Дизайн и синтез коротких пептидов с ноотропной и нейропротективной активностью

• Автор: Морозова, Анна Анатольевна
• Шифр специальности: 02.00.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 162 с. : ил.

Содержание
Страницы
Введение.

Глава 1. Литературный обзор

1.1. Нсйротрофины

1.1.1. Члены семейства нейротрофинов.

1.1.2. Структура нейротрофинов

1.2. Рецепторы нейротрофинов

1.2.1. Тирозинкиназнме рецепторы

1.2.1.1. Структура тирозинкиназных рецепторов.

1.2.1.2. Механизм передачи сигнала посредством Тгк рецепторов и биологические ответы

1.2.2. Рецептор р.
1.2.2.1. Структура р рецептора
1.2.2.2. Механизм передачи сигнала посредством р рецептора и биологические ответы
1.3. Вовлеченность нейротрофина в патогенез
нейродегенеративных заболеваний.
1.3.1. Фармакологические данные при применении его
на различных моделях
1.3.2. Перспективы генной терапии .
1.3.3. Клинические испытания
1.4. Низкомолекулярные мимстики нейротрофина .
1.4.1. Развитие низкомолекулярных мимстиков нейротрофина
1.4.2. Низкомолекулярные миметики 1 и 4 петель 1ЧСР
Глава 2. Обсуждение результатов.
2.1. Синтез дипептидов, соответствующих точечным мутантам АУР, и изучение взаимосвязи между видом точечной мутации и активностью дипентида.
2.2. Дизайн и синтез биологически активных циклических тетра, пента и гексапептидов, содержащих трипептидный фрагмент изгиба 4й петли .
2.2.1. Дизайн.
2.2.2. Синтез.
2.2.2.1. Синтез линейных предшественников.
2.2.2.2. Синтез циклических пептидов
2.2.3. Биологическая активность циклических мимстиков 4й петли
i vi.
2.3. Дизайн и синтез биологически активных ацилдипептидных мономерных и димерных мимстиков 4й и 1й петель .
2.3.1. Дизайн.
2.3.2. Синтез.
2.3.2.1. Синтез миметиков 4й петли .
2.3.2.2. Синтез миметиков 1й петли .1.
2.3.3. Биологическая активность синтезированных мимстиков
2.3.3.1. Нейропротективные свойства пептидов i vi.
2.3.3.2. Влияние пептидов на дифференцировку клеток.
2.3.3.3. Влияние пептидов на фосфорилирование тирозинкиназы Л.
Глава 3. Экспериментальная часть.
3.1. Синтез пироглутамилсодержащих динептидов
3.1.1. Синтез пентахлорфеиилового эфира ,пироглутаминовой кислоты
и пентахлорфеиилового эфира пироглутаминовой кислоты.
3.1.2. Синтез амида гшроглутамил,аспарагина.
3.1.3. Синтез амида пироглутамиласпарагиновой кислоты
3.1.4. Синтез амида пироглутамилсерина.
3.1.5. Синтез амида пироглутамилсерина
3.1.6. Синтез амида Апироглутамил7серина
3.1.7. Синтез амида пироглутамилЭсерина.
3.1.8. Синтез амида Лпироглутамилгистидина
3.1.9. Синтез амида ,пироглутамил7,тирозина.
3.1 Синтез шелбутилового эфира Лпироглутамилиел1бутил7,аспарагиновой кислоты.
3.1 Синтез яетбутилового эфира Лпироглутамилтгеибутил
Ьсерина
3.2. Синтез циклопептидных аналогов фактора роста нервов.
3.2.1. Получение линейных предшественников НС1уС1уС1уА8рОВиаиОВиЬу8ВосОН, НС1уС1уА5рОВиС1иОВигЬу5ВосОН
и НС1уА8рОВиС1иОВиЬу8ВосОН.
3.2.2. Циклизация пептидов
3.2.2.1. сус1оС1уууА8рОВииОВиЬУ5Вос
3.2.2.2. сус1оС1уС1уА8рОВи,иОВиЬу8Бос
3.2.2.3. сус1оуА8рОВииОВиЬу8Вос и димер
3.2.3. Удаление защитных групп
3.2.3.1. сус1оС1уууА8риЬу8.
3.2.3.2. сус1оС1ууА8рС1иЬу8
3.2.3.3. сус1оуА8риЬу8.
3.3. Синтез мономерных и димерных 1ацилдипептидных миметиков фактора роста нервов.
3.3.1. Миметики 4й петли.
3.3.1.1. Синтез амида Ымоносукцинилглутамиллизина
3.3.1.2. Синтез гексаметилендиамида бисмоносующнилглутамиллизина
3.3.1.3. Синтез триметилендиамида омсмоносушщнилглутамиллизил6аминогексановой кислоты.
3.3.1.4. Синтез гексаметилендиамида пентаметилен, тетраметилен, пропилен, этилен бисмоносукцинилглутамиллизина.
3.3.2. Миметики 1й петли.
3.3.2.1. Синтез амида Мацетиллизилглутаминовой кислоты.
3.3.2.2. Синтез гексаметилендиамида бгсЫацстиллизилглутаминовой кислоты.
3.3.2.3. Синтез амида 6аминокапроилглициллизина
3.3.2.4. Синтез гексаметилендиамида бмс6аминокапроилглициллизина
Заключение.
Выводы.
Приложения.
Список использованных сокращений.
Список литературы


