связывает как конститутивные, гак и индуцированные транскрипционные факторы, в том числе субъединицы р и р. Интересно, что сайт кВ3 имеющийся только в геноме мыши, но не человека связывает псактивирующий комплекс из двух субчастиц р, что предположительно обусловливает толерантность макрофагов к повторной активации ЛПС. сигнального пути в регуляции транскрипции ФНО. Помимо исследования роли семейства факторов в регуляции транскрипции гена ФНО в макрофагах и моноцитах, в ряде работ было изучено участие других транскрипционных факторов и в других типах клеток. Так, было показано, ч то в 5 области промотора гена ФНО человека находятся сайты связывания факторов , и было установлено, что они необходимы как для базальной экспрессии гена, так и при стимуляции РМА. При изучении экспрессии ФНО в I и В лимфоцитах было показано, что основную роль в регуляции транскрипции играют транскрипционные факторы и . При этом регуляция в Т и В клетках оказалась различна так, в Т лимфоцитах, активированных через Тклегочный рецептор, происходит связывание двух молекул с сайтом кЗ здесь следует отметить путаницу, внесенную А. Голдфсльд, которая называла так сайт в проксимальной области промотора ФНО, утверждая изначально, что он связывает , в то время как транскрипционные факторы 2 связываются с соседним сайтом. В случае же Влимфоцитов, активация через Вклеточный рецептор или сигнальный пугь приводит к ассоциации 2 с сайтом кЗ. Факюр при этом связывается с другим сайтом, расположенным на расстоянии от старта транскрипции i . i . и рекрутируются на промотор при стимуляции форболовым эфиром с иопомицином. Пели в случае базального уровня экспрессии основной вклад вносится транскрипционными факторами, связанными с промоторной областью гена, то при активации возрастает роль энхансерных элементов. При исследовании энхансерных комплексов, образуемых при активации гена ФИО различными стимулами и в различных типах клеток, было установлено, что при стимуляции макрофагов ЛПС образуется комплекс, состоящий из транскрипционных факторов , 1, , 2, , и рЗОО i . С другой стороны, в ответ на вирусную инфекцию образуется энхансерный комплекс, состоящий из транскрипционных факторов 2, , , а при стимуляции РМА и иопомицином суррогатная биохимическая стимуляция, имитирующая активацию Тклеточного рецептора образуется комплекс, содержащий 2 и . Наряду с регуляцией гена ФИО на транскрипционном уровне была выявлена и регуляция на стадии элонгации мРНК. Так, при стимуляции клеток ЛПС наблюдается существенное возрастание скорости элонгации транскрипции РНК с гена ФИО i v, i . Имеются данные и о регуляции экспрессии гена ФИО на уровне конфигурации хроматина. Так, проведенный недавно анализ гиперчувствнтельных к обработке ДК аз он 1 сайтов выявил несколько высококонсерватнвиых, пскодирующих участков, окаймляющих ген ФИО в наивных и Т хелперных клетках. Согласно современным представлениям о пространственной организации транскрипционпо активных участков хроматина в ядре эукариотической клетки, при активации Т клеток может происходить сближение хромосомных сегментов с образованием кольцевой структуры ДНК. В результате содержащие комплексы пространственно сближаются, чю и приводит к усилению транскрипции v .