Совершенствование лабораторной диагностики вирусных инфекций у онкогематологических больных

• Автор: Бурылев, Виталий Владимирович
• Шифр специальности: 14.01.21
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 105 с. : 3 ил.

Оглавление
Список сокращений
Общая характеристика работы
Обзор литературы
Глава I Вирусные инфекции в структуре инфекционных осложнений у онкогематологических больных
1.1 Герпесвирусные инфекции и проблемы инфекционной безопасности
гемотрансфузий у иммуносупрессивных онкогематологических больных
1,2.Респитаторные вирусные инфекции и их ассоциации с герпесвирусами при
инфекционных осложнениях у онкогематологических больных
1.3 Лабораторная диагностика вирусных инфекций
Собственные данные
Глава II Объект, материалы и методы исследования
2. Характеристика обследованных контингентов
2.2 Биологические материалы
2.3 Методы исследования
2.4 Разработка биочипа
Глава III Этиологическая структура вирусных инфекционных
осложнений у онкогематологических больных
3.1 Исследование маркеров герпесвирусных инфекций у больных гематологического стационара и доноров крови
3.2 Этиологические и клинические особенности герпесвирусных и респираторных инфекционных осложнений при гемобластозах
Глава IV. Разработка биочипа для молекулярно-биологической
диагностики герпесвирусных нфекций
4.1 Подбор праймеров и зондов
4.2 Печать биочипа и подбор условий гибридизации
4.3 Выявление герпесвирусов с помощью разработанного биочипа
Обсуждение и заключение
Выводы
Практические рекомендации
Список литературы

Список сокращений
ВПГ-1 - вирус простого герпеса 1 -го типа
ВПГ-2 - вирус простого герпеса 2-го типа
ВВО-ОГ - вирус ветряной оспы - опоясывающего герпеса
вгч-з - вирус герпеса человека 3-го типа
ВЭБ - вирус Эпштейна-Барр
ВГЧ-4 - вирус герпеса человека 4 типа
ВГЧ 5 - вирус герпеса человека 5 типа
ЦМВ - цитомегаловирус человека
ВГЧ-6 - вирус герпеса человека 6-го типа
ВГЧ-7 - вирус герпеса человека 7-го типа
ВГЧ-8 - вирус герпеса человека 8-го типа
РПГА - реакция пассивной гемагглютинации
РСК - реакция связывания комплемента
ИФА - иммуноферментный анализ
ПЦР - полимеразная цепная реакция
СПИД - синдром приобретенного иммунодефицита
ІеР - иммуноглобулины класса в
І£М - иммуноглобулины класса М
ткм - трансплантация костного мозга
тсгк -трансплантация стволовых гемопоэтических клеток
мдс -миелодиспластический синдром
мм - множественная миелома
ол - острый лейкоз
олл - острый лимфобластный лейкоз
омл - острый миелобластный лейкозХ
хл - хронический лейкоз
хлл - хронический лимфолейкоз
хмл - хронический миелолейкоз
лх - лимфома Ходжкина
нхл - Неходжкинская лимфома
тцпд -тканевые цитопатические единицы
АТСС -Американская коллекция тканевых культур
РС - респираторно-синцитиальный вирус
пг - вирус парагриппа
УСА - вирусный капсидный антиген вируса
ЕА - ранний антиген вируса
АГ - антиген
АТ - антитело
ЕВИА - ядерный антиген вируса Эпштейна-Барр
РНК - рибонуклеиновая кислота
днк -дезоксирибонуклеиновая кислота

Общая характеристика работы Актуальность проблемы
Несмотря на значительный прогресс, достигнутый в лечении опухолевых заболеваний системы крови с внедрением в клиническую практику новых препаратов, моноклональных антител, трансплантации гемопоэтических стволовых клеток, борьба за продление жизни пациентов сохраняет свою актуальность до настоящего времени. Одной из ведущих причин гибели больных продолжают оставаться инфекционные осложнения. Число возможных этиологических агентов этих осложнений достаточно велико -бактерии, грибы и вирусы. Подверженность больных смешанным инфекциями обусловлена нарушениями в клеточном и гуморальном звеньях иммунитета, расширением входных ворот, вследствие повреждения кожи, слизистых оболочек, длительной катетеризации центральных вен, активизацией эндогенной инфекции. Особенно часто такие осложнения наблюдаются у больных при проведении им высокодозовой химиотерапии (ХТ) или после осуществления больному трансплантации гемопоэтических стволовых клеток, когда организм ослаблен как за счет опухолевого заболевания, так и за счет использования агрессивных программ ХТ [3].
У онкогематологических больных и реципиентов гемопоэтических стволовых клеток тяжелые инфекционные осложнения выявлены у 42% умерших [7]. Риск возникновения тяжелых бактериальных, грибковых, вирусных инфекций существенно повышается при развитии гранулоцитопении. Особенно высок риск развития инфекционных осложнений при уровне гранулоцитов менее 0,1х109/л. [3]. В целом частота инфекционных осложнений при гемобластозах составляет 60-70%, цитомегаловирусной инфекции - 22-45%, ассоциированных инфекций - 20-30%. Разработка эффективных методов терапии позволила добиться значительных успехов в лечении бактериальных и грибковых инфекций. Благодаря своевременному и грамотному применению антибактериальных
монопольная роль в развитии тяжелых пневмоний у обсуждаемой группы больных признавалась за ЦМВ. Заболевание протекает тяжело и при возникновении пневмонии даже в ведущих гематологических центрах смертность достигает 70% и более [137].
В этой связи интересны данные о частой ассоциации ЦМВ с PC вирусом у больных с аллогенной ТКМ [123]. Ассоциированная РС-вирусная - ЦМВ инфекция была выявлена авторами 7 из 8-ми эпизодов (87,5%) ЦМВ инфекции, наблюдавшихся у 11 больных с АТКМ. Такой связи не установлено ни в одном из 7 эпизодов ЦМВ инфекции, выявленных ни у 17 больных с аутологичной ТКМ, ни у 12 больных лейкозами, подвергнутых интенсивной противолейкозной химиотерапии. В последней группе наблюдалось 2 эпизода ЦМВ инфекции. Возможно, ассоциация с РС-вирусом играет значительную роль в развитии ЦМВ болезни.
Метапневмовирус Данные о роли этого вируса у иммуносупрессивных онкогематологических больных немногочисленны. Признается значение метапневмовирусов как агентов, вызывающих тяжелые респираторные инфекции у онкогематологических больных [56]. Имеется сообщение о летальной пневмонии, вызванной метапневмовирусом у пациента с миелоидным лейкозом [106].
Вирусы гриппа, очевидно, являются наиболее опасными респираторными вирусами человека. Для них характерна высокая антигенная изменчивость. С нею связана также вирулентность наиболее эпидемически значимых в определенные годы штаммов вируса. Это, по-видимому, может влиять на показатели заболеваемость и смертности от гриппа в разные годы онкогематологических больных, как и других групп населения.
Грипп у онкогематологических больных часто осложняется пневмониями с высокой летальностью [136]. Они, как правило, связаны с присоединением бактериальной флоры, в основном Streptococcus pneumoniae. Многие исследователи вообще отрицают возможность развития пневмоний, вызванных монопольно вирусом гриппа. Однако тяжелые, часто фатальные,