Исследование функциональной активности ГАМК#3А#1-рецептор/Cl#2-#1-ионофорного комплекса на различных экспериментальных моделях эпилептогенеза

• Автор: Андреев, Андрей Андреевич
• Шифр специальности: 14.00.16
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2004
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 113 с. : 4 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ
Глава 1 ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1.ГАМКергическая система
1.1.1 .Рецепторы ГАМК
1.1.2.ГАМКл-рецептор ы
1.1.3. Изменение физиологической активности ГАМК в зависимости от особенностей субъединичного состава рецепторного комплекса
1.1.4. Участки связывания в ГАМКА-рецепторе
1.2. модели формирования эпилептической активности
1.2.1 .Электростимуляционный киндлинг
1.2.2. генетическая предрасположенность к эпилепсии (крысы линии WAG/Rij)
1.2.3. Фармакологические модели эпилептизации мозга
1.2.4. Влияние коразолового киндлинга на ГАМКА-рецепторный

комплекс
1.2.5. Синаптопейросомы
Глава 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ
2.1. Исследование действия коразола in vitro
2.2. Методика проведения коразолового киндлинга
2.3. Проведение электростимуляционного киндлинга
2.4. Приготовление синаптонейросом
2.5. Методика проведения эксперимента на синаптонейросомах
2.6. Количественное определение белка
2.7. Определение статистической достоверности результатов
Глава 3 РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1. Влияние однократного введения субсудорожной дозы коразола
на функциональную активность ГАМК-рецепторного комплекса
3.2. Изучение изменения уровня функциональной активности ГАМК-рецепторного комплекса синаптических мембран коры головного
мозга крыс в динамике развития коразолового киндлинга
3.3. Исследование СГ проводимости синаптических мембран коры и гиппокампа крыс подвергнутых электростимуляционному киндлингу
3.4. Исследование СГ проводимости синаптических мембран коры и гиппокампа крыс линии У/АОЛЗу, обладающих генетической предрасположенностью к абсансной эпилепсии
Глава 4 ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы. Эпилепсия, согласно определению экспертов ВОЗ (Женева, 1980), является хроническим заболеванием головного мозга человека, характеризующееся повторными припадками, которые возникают в результате чрезмерных нейронных разрядов и сопровождаются разнообразными клиническими и параклиническими симптомами. Борьба с эпилепсией относится к числу первоочередных задач, так как по данным М. F. Mendez (1995) этим заболеванием страдают от 20 до 40 млн человек (показатель распространенности — 0,68 %). Несмотря на значительные успехи в области терапии различных форм эпилепсии у 25% больных лечение не приводит к успеху (Карлов В.А., 1990; Schmidt, Morselli, 1985). Широкая
распространенность, хронически-прогредиентное течение эпилепсии делает ее не только медицинской, но и важной социальной проблемой.
Как известно, в основе эпилептизации нейронов лежит нарушение баланса между тормозными и возбуждающими процессами в сторону преобладания возбуждения (Карлов В.А., 1990; Крыжановский Г.Н., 1980, 2002). Такая ситуация возникает как в результате нарушения тормозных ГАМК-ергических механизмов, так и усиленного входа Са2+ и Na+ (Крыжановский Т.Н., 1983, 1990, 1991; Heinemarm, Hamon, 1986). ГАМК-ергическое торможение реализуется при активации ГАМКА-рецептора (ГАМКА-рецептор/СГ-ионофорного комплекса), который представляет собой сложноорганизованный олигомерный протеиновый комплекс, состоящий из субъединиц связывающих ГАМК, бензодиазепины, барбитураты, взаимодействие с которыми приводит к усилению активности всего комплекса и увеличению входа СГ, что приводит к гиперполяризационному торможению нейрона. В связи с этим особое внимания заслуживает вопрос о роли функционального состояния ГАМКА-рецепторного комплекса в развитии хронической эпилептизации мозга. Моделью такой эпилептизации может служить киндлинг - хроническое воздействие либо путем подпороговых электростимуляций мозговых структур, либо путем введения эпилептогенов в
немотивированного защитного поведения—в отсутствие внешнего раздражителя животные поднимались на задние лапы, принимали оборонительную позу, пищали, отбивались передними лапами. При предъявлении в течение эпизодов психомоторного возбуждения болевых (защипывание хвоста), звуковых (хлопок) или световых (вспышка света) раздражителей крысы не реагировали на них. В периоды указанных пароксизмальных нарушений в ЭЭГ животных регистрировались пик-волновые комплексы частотой 2 или 4 в 1 с, амплитуда которых была наибольшей в гиппокампе, где достигала 400— 600 мкВ. Продолжительность описанных поведенческих и электрографических пароксизмальных нарушений составляла 20—40 с. Поведенческие нарушения в виде приступов психомоторного поведения наблюдались у отдельных животных по 5—10 раз с интервалами 3—5 мин. Описанные пароксизмальные расстройства поведения и ЭЭГ-изменения, возникавшие после воздействия эпилептогенного фактора, представляют собой синдром психомоторной эпилепсии.
На основании приведенных данных, а также результатов собственных исследований Гарант и Гэйл [110] пришли к выводу о том, что ретикулярная часть черной субстанции является критической структурой в распространении эпилептической активности при киндлинге, а также при других формах эпилептогенеза При этом основным механизмом осуществления этой функции является: активация ГАМК-ергической медиации в нейроперадаче ретикулярной части черной субстанции.
Таким образом, развитие эпилептиформных реакций при киндлинге зависит от функциональной активности ряда структур мозга, что характерно и для других форм ЭпА.