Роль цитотрофобласта плаценты человека в регуляции способности дендритных клеток стимулировать клеточные формы иммунных реакций

• Автор: Матвеичев, Алексей Валерьевич
• Шифр специальности: 14.03.09
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Нижний Новгород
• Количество страниц: 145 с. : ил.

Оглавление

Список сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1 Общие сведения о дендритных клетках

человека
1.2 Ранние стадии дифференцировки дендритных клеток, характеристика предшественников различных субпопуляций

1.2.1 Миелоидные дендритные клетки

1.2.2. Клетки Лангерганса

1.2.3 Плазмацитоидные дендритные клетки

1.3 Поглощение и процессинг антигена незрелыми дендритными

клетками
1.4 Созревание дендритных клеток
1.5 Миграция дендритных клеток
1.6 События в лимфатическом узле
1.7 Взаимодействие дендритных клеток и Т-лимфоцитов
1.8 Регуляция хоминга лимфоцитов дендритными клетками
1.9 Фето-плацентарный барьер
1.10 Зона контакта. Трофобласт
1.11. Морфология клеток трофобласта и пути их дифференцировки
1.12. Специфические маркеры клеток трофобласта
1.13. Цитокиновый сдвиг Тх-1/Тх-2 при беременности
1.14. Антигенпрезентирующие клетки в матке и децидуальной оболочке.. ..44 Глава 2. Материалы и методы
2.1 Объект исследования
2.2. Моноклональные антитела, цитокины и активаторы
2.3. Питательные среды для культур клеток
2.4 Реагенты

2.5 Методы исследования
2.5.1 Выделение клеток цитотрофобласта
2.5.2 Оценка чистоты выделения клеток цитотрофобласта
2.5.3 Стерильный забор венозной крови
2.5.4 Выделение мононуклеарных клеток крови и приготовление клеточных суспензий
2.5.5 Индукция созревания ДК, совместные культуры ДК и
трофобласта
2.5.6 Смешанная культура лимфоцитов (CKJI)
2.5.7 Оценка влияния клеток трофобласта на способность ДК индуцировать пролиферативный ответ лимфоцитов
2.5.8 Оценка влияния,клеток трофобласта на способность ДК индуцировать продукцию лимфоцитами интерферона-у и ИЛ-
2.5.9 Оценка влияния клеток трофобласта на продукцию цитокинов культурами ДК
2.5.10 Оценка изменения фенотипа ДК под действием клеток трофобласта
2.5.11 Оценка действия ДК и ДК-Тр на миграционные свойства Т-лимфоцитов по экспрессии CD62L
2.5.12 Статистическая обработка данных
Глава 3. Результаты исследования
3.1 Отработка метода выделения и культивирования клеток
цитотрофобласта человека, оценка чистоты выделения
3.2 Индукция созревания ДК в культурах моноцитов периферической
крови. Влияние сокультивирования с трофобластом на морфологию ДК in vitro
3.3 Оценка влияния клеток трофобласта на фенотипические свойства ДК..
3.4 Действие клеток цитотрофобласта на продукцию цитокинов дендритными
клетками in vitro при совместном культивировании
3.5 Влияние клеток цитотрофобласта на способность ДК стимулировать
пролиферацию и продукцию цитокинов отвечающими
лимфоцитами
3.6 Влияние ДК и ДК-Троф на экспрессию Т-лимфоцитами молекулы
СБ62Ь
Глава 4. Обсуждение результатов
Выводы
Список литературы

кровообращения плода (период фетализации плаценты), увеличением массы плаценты и плода, а затем и старением плаценты, сопровождающимся уменьшением площади ее обменной поверхности, отложением солей, снижением антикоагуляционных свойств эпителия ворсин, выпадению фибрина (период зрелой плаценты).
Основной структурно-функциональной единицей сформировавшейся плаценты является котиледон, образованный стволовой ворсиной и ее разветвлениями, несущими сосуды плода [2]. Котиледоны отделены друг от друга неполными перегородками (септами), отходящими от базальной пластины. Основание котиледона закреплено на хориальной пластине, от которой в межворсинчатое пространство отходят крупные стволовые ворсины. Стволовые ворсины многократно делятся с образованием ворсин среднего и малого калибра (ворсины первого и второго порядка соответственно), которые заканчиваются концевыми (терминальными) ворсинами. Часть из них закреплена на базальной мембране или поверхности септ. Эти ворсины носят название якорных [10, 54, 97]. Снаружи ворсины покрыты слоем многоядерного синцитиотрофобласта, глубже находятся поляризованные и активно пролиферирующие мононуклеарные клетки • цитотрофобласта, связанные с базальной мембраной. Под ними находится стромальное ядро, содержащее эмбриональные кровеносные сосуды и макрофаги [4, 10, 197]. Хорионические ворсинки плавают в пределах межворсинчатого пространства, представляющего собой полость, куда свободно изливается кровь из разрушенных сосудов децидуальной оболочки, обеспечивая область для питательного и газового обмена между кровью матери и развивающимся зародышем [1, 10, 58, 75].
Важной функциональной единицей плаценты являются концевые (терминальные) ворсины. Они различаются по форме и размерам в зависимости от того, на каком участке хориона они находятся, и их поверхность покрыта микроворсинами, образованными в результате инвагинации слоя плазмолеммы, окружающей ворсины.