Характеристика паттернов информативных лабораторных показателей развития системного воспалительно-инфекционного процесса у больных с тяжелыми термическими травмами

• Автор: Филиппова, Юлия Юрьевна
• Шифр специальности: 14.03.09
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Челябинск
• Количество страниц: 116 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Пусковые факторы системного воспалительно-инфекционного ответа при тяжелой термической травме
1.1.1. Роль молекулярных сигналов повреждения и гибели клеток в развитии ожоговой болезни

1.1.2. Инфекции ожоговой раны

1.2. Нарушение механизма классического воспаления при тяжелой термической травме

1.3. Цитокины как потенциальные маркеры тяжести течения

и летального исхода сепсиса у ожоговых больных

Г лава 2. Материалы и методы исследования

2.1. Дизайн исследования
2.2. Методы исследования
2.2.1. Иммунологические методы исследования
2.2.2. Методы статистической обработки данных
Г лава 3. Результаты собственных исследований
3.1. Особенности формирования системного воспалительноинфекционного ответа у больных с тяжелыми ожогами и поиск ранних маркеров смешанного микробного инфицирования ожоговых

3.2. Комплексная оценка цитокиновой составляющей сыворотки крови и цитокинового потенциала лейкоцитов периферической крови в группах доноров и ожоговых больных в зависимости от развития и исхода
системного воспалительно-инфекционного процесса
3.2.1. Анализ профилей цитокинов сыворотки и лейкоцитов

периферической крови доноров и пациентов с тяжелыми ожогами
на 3-6 и 10-17 сутки после травмы
3.2.2. Основные параметры цитокинового потенциала лейкоцитов периферической крови ожоговых больных в условиях «in vitro» в
зависимости от тяжести течения и исхода болезни
3.3. Цитокины сыворотки и sTREM-1 в качестве прогностических лабораторных маркеров тяжести и исхода сепсиса у ожоговых больных
Заключение
Выводы
Список используемых сокращений
Список терминов
Список литературы
Приложения

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы
Ожоги - одна из самых распространенных и разрушительных форм травмы. По данным Всемирной организации здравоохранения термические поражения занимают 3 место среди прочих травм, в России на их долю приходится 10-11% случаев [2, 21, 34]. 75% пациентов с тяжелыми ожогами (более 40% общей поверхности тела) умирают от сепсиса, вызванного инфекцией ожоговой раны и/или от развивающегося синдрома полиорганной недостаточности (ПОН) [68, 77, 83, 136]. Как отмечает H.A. Гординская (2008): «практически каждого больного с обширными глубокими ожогами следует рассматривать как потенциально септического с первых суток после травмы». В настоящее время сепсис характеризуется как комплексный иммунный ответ, который варьирует во времени и демонстрирует поляризацию цитокиновой экспрессии:
1) в раннюю фазу - системный гипервоспалительный ответ на фоне потери компетенции основных эффекторов врожденного иммунного ответа - клеток миелоидно-фагоцитарной системы (МФС) (главным образом, способности к партнерству и кластрированию в создании очага локального воспаления) при тяжелых ожоговых травмах;
2) в позднюю фазу - гиперпродукцию противовоспалительных цитокинов в ассоциации с выраженным апоптозом клеток врожденного и адаптивного иммунных ответов [11,91, 104, 109].
Цитокины являются важными регуляторами иммунных процессов, и их продукция осуществляется клетками многих типов, прежде всего, моноцитами и нейтрофилами [8, 14, 60, 72, 106, 128, 140, 142]. Однако в условиях системного воспаления основную роль в создании системных цитокиновых полей различной поляризации и выраженности берут на себя

Основной частью наших исследований являлось изучение цитокинового профиля сыворотки и лейкоцитов периферической крови доноров и пострадавших с тяжелой термической травмой.
В сыворотке крови пациентов были определены уровни некоторых цитокинов (IL-6, TNF-a, IL-8, IL-lß, IL-lRa, IFN-y, IL-18, IL-2, IL-4 и IL-10) и растворимой формы sTREM-1.
Уровень IL-4 был определен в циркуляции у 18 больных на 3-6 сутки, 30 пациентов на 10-17 сутки после ожога и у девяти доноров. У 73% больных и у 78% здоровых людей уровень IL-4 в сыворотке крови был ниже чувствительности тест-системы (2 пг/мл). Концентрация IL-2 была определена у 15 пациентов на разных стадиях ожоговой болезни и у пяти доноров. У 80% доноров и больных уровень этого цитокина в сыворотке крови также был ниже чувствительности тест-системы (5 пг/мл). Поэтому определение данных показателей в крови остальных пострадавших не проводилось.
Уровень IL-18 был определен в сыворотке и супернатантах только у 12 больных на 3-6 сутки, 21 пациента на 10-17 сутки после травмы, и девяти доноров. Из-за малого количества исследуемых образцов, данный показатель не вошел в общую математическую модель, полученные результаты были обработаны стандартными статистическими техниками.
Оценку цитокинового профиля лейкоцитов периферической крови (МПК и НПК) проводили с помощью определения уровня некоторых цитокинов (IL-6, TNF-a, IL-8, IL-lß, IL-lRa, IFN-y, IL-18, и IL-10) в супернатантах клеток, культивированных in vitro. МПК и НПК культивировали в ростовой среде (раствор Хенкса) - интактные клетки (и), и в ростовой среде с дополнительной стимуляцией живой Escherichia coli {E. coli) штамм 25922 АТСС - активированные клетки (а). Для создания в эксперименте условий, приближенных к естественным, в среду культивирования добавляли 10% аутосыворотки обследуемого лица [81].
Содержание цитокинов в среде культивирования МПК определяли