Исследование минимальной остаточной болезни у детей с острым лимфобластным лейкозом из в-линейных предшественников, получающих терапию по протоколам ALL-MB 2008 и MLL-BABY, методом проточной цитометри

• Автор: Попов, Александр Михайлович
• Шифр специальности: 14.01.21
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 102 с. : 19 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1. Острый лимфобластный лейкоз у детей

1.1.1. Эпидемиология ОЛЛ у детей

1.1.2. Современные представления о механизмах развития

острых лейкозов

1.1.3. Современные методы лечения острого лимфобластного лейкоза у детей

1.2. Минимальная остаточная болезнь

1.2.1. Ответ на терапию как фактор риска при ОЛЛ

1.2.2. Современные методы определения минимальной остаточной болезни при ОЛЛ
1.3. Определение минимальной остаточной болезни у детей
с ОЛЛ методом проточной цитометрии
1.3.1. Принцип метода проточной цитометрии
1.3.2. Применение проточной цитометрии для определения минимальной остаточной болезни при ОЛЛ у детей
1.3.3. Комбинации моноклональных антител, применяющиеся для мониторинга минимальной остаточной болезни при
ОЛЛ из В-линейных предшественников
1.3.4. Изменения иммунофенотипа опухолевых клеток во
время терапии ВП-ОЛЛ
1.3.5. Выбор материала для мониторинга минимальной остаточной болезни методом проточной цитометрии
1.3.6. Особенности мониторинга минимальной остаточной болезни при ВП-ОЛЛ у детей первого года жизни

1.3.7. Прогностическое значение минимальной остаточной болезни, определенной методом проточной цитометрии
у детей с ОЛЛ
1.3.8. Сопоставление данных проточной цитометрии с результатами определения минимальной остаточной болезни другими методами
1.3.9. Мониторинг минимальной остаточной болезни в рамках протоколов, применяющихся в Российской Федерации и Республике Беларусь
Глава 2. Материалы и методы исследования
2.1. Пациенты, включенные в исследование
2.2. Методы исследования
2.2.1. Иммунофенотипирование методом проточной цитометрии
2.2.2. Выявление экспрессии химерных генов
2.2.3. Статистическая обработка данных
Глава 3. Результаты исследования и их обсуждение
3.1. Аберрации иммунофенотипа, применимые для мониторинга минимальной остаточной болезни методом проточной цитометрии
3.1.1. Оценка интенсивности экспрессии антигенов опухолевыми и нормальными клетками
3.1.2. Оценка гетерогенности опухолевых клеток по экспрессии антигенов
3.1.3. Алгоритмы анализа данных при определении минимальной остаточной болезни методом проточной цитометрии
3.1.4. Особенности определения минимальной остаточной болезни при ВП-ОЛЛ у детей первого года жизни
3.2. Изменения иммунофенотипа опухолевых клеток во время
терапии
3.2.1. Изменения экспрессии антигенов во время индукционной терапии по протоколу ALL-MB 2
3.2.2. Изменения экспрессии MLL-ассоциированного маркера NG2 во время терапии ВП-ОЛЛ у детей первого года жизни
3.3. Выявление наличия нормальных В-линейных предшественников в костном мозге пациентов с ВП-ОЛЛ на различных этапах терапии
3.4. Сравнение результатов определения минимальной остаточной болезни при помощи «упрощенного» и стандартного подходов к анализу данных
3.5. Сравнение результатов определения минимальной остаточной болезни методом проточной цитометрии и выявления химерного транскрипта в ходе полимеразной цепной реакции
3.6. Определение минимальной остаточной болезни методом проточной цитометрии у пациентов с ВП-ОЛЛ в рамках протокола ALL-MB 2
3.6.1. Результаты определения минимальной остаточной болезни
3.6.2. Связь результата определения минимальной остаточной болезни на момент окончания индукционной терапии с другими факторами риска ОЛЛ
Заключение Выводы
Литература

1.3.9. Мониторинг минимальной остаточной болезни в рамках протоколов, применяющихся в Российской Федерации и Республики Беларусь
Наличие в Российской Федерации и Республике Беларусь оригинальных протоколов терапии OJTJT у детей разных возрастных групп [12, 13, 14, 86, 106] диктует необходимость разработки собственных алгоритмов мониторинга МОБ. Однако попытки применения проточной цитометрии для оценки минимальной остаточной болезни в рамках российских протоколов единичны [2, 7, 10, 11]. К настоящему времени прогностическая значимость определения МОБ методом проточной цитометрии показана только в одной работе [10]. В рамках протокола ALL-MB 2002 H.H. Савва и соавт. показали, что наличие и величина МОБ на момент окончания индукционной терапии (36-й день) определяют прогноз заболевания. При проведении многофакторного анализа было выявлено, что наличие МОБ является наиболее значимым прогностическим фактором. Для протокола MLL-Baby в настоящее время прогностическое значение определения МОБ показано только для определения ХТр в ОТ-ПЦР [16]. Кроме того, в рамках протокола ALL-IC проводилось определение МОБ при помощи «упрощенного» подхода [7], предложенного Е. Coustan-Smith et al для лабораторий с ограниченными возможностями [61]. В итоге, в настоящее время опубликованы только результаты применения трехцветной проточной цитометрии, чувствительность и применимость которой сейчас считаются недостаточными [11, 43, 81].
Таким образом, несмотря на достаточно богатый опыт, накопленный к настоящему времени в мониторинге МОБ методом проточной цитометрии, возможности применения его в рамках российских протоколов лечения OJTJI, таких как ALL-MB 2008 и MLL-Baby, остаются неизученными. Это касается не только прогностической значимости наличия и величины МОБ на различных этапах терапии, но также методических подходов к проведению исследования. Так, например, детально не описаны наиболее часто встречающиеся аберрации иммунофенотипа и не выявлено, какие антигены являются наиболее