Экспериментальные подходы к повышению эффективности GM-CSF - секретирующей цельноклеточной противоопухолевой вакцины.

• Автор: Манина, Ирина Владимировна
• Шифр специальности: 14.01.12
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2011
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 125 с. : 13 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

Список сокращений

Введение

Глава 1.Обзор литературы

1.1 .Биотерапия - как перспективный подход к лечению онкозаболеваний

1.2.Способы получения и виды противоопухолевых вакцин

1.3.Представление антигенов в клетке меланомы

1.4. Реализация противоопухолевого иммунного ответа

1.5.Изменение экспрессии МНС в опухолевых клетках как причина низкой

иммуногенности опухолей

1 .б.Применение цельноклеточных GM-CSF секрегирующих противоопухолевых вакцин в онкологии
1.7. Способы повышения эффективности противоопухолевых вакцин
1.8. Комбинирование разных терапевтических подходов как способ
повышения эффективности биотерапии
Глава 2. Материалы и методы исследования
2.1.Клеточные линии и их культивирование
2.2.Приготовление цельноклеточных противоопухолевых вакцин
2.3.Условия криоконсервации и создание банка клеточных культур
2.4. Определение жизнеспособности и роста клеток
2.5. Проточно-цитофлуориметрический анализ
2.6. Экспериментальные животные
2.7. Иммунизация мышей
2.8. Трансплантация опухолевых клеток и учет динамики роста опухоли
2.9. Статистическая обработка результатов
Глава 3. Результаты исследования
Раздел 3.1. Повышение эффективности цельноклеточной GM-CSF секрети-рующей противоопухолевой вакцины in vitro

3.1.1. Повышение эффективности цельноклеточной GM-CSF секрети-рующей противоопухолевой вакцины in vitro путем культивирования в присутствии цитокинов
3.1.2.Изучение экспрессии МНС I и МНС II на клетках GM- CSF секретирующей противоопухолевой вакцины
Раздел 3.2. Изучение эффективности цельноклеточной GM-CSF секретирующей противоопухолевой вакцины in vivo
3.2.1.Изучение эффективности цельноклеточной противоопухолевой GM-CSF секретирующей вакцины in vivo в различных профилактических режимах :
3.2.1.1. монотерапия
4.2.1.2. в комбинации с адьюваитной терапией
3.2.2.Изучение эффективности цельноклеточной противоопухолевой GM-CSF секретирующей вакцины in vivo в различных терапевтических режимах :
3.2.2.1.монотерапи я
3.2.2.2. в комбинации с цитостатиками
3.2.2.3. в комбинации с трансплантацией костного мозга и применением цитостатиков
3.2.2.4. в комбинации с адьювантной терапией, трансплантацией костного мозга и применением цитостатиков
3.2.2.5. в комбинации с хирургическим удалением первичного опухолевого узла
Глава 4. Обсуждение
Заключение
Выводы
Литература
Список сокращений
АПК - антигенпрезентирующие клетки
БЦЖ - бацилла Кальметта — Жерена
ГЗТ - гиперчувствтельность замедленного типа
ДК - дендритные клетки
Днк - дизоксирибонуклеиновая кислота
лпс - липополисахарид
МНС - главный комплекс гистосовмести (Major Histocompatibility
Complex); у человека HLA (human leukocyte antigen)
МПД - максимально переносимая доза
ОАА - опухолъ-ассоциированные антигены
РНК - рибонуклеиновая кислота
СПЖ - средняя продолжительность жизни
ТРМ - торможение развития метастазов
ТРО - торможение роста опухоли
ГЭС - телячья эмбриональная сыворотка
УПЖ - увеличение продолжительности жизни
UjVl - циметидин
CTL - цитотоксические Т-лимфоциты
CTLA-4 - рецептор Т-лимфоцитов, взаимодействующий с молекулами
В-7 на АПК, генерирующий ингибиторный сигнал.
GM-CSF - гранулоцитарно-макрофагальный колониестимулирующий
фактор
H-R - рецепторы гистамина
IFN-y - интерферон гамма
IL - интерлейкин
TCR - Т-клеточный рецептор
CNF- а - фактор некроза опухолей альфа
Th - клетки Т-хелперы
первую очередь подавлять регуляторные Т-клетки, удаление которых усиливает иммунный ответ на многие антигены, в том числе опухолевого происхождения. Комбинация иммунотерапии вМ-СЗБ секретирующими вакцинами с циклофосфамидом и доксорубицином с 2003 года используется в клинической практике [85].
Системное введение цитокинов также способно увеличить эффективность противоопухолевой вакцинотерапии. В клинических испытаниях показано, что применение различных противоопухолевых вакцин, в том числе цельноклеточных, рационально комбинировать с системным введением рекомбинантного СМ-С8Р [84,167,238]. Системное введение ОМ-СБР не увеличивает эффективности вакцинации секретирующими этот цитокин опухолевыми клетками. Тем не менее, системное введение низких доз рекомбинантного 1Ь-2 и 1Р1'-а2 позволяет повышать эффективность иммунотерапии клеточными вакцинами [130]. Комбинация цитокинотерапии с химиотерапией более эффективна по сравнению с монотерапией, особенно при последовательном использовании препаратов цисплатина перед ГЬ-2 [22,36,37]. К настоящему времени отсутствуют достоверные различия при сравнении высокодозных и среднедозовых схем лечения 11.-2 , не выявлено достоверной статистической разницы между монотерапией 1Ь-2 и комбинацией 1Ь-2 и ЛАК.
Наиболее значимые результаты получены при сочетании иммунотерапии пациентов генно-клеточными вакцинами с введением СТЪА-4 терапевтических антител, блокирующих иммуносупрессорные механизмы, используемые опухолью [88,97,114,147]. Механизмом синергического действия предполагают расширение презентации опухолевых антигенов, в результате того, что активность АПК не ингибируется Т-лимфоцитами при взаимодействии молекул семейства В-7 с СТЪА-4. Проблемой данного метода комбинированного лечения становятся проявляющиеся у пациентов аутоиммунные расстройства [143,148,199].