Роль оксида азота и участие нейрональных стволовых клеток в патогенезе экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита и рассеянного склероза

• Автор: Данилов, Александр Игоревич
• Шифр специальности: 14.00.16
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 140 с. : 16 ил.

Оглавление

Список сокращений

Введение

Глава I. Обзор литературы

1.1. Роль оксида азота в патогенезе рассеянного склероза

1.2. Роль оксида азота в патогенезе аутоиммунного эксперименталь

ного энцефаломиелита.

1.3. Современные представления о процессах ремиелинизации при

рассеянном склерозе и экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите.

Глава II. Материалы и методы исследования
2.1. Характеристика обследованных групп больных
2.2. Капиллярный электрофорез как метод определения продуктов
окисления оксида азота в биологических средах.
2.3. Метод активной иммунизации крыс вида Dark Auguti миелино
вым олигодендроцитарным белком с последующим назначением L-NAME посредством осмотических минипомп.
2.4. Метод оценки состояния специфического гуморального иммун
ного ответа в динамике экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита (ELISA).
2.4.1. Оценка степени активации Т клеточного звена иммунной систе
мы с помощью метода ELISPOT.
2.4.2. Маркировка эпендимальных клеток головного и спинного мозга
крыс, переносящих аутоиммунный экспериментальный энцефаломиелит. Методы выделения нервной ткани с последующим иммуногистохимическим окрашиванием.

2.4.3. Методы статистической обработки результатов
Глава III. Результаты собственных исследований
3.1. Продукты окисления оксида азота как маркеры активности вое
палительного процесса при рассеянном склерозе.
3.2. Влияние ингибитора NOS на клиническое течение эксперимен
тального аутоиммунного энцефаломиелита и интенсивность воспалительного процесса.
3.3 Влияние ингибиторов NOS на Т клеточный иммунный ответ при
экспериментальном аутоиммунном энцефаломиелите.
3.4. Влияние внутрижелудочкового назначения ингибитора NOS L
NAME на состояние гуморального иммунного ответа на модели экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита.
3.5. Влияние ингибиторов NOS на системный метаболизм оксида
азота в динамике экспериментального аутоиммунного энцефаломиелита.
3.6 Нейрональные стволовые клетки как потенциальный источник
ремиелинизации при воспалительно демиелинизирующих заболеваниях нервной системы.
Глава IV. Заключение и общие выводы
Выводы.
Список цитированной литературы

Список сокращений
AG - аминогуанидин
BrDu - бромодезоксиуридин
CD - кластеры дифференцировки лейкоцитов
Dil - 1,1 диоктадецил 6,6 ди 4 сульфопентил 3,3,3,3, тетраметилиндокарбо цианин (1,1'- dioctadecyl-6,6'-di (4sulfopentyl)-3,3,3',3'tetramethylindocarbo cyan in)
EDSS - expanded disability status scale.
ELISPOT - enzyme linked immunospot
GFAP - глиальный фибрилярный белок
IL - интерлейкин
INFy - интерферон гамма
L-NAME N-nitro -metyl-L-arginine - ester
MBP - основной белок миелина (myelin basic protein)
МНС - главный комплекс гистосовместимости
M.O.G. - миелиновый олигодендроцитарный гликопротеин
N0 - оксид азота
NOS - синтетаза оксида азота
PDGFa - тромбоцитарный ростовой фактор альфа
RT PCR - реверсивно транскриптазная полимеразная цепная реакция
sVCAM-1 - растворимые молекулы клеточной адгезии первого типа
Th -1 - Т-хелперы первого типа
Th -2 - Т-хелперы второго типа
TNFa - фактор некроза опухоли альфа (ФНОа)
Е.Э.Б - гематоэнцефалический барьер Р.С. - рассеянный склероз
Э.А.Э. - экспериментальный аутоиммунный энцефаломиелит.

рекрутированию клеток эффекторов в Ц.Н.С. и развитию воспаления, (Веп-Nun А et al., 1981,Linington С et al., 1988) в то время как анти M.O.G. антитела обуславливают развитие демиелинизации. (Kerlero de Rosbo N et al., 1990, Lassmann H et al., 1998). Конечный вариант развития заболевания зависит от взаимодействия генетических факторов, регулирующих Т и В клеточные механизмы имунного ответа, и метода иммунизации, каждый из которых по разному стимулирует Т и В клеточный имунный ответ. Следует так же отметить, что согласно современным представлениям патогенез P.C. представляется в значительной степени гетерогенным и обусловленым различными иммунологическими механизмами, что так же является характерной для патоморфологии описываемой модели (Storch М, Lassman Н 1997). Так было убедительно показано, что вызывая Э.А.Э. на различных инбредных линиях крыс, а так же используя различные режимы иммунизации, возможно в лабораторных условиях с высокой степенью воспроизводимости вызывать Э.А.Э. весьма сходный по типу течения (волнообразный или первично прогрессирующий) и патоморфологическим измениям как с классическим P.C., так и с его вариантами, такими как оптический неврит, синдром Девика, Марбургский тип, а так же оптический нейромиелит (Storch М.К., et al 1998).
Таким образом, принимая во внимание вышеописнанные преимущества M.O.G. индуцированного Э.А.Э. вызываемого на крысах Dark Agouti изучение влияния ингибитора NOS L-NAME было проведено на данной модели. Целью настоящего исследования явилось комплексное изучение последствий назначения ингибитора NOS в ходе М.O.G. индуцированного Э.А.Э. на крысах Dark Agouti, а так же влияние ингибиторов N0 на Т и В клеточные компоненты иммунного ответа в динамике Э.А.Э.