Роль альвеолярных макрофагов и нейтрофилов в развитии острой респираторной вирусной инфекции при использовании иммуномодуляторов

• Автор: Шишкина, Лариса Николаевна
• Шифр специальности: 14.03.03
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 296 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Главы
ОБОЗНАЧЕНИЯ И СОКРАЩЕНИЯ
ВВЕДЕНИЕ
1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
Гуморальные и клеточные факторы легких, влияющие на резистентность организма к вирусным инфекционным агентам..
1.1. Влияние эндогенных и экзогенных факторов на резистентность
организма и восприимчивость клеток-мишеней к вирусам, в том числе к вирусу гриппа
1.1.1. Значение белков сурфактанта для защиты легких от
инфекционных патогенов
1.1.2. Генетически опосредованная врожденная резистентность ; к

ортомиксовирусам - ген Мх
1.1.3. Система интерферона
1.1.4. Макрофаги и нейтрофилы как клетки врожденной
неспецифической противовирусной защиты
1.1.5. Воздействие экзогенных факторов на резистентность организма
к вирусу гриппа
1.2. Механизмы повреждения респираторных органов при
гриппозной инфекции. Репродукция вируса гриппа в клетках-мишенях
1.2.1. Особенности гемагглютинина, обусловливающие
инфекционность вируса гриппа в различных клетках и тканях
1.2.2. Клетки-мишени для вируса гриппа
1.3. Влияние иммуномодуляторов на макрофаги и нейтрофилы и
резистентность организма к инфекционным агентам, в том числе к вирусу гриппа
1.4. Влияние глюкокортикоидов на резистентность организма и
восприимчивость клеток-мишеней к вирусу гриппа
1.5. Влияние глюкокортикоидов на функциональную активность
альвеолярных макрофагов и нейтрофилов как факторов резистентности организма к вирусу гриппа

1.6. Миграция нейтрофилов в легкие как основной орган их
секвестрации и метаболизации в норме и при воспалении. Значение и механизмы реализации этой функции легких
2 МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ
2.1. Лабораторные животные
2.2. Используемые препараты
2.3. Вирус гриппа (ВТ) и определение его концентрации
2.4. Интраназальное заражение мышей ВТ и определение его 50 %
летальной дозы (ЛД50)
2.5. Аэрозольное заражение мышей ВТ и определение его 50 %
аэрогенной летальной дозы (АЛД50)
2.6. Аэрозольное заражение мышей ВТ и определение его 50%
аэрогенной инфицирующей дозы (АИД5о) для легких и трахеи
2.7. Оценка восприимчивости к ВТ клеток легких и трахеи in vitro
2.8. Определение наличия ВТ в тканях легких и трахеи или в
суспензии клеток легких и трахеи
2.9. Получение первичных суспензионных культур клеток легких и
трахеи мышей
2.10. Определение почечных индексов (ПИ) органов крыс и мышей
2.11. Получение и идентификация клеток бронхоальвеолярной
лаважной жидкости (БАЛЖ) крыс
2.12. Получение и идентификация клеток перитонеальной лаважной
жидкости (ПЛЖ) крыс
2.13. Получение бронхоальвеолярной лаважной жидкости (БАЛЖ)
мышей
2.14. Получение монослоя клеток БАЛЖ крыс и мышей
2.15. Оценка способности макрофагов и нейтрофилов БАЛЖ и ПЛЖ
крыс фагоцитировать стафилококки (St)
2.16. Определение спонтанной супероксиданион-продуцирующей
активности макрофагов и нейтрофилов БАЛЖ и ПЛЖ крыс в НСТ-тесте
2.17. Определение способности АМф и Нф(а) крыс и мышей
фагоцитировать зимозановые гранулы (ЗГ)
2.18. Определение супероксиданион-продуцирующей активности

АМф и Нф(а) крыс и мышей при фагоцитировании ЗГ в НСТ-тесте
2.19. Определение концентрации эндогенных глюкокортикоидов в
крови крыс
2.20. Определение доли меченых 5|Сг клеток, мигрирующих в
органы крыс
2.21. Цитологические исследования
2.22. Определение концентрации интерферона а/р в гомогенатах
легких
2.23. Микроскопические исследования тканей органов мышей
2.24. Статистические методы
2.25. Экспериментальные группы животных и схемы введения
препаратов
3 СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Изучение влияния глюкокортикоидов на фагоциты легких и
перитонеальной полости у крыс
3.1.1. Показатели глюкокортикоид-чувствительных органов и
фагоцитов легких и перитонеальной полости у крыс после введения преднизолона
3.1.2. Показатели лейкоцитов крови и глюкокортикоид-
чувствительных органов у крыс после введения кеналога
3.1.3. Сравнительное изучение функциональной активности
фагоцитов легких и перитонеальной полости у крыс после введения кеналога
3.1.4. Изучение миграции 5|Сг-меченых нейтрофилов в легкие и
другие органы крыс после введения кеналога
3.2. Разработка экспериментальной модели пониженной резистентности организма к ВГ при введении мышам глюкокортикоида пролонгированного действия кеналога
3.2.1. Выбор доз и схем введения кеналога для исследования
пониженной резистентности мышей к ВГ, изучение влияния кеналога на глюкокортикоид-чувствительные органы и клетки крови мышей
3.2.2. Изучение показателей резистентности мышей к ВГ после

В связи с этим, необходимо упомянуть о существовании современных представлений о классической и альтернативной активации Мф на основании работ, выполненных in vitro при их культивировании с ЛПС, IFN-y, IL-4, IL-10 или глюкокортикоидами [17, 51, 215, 220, 250, 382, 400, 480, 550]. Как уже было сказано выше, Мф являются одним из звеньев, связывающих врожденный и приобретенный иммунитет благодаря способности презентировать чужеродные антигены, выделять хемокины, привлекающие Лф в очаг воспаления, а также вырабатывать цитокины, способствующие развитию определенного иммунного ответа: продуцируя IL-12, они продвигают ТЫ, а продуцируя IL-10 - ТЬ2 иммунный ответ [64, 100, 135, 378, 382].
По аналогии с Th 1 и ТЬ2 клетками Мф разделяют на классически активированные Мф (Ml), возникающие под влиянием IFN-y и TNF-a, и альтернативно активированные Мф (М2), появляющиеся в результате воздействия IL-4 и IL-13 [21, 64, 378, 492]. Ml обладают воспалительными свойствами: вырабатывают N0, АФК, провоспалительные цитокины (IL-1, 6, 12, 15, 18, 23), обладают повышенной фагоцитарной и микробицидной способностью, индуцируют апоптоз инфицированных клеток. М2 продуцируют антивоспалительные цитокины (IL-10, IL-IRa, IL-18-связывающий белок, TGF-ß), способствуют ангиогенезу, клиренсу и репарации ткани [492]. Сначала дифференцировку моноцитов в Ml и М2 схематично представляли следующим образом (рис. 6) [492].
Моноцит
1*1га
ЗЛЗэБДЮЦИР

Макрофаг

ОЧИЩЕНИЕ РЕ МОДЕЛИРОВАНИЕ МАТРИКСА ВОССТАНОВЛЕНИЕ ТКАНЕЙ АНГИОГЕНЕЗ

БАКТЕРИЦИДНАЯ АКТИВНОСТЬ ВОСПАЛИТЕЛЬНЫЕ ЦИТОКИНЫ ИММУНОСТИМУЛЯЦИЯ
обхопи
crvxav
Рис. 6. Дифференцировка моноцитов в макрофаги М1 и М2 под воздействием биологически активных веществ [492].