Трансплантация стволовых клеток костного мозга в модели травматической болезни спинного мозга. Экспериментальное исследование

• Автор: Мурадов, Жохонгир Мамадалиевич
• Шифр специальности: 14.00.28
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2007
• Место защиты: Новосибирск
• Количество страниц: 113 с. : 31 ил.

Содержание
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. СОВРЕМЕННОЕ СОСТОЯНИЕ ПРОБЛЕМЫ ЛЕЧЕНИЯ ТРАВМАТИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНИ СПИННОГО МОЗГА (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)

1.1. Некоторые аспекты течения патологических процессов в позднем

периоде ТБСМ

1.2. Восстановительная хирургия спинного мозга в позднем периоде ТБСМ

1.3. Стволовые клетки костного мозга в лечении патологии центральной

нервной системы

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ

2.1. Экспериментальный раздел

2.1.1. Моделирование экспериментального повреждения спинного мозга

2.1.2. Оценка неврологического статуса животных
2.1.3. Приготовление клеточного материала
2.1.4. Приготовление плазменного сгустка
2.1.5. Морфологическое исследование
2.2. Клинический раздел
2.2.1. Общая характеристика больных
2.2.2. Забор и приготовление аутологичных СККМ
2.2.3. Оценка клеток костного мозга
2.3. Статистические исследования
ГЛАВА 3. ВЛИЯНИЕ ТРАНСПЛАНТАЦИИ СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА НА ВОССТАНОВЛЕНИЕ МОТОРНОЙ ФУНКЦИИ СПИННОГО МОЗГА В ЭКСПЕРИМЕНТЕ
3.1. Характеристика движений животных при экспериментальном
повреждении спинного мозга в динамике
3.2. Характеристика движения животных при трансплантации различных клеток костного мозга на 7 сутки после экспериментального повреждения спинного мозга

3.3. Характеристика движений животных при трансплантации различных клеток костного мозга на 21 сутки после экспериментального повреждения спинного мозга
ГЛАВА 4. МОРФОЛОГИЧЕСКИЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
4.1. Морфологические исследования спинного мозга при моделировании экспериментального повреждения
4.2. Морфологическое исследование спинного мозга при трансплантации различных клеток костного мозга на 7 сутки после моделирования повреждения
4.3. Морфологическое исследование спинного мозга при трансплантации различных клеток костного мозга на 21 сутки после моделирования повреждения
ГЛАВА 5. ХАРАКТЕРИСТИКА СТВОЛОВЫХ КЛЕТОК КОСТНОГО МОЗГА У БОЛЬНЫХ ТРАВМАТИЧЕСКОЙ БОЛЕЗНЬЮ СПИННОГО МОЗГА В ПОЗДНЕМ ПЕРИОДЕ
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ГФЬСП Глиальный фибриллярный кислый протеин
ГЭБ Гематоэнцефалический барьер
КМ Костный мозг
МРТ Магнитно-резонансная томография
мнк Мононуклеарные клетки
мск Мезенхимальные стволовые клетки
птс Посттравматическая сирингомиелия
РНК Рибонуклеиновая кислота
скк Стволовые кроветворные клетки
сккм Стволовые клетки костного мозга
ссвп Соматосенсорные вызванные потенциалы
ТБСМ Травматическая болезнь спинного мозга
цнс Центральная нервная система
цсж Цереброспинальная жидкость
эмг Электромиография
АБІА Американская Ассоциация изучения травмы спинного мозга

костного мозга. В 7, 8 и 9 группах после аналогичного повреждения спинного мозга локальная трансплантация этих же видов клеток произведена на 21 сутки после травмы.
При выборе сроков проведения повторных операций, направленных на трансплантацию стволовых клеток в зону травмированного спинного мозга, мы ориентировались на данные Grüner J.A. (1992) и Ohta К. и соавт. (1999). Согласно их данным, дегенеративные изменения при повреждении спинного мозга крыс, по результатам МРТ и гистологических исследований развиваются уже к 28 дню после травмы, что соответствует позднему периоду ТБСМ.
Для этого животным в условиях стерильной операционной производили реоперацию. Под увеличением х 4,4 обнажали участок ламинэктомии и повреждения спинного мозга. В зону повреждения дистально и проксимально от участка дефекта, в зависимости от принадлежности животных к той или иной группе, шприцом вводили соответствующую клеточную фракцию через микроиглу. Фракции клеток вводились в количестве 1 млн.клеток на одного животного в объеме 50 мкл (0,05 мл).
Рана ушивалась послойно наглухо и в дальнейшем проводилось стандартизованное наблюдение за животными.
Все животные выводились из эксперимента на 35 сутки с момента нанесения травмы спинного мозга, путем ингаляционного введения летальной дозы диэтилового эфира.
2.1.2. Оценка неврологического статуса животных
В соответствии с планом исследования, начиная с первых суток после операции, проводили ежедневный осмотр животных в течение 35 суток до момента забоя.
Стандартизованную оценку двигательной активности крыс проводили по методу двиясения в открытом пространстве по Basso D. (Basso D. et al., 1995). Крысы помещались в открытое пространство, в виде плексигласовой коробки 80 х130 см, со стенками 30 см высотой и нескользящим полом. Каждое животное наблюдалось с 2-х сторон в течение 4 минут. Сумма баллов по