Роль ядерно-цитоплазматического транспорта белка Кеар1 в регуляции ответа клетки на окислительный стресс

• Автор: Филонов, Григорий Сергеевич
• Шифр специальности: 02.00.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 115 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

Список условных обозначений

Введение

1. Регуляция iзависимой транскрипции генов обзор литературы

1.1. Введение

1.2. 2 центральный регулятор системы ответа

клетки на окислительный стресс

1.3. Способы регуляции фактора 2

1.4. Ядерноцитоплазматический транспорт белков, краткий обзор

1.5. Заключение

2. Роль ядерноцитоплазматического транспорта белка Кеар 1 в регуляции ответа клетки на окислительный стресс
результаты и обсуждение 3
2.1. способен перераспределяться в ядро
2.2. Идентификация сигнала ядерного экспорта белка Кеар 1
2.3. Поиск сигнала ядерной локализации белка Кеар 1
2.4. 2 также постоянно перемещается между ядром и цитоплазмой
2.5. Выявление роли сигнала экспорта белка Кеар 1 в механизме
регуляции 23 экспрессии генов
2.6. Активирующие свойства белка Кеар I
обусловлены его взаимодействием с 2
2.7. Кеар I не вызывает увеличение количества 2 в клетке
2.8. Кеар 1 в присутствии 2 взаимодействует с i vi
2.9. входит в комплекс белков, взаимодействующих с промоторной областью гена
2 Новая модель регуляции ответа клетки на окислительный стресс
2 Альтернативные модели регуляции активности 2,
основанные на ядерноцитоплазматическом транспорте
3. Экспериментальная часть
3.1. Используемые штаммы микроорганизмов и реактивы
3.2. Используемые приборы
3.3. Методы
Выводы
Список литературы


Таким образом, возникла целая система ядерноцитоплазматического транспорта, основной функцией которой стал перенос необходимых макромолекул через особые образования ядерные поры. Возникновение системы ядерноцитоплазматического транспорта позволило создать очень гибкий механизм регуляции транскрипции различных генов, поскольку добавило еще один способ контроля активности транскрипционных факторов. Действительно, теперь транскрипционный фактор, находящийся в цитоплазме, остается неактивным до тех пор, пока не получит возможность перейти в ядро. С другой стороны его ядерная транслокация является более быстрым процессом, чем синтез фактора, начиная со стадии транскрипции или трансляции. Таким образом, пространственное разделение транскрипциошюго фактора и его геновмишеней является очень частым способом его репрессии в условиях, когда активность фактора не требуется. И напротив, в условиях часто неблагоприятных, когда транскрипция генов необходима, для осуществления ответа достаточно перевести фактор в ядро. Поскольку подобный механизм является удобным для эукариотической клетки, то неудивительно, что на настоящее время известно довольно много различных транскрипциотшх факторов, регулируемых таким образом. В данной работе описывается контроль активности транскрипционного фактора Ыг2 именно посредством ядерноцитоплазматического транспорта. ЫгО является ключевым белком ответа клетки в процессе очень опасного состояния окислительного стресса, поэтому данное исследование является актуальным и позволяет поновому взглянуть на способы защиты эукариотического организма от вредного действия окружающей среды. В процессе жизнедеятельности эукариотической клетки в цитоплазме и в ядре могут появляться активные формы кислорода и азота, способные повреждать важнейшие клеточные макромолекулы и в итоге приводить к гибели клетки. Подобное крайне неблагоприятное состояние называется окислительным стрессом. Оно может быть вызвано как проникновением в клетку извне ксенобиотиков и оксидантов, так и естественными сбоями в механизмах клеточного метаболизма. На уровне целого организма подобное состояние также вызывается действием ионизирующей радиации, облучения ультрафиолетом, в ходе фагоцитоза и воспалительных процессов 1. Окислительный стресс является причиной целого ряда серьезных заболеваний атеросклероз, нейродегенеративные заболевания, рак 14. В связи с этим исследование молекулярных механизмов поведения эукариотической клетки в состоянии окислительного стресса является актуальной научной задачей. Для защиты клетка выработала сложный механизм, включающий в себя первую и вторую фазу ответа на окислительный стресс 5. Если попавшее в цитозоль соединение гидрофобно, то именно в процессе первой фазы ответа осуществляется его перевод в водорастворимую форму ферментами группы цитохрома Р0. Однако получаемые в итоге соединения часто ядовиты в основном именно они и вызывают появление активных форм кислорода, поэтому требуется дополнительная модификация как правило, конъюгация с гидрофильными молекулами, например с глутатионом для безопасного вывода образовавшихся продуктов из клетки 6. Эта стадия осуществляется белками т. Если же соединение, проникшее в клетку, уже водорастворимо, то оно сразу подвергается действию ферментов второй фазы ответа. Основным регуляторным белком второй фазы ответа клетки на окислительный стресс является транскрипционный фактор , под контролем которого находятся все гены, кодирующие детоксифицирующие ферменты 7. Механизмы регуляции фактора 2 и являются предметом обсуждения настоящего обзора. Да электрофоретическая подвижность у него аномальна и соответствует белку размером около 0 кДа. Этот белок был впервые обнаружен при поиске транскрипциошшх факторов, взаимодействующих с регуляторными областями глобинового и других эритроидных генов, и назван по сходству с основным регулятором этого локуса 2 2 2 2 8, 9. Кроме 2 к семейству i транскрипционных факторов относятся белки 1 и 3, свойства которых будут затронуты далее. Свое название данные последовательности получили вследствие того, что репортерные конструкции под их контролем активировались под действием оксидантов или электрофилов.