Синтез и структурно-функциональные исследования α-конотоксинов и их аналогов

• Автор: Жмак, Максим Нургаянович
• Шифр специальности: 02.00.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2003
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 119 с. : ил

Содержание

ИСПОЛЬЗОВАННЫЕ СОКРАЩЕНИЯ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ.

ОСОБЕННОСТИ СИНТЕЗА ПЕПТИДОВ, СОДЕРЖАЩИХ ДВЕ И БОЛЕЕ ДИСУЛЬФИДНЫХ СВЯЗЕЙ.

1 .Введение.

2.3ащитные группы тиольной функции цистеина.

3. Подходы к синтезу пептидов с двумя дисульфидными связями.

4. Подходы к синтезу пептидов с тремя и более дисульфидными связями.

5. Проблемы синтеза пептидов содержащих внутри и межмолскулярныс дисульфидныс связи.

ГЛАВА И. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ.

1 .Подходы к синтезу аконотоксинов.
2. Выбор последовательностей.
3.Синтез аконотоксинов.
4. Исследование взаимосвязи между структурой и биологической активностью аконотоксинов и их аналогов.
ГЛАВА III. ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНАЯ ЧАСТЬ.
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ


Однако основная проблема синтеза цистеинсодержащих пептидов заключается в образовании дисульфидных связей, которое протекает с низкими выходами. Поэтому важной задачей синтетических исследований становится выбор защитных групп для тнолыюй функции цистеина и поиск наиболее эффективных методов создания дисульфидных связей. В настоящем обзоре рассматриваются различные стратегии синтеза пептидов, содержащих дисульфидные мостики, описанные в современной научной литературе. ГП1ыс группы тиольной функции цистеина. Пептиды, содержащие цистеин, могут существовать как в восстановленной сульфгидрильной форме, так и в окисленной цистиновой форме. Синтез дисульфидсодержащих соединений составляет особый раздел пептидной химии. Для получения с высоким выходом пептида, обладающего корректной структурой природным расположением дисульфидных связей, необходимо тщательное планирование стратегии синтеза. Выбор наиболее подходящей защитной группы тиольной функции является первостепенно важным, так как неудачный выбор может привести к значительным проблемам в процессе получения линейного продукта или последующего образования дисульфидных связей. Защитные группы тпольной функции цистеипа, используемые при синтезе днсульфидсодержащих пептидов. Тиольная функция цистеина на протяжении всего синтеза полипептидной цепи должна быть защищена. Требования, предъявляемые к защитным группам цисгеина, в основном те же , что и к защитным группам боковых цепей других аминокислот стабильность в условиях наращивания пептидной цепи и деблокирования ааминогрупп, но кроме этого защитная группа тиольной функции цистеина, в зависимости от выбранной стратегии образования дисульфидньтх связей, должна либо отщепляться во время процедуры деблокирования пептида, либо, напротив, быть стабильной в этих условиях. В настоящее время существует целый ряд различных групп, которые эффективно защищают цистеин. При использовании Бтоссхемы1 синтеза пептида для защиты 8Нфункции цистеина чаще всего применяют следующие защитные группы Тг1, Аст, 1Ви, Шийно, Круз в случае Воссхемы синтеза пептида для защиты цистеина часто используют следующие группы зМсВг, рМеОВг1, Аст, Тает. В таблице 1 приведены формулы вышеперечисленных защитных групп и методы их удаления. Полный перечень защитных групп цистеина и методов создания дисульфидной связи приведен в обзоре 1. В настоящем обзоре рассмотрены защитные группы и методы, применяемые при образовании дисульфидных связей в синтезе пептидов с несколькими дисульфидными связями. Выбор защитной группы тиольной функции цистеина зависит от способа образования дисульфидной связи. В зависимости от условий деблокирования можно получить пептид со свободными сульфгидрильными группами цистеина или с дисульфидными связями. Защитные группы остатков цистеина при синтезе за счет различия их химической стабильности должны, в случае необходимости, позволять избирательно создавать две и более дисульфидные связи. Здесь и далее под Ртоссхемой подразумевается использование боковых защитных групп кислотолабильного типа Ви, Тг1, Вое в сочетании с щелочнолабильной Ртосзащитой для ааминофуппы аминокислот, а под Воссхе. Восгруппой для защиты ааминогруппы. Таблица 1. Защитные группы тиолыюй функции цистсина, наиболее часто используемые в пептидном синтезе. Третбутип Ви Ви НР, иС Н Т1Ш ТРА НР,0С А1 основания. Тритил Ти СРЬз ТРА, ,Н8П,А81, Т1Ш Основания, нуклеофилы. Третбупштио ВиНо БВи КаШ3, ЛБН, Ви3Р. НС1диоксан пиперидин ТРА основания. Метилбензил МсВг МеС6Н4СН2 НР, 0С, бОмин. Т1Ш Основания, I, ТРА. Метоксибензил МоЬ МеОС6Н4СН2 НР, 0С, бОмин. ПШ, НЕ,А8, Основания, . Этилкарбамоил Ее СОЫНЕ КаНз, ШЫаОН, Ы2Н2МсОН, НН 4. Например, в отличие от Тт группы, Асгп, 1Ви, НЗиЙно, Тасшгруппы стабильны в условиях деблокирования пептида трифторуксусной кислотой и требуются дополнительные процедуры для удаления этих групп. Поэтому при одновременном использовании тритильной и одной из кислотостабильных защитных групп появляется возможность избирательного деблокирования остатков цистсина в полицистеиновых пептидах, что позволяет поэтапно создавать дисульфидные мостики 2.