Взрослым нейронам не нужен для выживания, однако он регулирует синтез адреналина, индуцируя образование двух ферментов, необходимых для его синтеза тирозингидроксилазу и дофамин Ргидроксилазу 9. При повреждении транспорта взрослого нейрона уровень этих ферментов падает. Его наиболее интенсивный синтез происходит в гиппокампе, хотя клетки и многих других отделов ЦНС способны его синтезировать и выделять. Основными мишенями для являются холинергические нейроны переднего мозга, играющие значительную роль в таких функциях ЦНС, как внимание, обучение, память большинство нейронов симпатической нервной системы . Вторым нейротрофическим фактором, который был выделен из экстракта мозга свиньи и впоследствии клонирован, был . Он способствует выживаемости нейронов дорсального спинного ганглия ДСГ в культуре и препятствует их гибели, если вводится i viv эмбрионам во время периода естественной гибели нейронов. Популяциями клеток, чувствительными к , являются дофаминергические нейроны черной субстанции, мотонейроны, нейроны реснитчатого ганглия, ергические нейроны переднего, промежуточного мозга и стриатума, нейроны гиппокампа, некоторые сенсорные нейроны периферической нервной системы, холинергические нейроны переднего мозга. Немного позже с помощью молекулярногенетических экспериментов были выявлены еще несколько нейротрофинов семейства млекопитающих нейротрофин3, нейротрофин, пейротрофин6 и нейротрофин7. ГАМКергических нейронов среднею мозга, нейронов гиппокампа, мотонейронов спинного мозга, мышечных сенсорных нейронов. Х1рЬорЬоги8, у рыб Сурппиэ. Оказывают воздействие подобно на сенсорные нейроны и нейроны симпатической нервной системы. Представляют собой нейротрофины низших позвоночных, структурно и функционально подобные . Предполагают, что и являются филогенетическими ветвями общего предка, . Нейротрофины первоначально синтезируются в виде белковпредшественников кДа, которые превращаются в зрелые белки в результате Игликозилирования и протеолиза. Зрелые формы нейротрофинов имеют ряд следующих общих особенностей рис. Сходное число аминокислот и близкий молекулярный вес мономера ,2,9 кДа . В структуре присутствует 6 цистеиновых остатков. Характерна высокая степень гомологии около идентичности первичной структуры ,. Зрелые формы и ВО имеют остатков идентичных с , главным образом в регионах, которые определяют общую четвертичную структуру ,. Каждый протомер состоит из 3х пар антипараллельных ртяжей, которые



Рисунок 1. Да. Такая конформация удерживается нековалентными взаимодействиями гидрофобными связями между ароматическими остатками . Регулярные последовательности Ртяжей связываются нерегулярными участками, называемыми рпетлями. В противоположность ртяжам Рпетли высоко вариабельны. Структура . В слюнной железе мыши присутствует в виде комплекса, состоящего из трех субъединиц а, р и у . Ответственной за выживание нейронов и рост аксонов является рсубъединица, которая состоит из 2х идентичных протомеров, каждый из которых содержит 8 аминокислотных остатков и 3 дисульфидных мостика. Функциональное значение а и усубъединиц неясно. Кристаллографические исследования 4,5 показывают, что каждый протомер имеет семь ртяжей, образующих 3 антипараллельные пары. При этом ртяжи связаны 3мя экспонированными наружу нерегулярными участками, называемыми петлями 1 остатки , 2 и 4 , а также серией из 3
х последовательных изгибов, или 3й петлей остатки . Рисунок 2 иллюстрирует строение молекулы ЫвР мыши. Превращение проЫвР в активный ЫвР осуществляется вне клетки сериновыми протеазами и специфическими металлопротеиназами М . Рисунок 2. Рецепторы факторов роста являются гликопротеинами, встроенными в плазматическую мембрану. Хотя высокоаффинные рецепторы к обычно расположены только на нейронах, они были первоначально обнаружены в клетках карциномы толстой кишки человека как часть продукта онкогена . Тгк. Тирозинкиназные, , рецепторы 0 являются высокоаффинными М рецепторами нейротрофинов . Тгк рецепторы состоят из 3х основных доменов экстраклеточного, трансмембранного и цитоплазматического рис. Рисунок 3. Экстраклеточный домен x i.