Металлсвязывающая активность низкомолекулярных некрахмальных полисахаридов

• Автор: Макарова, Ксения Евгеньевна
• Шифр специальности: 14.03.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2014
• Место защиты: Владивосток
• Количество страниц: 109 с. : 20 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

Современные методы терапии интоксикаций тяжелыми металлами

1.1. Проблема загрязнения окружающей среды тяжелыми металлами и способы ее решения

1.2. Влияние тяжелых металлов на здоровье человека: острые и хронические отравления

1.3. Терапия и профилактика хронических и острых интоксикаций тяжелыми металлами

1.4. Получение низкомолекулярных пектинов и альгинатов

Заключение
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Характеристика экспериментальных образцов
2.2. Получение низкомолекулярных некрахмальных полисахаридов
2.2.1. Гидролиз пектинов и альгинатов
2.2.2. Получение кальциевых солей пектинов и альгинатов
2.3. Стандартизация образцов пектинов и альгинатов
2.4. Определение констант связывания кадмия, свинца и ртути некрахмальными полисахаридами и препаратами сравнения in vitro
2.5. Определение свинца в биологических образцах
2.6. Характеристика экспериментальных животных
2.7. Статистическая обработка результатов
Глава 3. РАЗРАБОТКА МЕТОДА ПОЛУЧЕНИЯ НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНЫХ НЕКРАХМАЛЬНЫХ ПОЛИСАХАРИДОВ
3.1. Получение пектинов
3.2. Получение альгинатов

Глава 4. ИЗУЧЕНИЕ ЗАВИСИМОСТИ МЕТАЛЛСВЯЗЫВАЮЩЕЙ АКТИВНОСТИ ПЕКТИНОВ И АЛЬГИНАТОВ ОТ МОЛЕКУЛЯРНОЙ МАССЫ
4.1. Свинецсвязывающая активность пектинов и альгинатов с различной молекулярной массой in vitro
4.1.1. Кинетика связывания свинца пектинами и альгинатами
с различной молекулярной массой и препаратами сравнения
4.1.2. Свинецсвязывающая активность пектинов и альгинатов с
различной молекулярной массой и препаратов сравнения при pH 2,
4.2. Кадмийсвязывающая активность пектинов и альгинатов с различной молекулярной массой in vitro
4.2.1. Кинетика связывания кадмия пектинами и альгинатами
с различной молекулярной массой
4.2.2. Кадмийсвязывающая активность пектинов и альгинатов
с различной молекулярной массой при pH 2,0-6
4.3. Ртутьсвязывающая активность пектинов и альгинатов с различной молекулярной массой in vitro
4.3.1. Кинетика связывания ртути пектинами и альгинатами с различной молекулярной массой и активированным углем
4.3.2. Ртутьсвязывающая активность пектинов и альгинатов с различной
молекулярной массой и активированного угля при pH 2,0-6
Глава 5. ВЛИЯНИЕ НИЗКОМОЛЕКУЛЯРНЫХ ПЕКТИНОВ
И АЛЬГИНАТОВ НА ЭКСКРЕЦИЮ СВИНЦА
У ЭКСПЕРИМЕНТАЛЬНЫХ ЖИВОТНЫХ
ОБСУЖДЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы. Разработка новых лекарственных средств и поиск сырьевых источников фармацевтических субстанций представляют первостепенную задачу экспериментальной и клинической фармакологии. Актуальность этой задачи подчеркивается тем фактом, что в структуре фармацевтического рынка нашей страны отечественные производители лекарственных препаратов составляют менее 25%, и в ассортименте производимых препаратов крайне незначительна доля современных высокоэффективных лекарств [Хотимченко Ю.С., 2010]. Важным источником новых фармацевтических субстанций и лекарств являются природные соединения, их производные и синтетические аналоги, на основе которых, по разным оценкам, создается от 40 до 70% фармакологически активных веществ [Стоник В.А., Толстиков Г.А., 2008; Satheeshkumar N. et al., 2012; Bilecova-Rabajdova M. et al., 2013; Kaur K. et al. 2014]. Среди этих соединений обращают на себя внимание углеводные биополимеры, составляющие группу некрахмальных полисахаридов, к которым относят альгинаты, фукоида-ны, каррагинаны и хитозаны, содержащиеся в основном в морских гидробион-тах, и пектиновые вещества наземных растений и морских трав [Хотимченко Ю.С. и др., 2005; Caffall К.Н., Mohnen D., 2009; Kumar V. et al, 2012].
Отличительным физиологическим свойством некрахмальных полисахаридов является их устойчивость к действию амилаз экзокринных желез млекопитающих, благодаря чему они не абсорбируются в тонкой кишке и не оказывают резорбтивные эффекты [Plaami S.P, 1997; Walsh М.С. et al, 2012]. Несмотря на это некрахмальные полисахариды обладают широким спектром фармакологических эффектов, таких как гастропротективный [Хасина Э.И. и др., 2003; Крылова С.Г. и др, 2009; Ефимова JI.A. и др, 2010], гепатопротек-тивный [Сонина JI.H, Хотимченко М.Ю, 2007; LiT.P, 2013; Hua Y. et al, 2014], нефропротективный [Хотимченко М.Ю. и др, 2008а, 2009], гиполипи-демический [Metzger В.Т. et al, 2009; Brouns F. et al, 2012; Jakobsdottir G. et al, 2013], иммуномодулирующий [Tsuji R.F. et al, 2003; Yoshikawa Y. et al, 2008] и некоторые другие. Благодаря низкой токсичности и возможности получения модифицированных производных с более высокой или принципи-

Рисунок 12. Хроматограмма альгината кальция с молекулярной массой 18,9 кДа.
Метод определения среднечисловой молекулярной массы пектатов и альгинатов по концевым восстанавливающим группам основан на реакции восстановления двухвалентной меди олигоуронидами при нагревании в присутствии арсеномолибденовой кислоты. Продуктом данной реакции является молибденова синь, интенсивность окраски которой измеряли фотометрически при 620 нм. Калибровочный график для расчетов строили в координатах: оптическая плотность при 620 нм - концентрация D-галактуроновой кислоты, мкМоль/л. В качестве стандарта использовали D-галактуроновую кислоту («Sigma», США). Среднечисловую молекулярную массу образца олигоуро-нида (М„) в Да вычисляли по формуле:

т*(100-ИО*0,884*10000
Мп = Г ГГ , где
С»0,907»100
Мп— среднечисловая молекулярная масса образца олигоуронида;
т - масса навески олигоуронида, мг;
- массовая доля воды в образце олигоуронида;
С - концентрация Б-галактуроновой кислоты, установленная по калибровочному графику, мкМоль/л;
0,907 - коэффициент пересчета О-галактуроновой кислоты в ангидро-О-галактуроновую кислоту;
0,884 - коэффициент пересчета олигоуронида натрия в полигалактуро-новую кислоту.