Синтез и изучение свойств положительно заряженных гидрофобных производных циклических и ациклических полиолов

• Автор: Маслов, Михаил Александрович
• Шифр специальности: 02.00.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 97 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

1. ВВЕДЕНИЕ

2. ЛИТЕРАТУРНЫЙ ОБЗОР

2.1. Введение

2.2. Структура и химический синтез катионных амфифилов

2.2.1. Катионные глицеролилиды с длинноцепными

алкильными и ацильными заместителями

2.2.2. Производные холестерина

2.2.3. Липофильные производные полиаминов,

аминокислот и пептидов

2.2.4. Амфифильные производные имидазола
и пиридина
2.2.5. Четвертичные аммониевые солисурфактанты
2.2.6. Катионные производные полиолов
2.3. Взаимосвязь структуры и активности
2.3.1. Липиды, содержащие холестерин
2.3.2. Липиды, содержащие алифатические углеводородные заместители
2.4. Заключение
3. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
3.1. Синтез алкильных глицеролипидов с различными катионными группами, присоединенными
непосредственно к глицериновому скелету
3.2. Синтез катионных глицеролипидов через
метилтиометиловые эфиры
3.3. Синтез катионных гликолипидов как компонентов катионных
липосом для направленного транспорта генетического материала
3.4. Изучение биологической активности синтезированных
соединений
3.4.1. Изучение токсичности синтезированных липидов
3.4.2. Изучение трансфекционной активности катионных липосом
4. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ
4.1. Синтез алкильных глицеролилидов с различными катионными группами, присоединенными
непосредственно к глицериновому скелету
4.2. Синтез катионных глицеролилидов через метилтиометиловые эфиры
4.3. Синтез катионных гликолипидов как компонентов катионных липосом для направленного транспорта генетического
материала
4.4. Изучение токсического действия катионных липидов
4.4.1. Получение катионных липосом
4.4.2. Изучение воздействия катионных липидов и их липосомальных композиций на рост клеток
и синтез ДНК
4.4.3. Изучение токсического воздействия катионных
липидов с использованием МТТтеста
4.5. Изучение трансфекционной активности катионных
липосом
5. ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Впечатляющие достижения молекулярной биологии и генетики в изучении тонкой структуры генов эукариот, их картировании на хромосомах млекопитающих, успехи проекта Геном человека в идентификации и клонировании генов, мутации которых проводят к многочисленным наследственным болезням, а также бурный рост в области биотехнологии и генной инженерии явились необходимыми предпосылками для того, чтобы от опытов на животных и теоретических построений уже в году перейти к лечению моногенных заболеваний. Успех первых клинических испытаний явился мощным стимулом для ускоренного развития новых терапевтических методов применительно к наследственным болезням, генетическая коррекция которых уже возможна в обозримом будущем. Одновременно с развитием исследований в области генокоррекции наследственных дефектов успешным также оказались поиски методов терапевтического использования смысловых последовательностей ДНК для лечения ненаследственных заболеваний, и главным образом злокачественных опухолей и вирусных инфекций. Решающим условием успешной генотерапии является обеспечение эффективной доставки, то есть трансфекции или трансдукции при использовании вирусных векторов чужеродного гена в клеткимишени, обеспечение длительного функционирования его в этих клетках и создание условий для полноценной работы гена. Основные методы доставки чужеродных генов в клетки разделяются на химические, физические и биологические. Несмотря на усилия многих лабораторий мира, все уже известные и испытанные i vi и i viv системы доставки экзогенов далеки от совершенства и имеют свои преимущества и недостатки. В последние годы предложены новые способы доставки ДНК в соматические клетки. Один из таких подходов основывается на использование катионных липосом искусственных мембранных структур, приготовленных их смеси природных и синтетических катионных липидов. Такие липосомы, взаимодействуя с ДНК, образуют комплексы, которые эффективно переносят генетический материал во внутреннее пространство клеток посредством эндоцитоза. Следует отметить, что катионным липосомам присущи такие важные свойства как неинфекционность, способность переносить плазмидную ДНК практически неограниченного размера и защищать ее от действия клеточных ферментов в этом отношении они превосходят вирусные векторы. Кроме того, катионные липосомы легко получать, они стабильны при хранении. Все эти свойства делают катионные липосомы перспективными транспортными контейнерами генов. Вследствие чего, создание новых биодеградируемых и мало токсичных катионных липидов, которые снабжали бы липосомы не только подходящими липидными составляющими, но и специальными лигандами, экспонированными на поверхности этих катионных липосом, является перспективным направлением в генной терапии. Помимо генной терапии, среди представителей катионных глицеролипидов были обнаружены эффективные антагонисты сильнодействующего липидного биорегулятора фактора активации тромбоцитов ФАТ. Кроме того, среди них выявлены соединения, обладающие противоопухолевой и антивирусной активностью, которая подтверждается экспериментами с разнообразными i viv и i vi биологическими моделями. Таким образом, создание новых положительно заряженных липидов с целью их использования в биохимических исследованиях и выявления среди них эффективных медиаторов процесса трансфекции эукариотических клеток, а также веществ с расширенным спектром терапевтического действия является актуальным направлением биоорганической химии и биотехнологии. Настоящая работа выполнена в соответствии с планом научных исследований кафедры ХТТОС МИТХТ им. М. В. Ломоносова по теме 1Б5 Получение природных и модифицированных глицеро и гликолипидов, субстратов липоксигеназ с различным набором гидрофобных и гидрофильных групп с целью создания на их основе препаратов медицинского, экологического назначения и использования для проведения биохимических и биофизических исследований и в соответствии с Федеральной целевой научнотехнической программой Исследования и разработки по приоритетным направлениям развития науки и техники гражданского назначения. Генодиагностика и генотерапия социально значимых заболеваний человека.