Липосомальная форма фотосенса для фотодинамической терапии опухолей

• Автор: Кортава, Марта Анатольевна
• Шифр специальности: 14.00.14
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2008
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 134 с. : ил.

Оглавление

Список сокращений

Введение

Глава 1. Обзор литературы

1.1.Применение фотодинамической терапии в терапии опухоли

1.1.1 Механизм действия фотосенсибилизаторов

1.1.2. Фотосенсибилизаторы

1.1.3. Локализация фотосенсибилизаторов внутри опухолевых клеток. Объекты поврежедения

1.1.3.1. Апоптоз и некроз

1.1.3.2. Сосудистое поврежедение

1.1.3.3. Противоопухолевая иммуногенность

1.1.4. Клиническое применение ФС в онкологии
1.1.4.1. Немелкоклеточный рак легкого
1.1.4.2. Метастазы печени
1.1.4.3. Опухоли головы и шеи
1.1.4.4. Рак простаты
1.1.4.5. Рак мочевого пузыря
1.1.4.6. Рак кожи
1.1.4.7. Рак пищевода
1.1.5. Преимущества ФДТ и ее недостатки
1.2. Липосомальные формы фотосенсибилизаторов
1.2.1. Липосомальные порфириновые фотосенсибилизаторы
1.2.2. Липосомальные хлориновые фотосенсибилизаторы
1.2.3. Липосомальные бактериохлориновые фотосенсибилизаторы
1.2.4. Другие липосомальные фотосенсибилизаторы
1.2.5. Липосомальные фталоцианиновые фотосенсибилизаторы
1.3.Фотосенс
Глава 2. Материалы и методы исследования
2.1. Материалы и реактивы
2.2. Клеточные линии

2.3 Экспериментальные животные и модели опухолевого роста
2.4. Приборы
2.5.Метод получения больших многослойных липосом
2.6.Метод получения малых однослойных липосом
2.7. Измерение размера липосом
2.8.Метод гель-фильтрации
2.9.Методы количественного определения фотосенса в липосомах
2.9.1.Спектрофотометрическая методика количественного определения фотосенса с использованием величины удельного показателя поглощения (Е1см1%)
2.9.2.Спектроскопическая лазерно-флуоресцентная методика определения содержания фотосенса в липосомальных наноструктурах в модельных растворах с использованием катионных производных
фталоцианинов
2.10. Исследование цитотоксической активности фотосенса в разных лекарственных формах in vitro с помощью модифицированного МТТ-теста
2.10.1. Инкубация клеток с различными лекарственными формами фотосенса
2.10.2. Оценка цитотоксического действия лекарственных форм фотосенса МТТ-тестом
2.11. Режимы введения и дозы лекарственных форм фотосенса в
исследованиях in vivo
СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
Глава 3. Разработка составов и технологии получения стерически
стабилизированной липосомальной лекарственной формы
фотосенса
3.1.Технология получения липосомальных дисперсий фотосенса
3.2.Получение больших многослойных липосом (БМЛ) фотосенса
3.3. Получение малых однослойных липосом (MOJI) фотосенса
3.3.1. Получение MOJI фотосенса экструзионным методом

3.4. Количественное определение включенного в липосомы фотосенса
Глава 4: Исследование стерическистабилизированной липосомальной лекарственной формы, фотосенса (СЛФ) для применения-в фотодинамической терапии
4.1. Изучение эффективности ФДТ с использованием СЛФ фотосенса
in vitro
4.2. Динамика накопления СЛФ в сравнении с водным раствором фотосенса на модели аденокарциномы молочной железы Са
4.3. Сравнительная эффективность фотодинамической терапии с двумя лекарственными формами фотосенса (СЛФ и водным раствором) на модели аденокарциномы молочной железы Са
4.4. Изучение накопления СЛФ в сравнении с водным раствором фотосенса на модели подкожно перевитой лимфоцитарной лейкемии Р
4.5. Сравнительная эффективность фотодинамической терапии двумя лекарственными-формами фотосенса (СЛФ и водным раствором) на модели подкожно перевитой лимфоцитарной лейкемии Р
4.6. Изучение накопления СЛФ в сравнении с водным раствором фотосенса на модели с подкожно перевитой опухолью Эрлиха
4.7. Изучение эффективности фотодинамической терапии двумя лекарственными формами фотосенса (СЛФ и водным раствором) на солидной
модели опухоли Эрлиха
Глава 5. Исследование лиофилизированной стерически стабилизированной липосомальной лекарственной формы фотосенса (СЛФ-лио)
5.1.Изучение влияния процесса замораживания на структуру липосомальной формы Фотосенса при добавлении криопротектора
5.2.Изучение влияния процесса сублимации и криопротектора (сахарозы) на структуру липосомальной формы фотосенса
5.3.Изучение фотодинамических свойств СЛФ-лио
Глава 6. Заключение
Выводы
Список литературы

Некоторые группы исследователей, на мышиной модели подкожно перевитой аденокарциномы, изучали влияние различных систем доставки фотосенсибилизаторов (солевой раствор с диметилсульфоксидом (ДМСО) и без него, эмульсии кремофора, липосомы) на проникновение АЛК и синтез РРІХ после локального применения. Еще раз, липосомальная форма АЛК показала меньшую продукцию РРІХ, чем АЛК в солевом растворе, с 10% ДМСО или без него [35, 36]. Однако, Pierre et al. для оптимизации кожной доставки разрабатали систему липосомальной доставки для АЖ с липидной композицией, схожей с бислоем клеток млекопитающих. Это липосомальная форма включала церамиды (50%), холестерин (28%), пальмитиновую кислоту (17%) и холестерил сульфат (5%). Полученные результаты показали, что доставка АЛК с помощью новой липосомальной формы вполне достаточна для лечения рака кожи [137]. Расхождение данных результатов может быть из-за различающихся липосомальных структур, размера и путей назначения, использованных в этих исследованиях.
1.2.2. Липосомальные хлориновые фотосенсибилизаторы
Эта категория липосомальных фотосенсибилизаторов в основном включает производное бензопорфирина, триметил эфир хлорина Е6 и феофорбидные фотосенсибилизаторы.
Бензопорфириновое производное моноацидного кольца A (BPD-MA, вертепорфин) включили в малые однослойные липосомы, состоящие из DMPC и яичного фосфатидилглицерола [144]. Использование этих легкоплавких липидов делает возможным быстрый выход фотосенесбилизатора в кровеносное русло, а гидрофобная природа BPD-MA способствует его связыванию с липопротеинами. Сравнение распределения липосомальной формы BPD-MA и «свободного» BPD-MA в опухолевой и нормальной ткани показало, что липосомы быстро распределяются и в нормальной и в опухолевой ткани, но, при этом быстро выводятся. ФДТ, проведенная через 3 часа после внутривенного введения, показала что, липосомальная форма BPD-MA более эффективно повреждает опухолевую