Механизмы влияния флавоноидов на каналообразующую активность нистатина

• Автор: Чулков, Евгений Георгиевич
• Шифр специальности: 03.01.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2015
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 105 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК ПРИНЯТЫХ СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

Актуальность исследования

Цели и задачи исследования

Основные положения, выносимые на защиту

Научная новизна исследования

Теоретическая и практическая значимость работы

Публикации

Апробация работы

Список работ, опубликованных по теме диссертации
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1Л. Общая характеристика, классификация и биологические функции флавоноидов
1.2. Дипольный потенциал мембраны и флавоноиды
1.3. Спонтанная кривизна и флавоноиды
1.4. Макролидные полиеновые антибиотики
1.4.1. Классификация полиеновых антибиотиков
1.4.2. Молекулярные механизмы биологической активности нистатина и амфотерицина Б
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Материалы
2.2. Методы
2.2.1. Электрофизиологические измерения на плоских липидных мембранах

2.2.2. Конфокальная микроскопия гигантских моноламеллярных липосом
2.2.3. Измерение проницаемости мембран больших моноламеллярных липосом с помощью флуоресцентного маркера кальцеина
2.2.4. Дифференциальная сканирующая микрокалориметрия
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Влияние флавоноидов на мембранную активность нистатина
3.1.1. Увеличение трансмембранного тока, индуцированного односторонней добавкой нистатина, под действием флоретина
3.1.2. Подтверждение канальной природы тока
3.1.3. Неспецифичность действия флавоноидов на асимметричные нистатиновые поры
3.1.4. Проверка электростатической гипотезы регуляции активности асимметричных нистатиновых каналов
3.1.5. Влияние флавоноидов на латеральную гетерогенность и механические свойства бислоя
3.1.6. Образование 50 фазы полиеновыми антибиотиками
3.1.7. Влияние флавоноидов на фазовую сегрегацию мембраны, модифицированной нистатином
3.1.8. Полиморфизм липидов, индуцированный флоретином, биоханином А и мирицетином
3.2. Мишень флавоноидов — липидное устье асимметричного нистатинового канала
3.2.1. Влияние нистатина и флавоноидов на ДОФЭ-содержащие бислои
3.2.2. Рост активности нистатина в присутствии флавоноидов со стороны, противоположной стороне добавки полнена
3.2.3. Влияние флавоноидов на утечку кальцеина из липосом
3.2.4. Действие флавоноидов на индуцированную нистатином утечку кальцеина из липосом
3.2.5. Модель увеличения каналообразующей активности нистатина флавоноидами
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

проходить эффективнее, чем в бислоях из липидов с отрицательной спонтанной кривизной. Нечувствительность мембран бактерий к полиенам может объясняться наличием в их мембранах преимущественно фосфатидилэтаноламинов [91], имеющих отрицательную спонтанную кривизу, затрудняющую формирование липидного устья.
Рис. 15. Молекулярная модель симметричного (слева) и асимметричного (справа) полиенового канала. Молекулы полнена показаны зелёным, стерина — жёлтым, фосфолипидные молекулы — красным. По [2].
Свойства полиеновых каналов зависят от состава и физико-химических свойств мембраны. Например, было показано, что проводимость мембраны, модифицированной нистатином, сложным образом зависит от содержания в ней холестерина и температуры [92]. На Рис. 16 представлена диаграмма, демонстрирующая эту зависимость. При содержании холестерина менее 10 мол % мембрана находится в жидком неупорядоченном состоянии (16), а при содержании холестерина более 50 мол % — в жидком упорядоченном (1о). При содержании холестерина от 10 до 50 мол % в бислое наблюдается сосуществование двух фаз — упорядоченной и неупорядоченной (1о+16) [93].