Генетические и иммунологические аспекты задержки роста плода при недонашивании беременности

• Автор: Мачарашвили, Эка Темуровна
• Шифр специальности: 14.00.01
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 100 с. : 4 ил.

СОДЕРЖАНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА I. СОВРЕМЕННЫЕ ПРЕДСТАВЛЕНИЯ О ЗАДЕРЖКЕ РАЗВИТИЯ ПЛОДА И ПРЕЖДЕВРЕМЕННЫХ РОДАХ (ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ)
1.1. Значение проблемы задержки развития плода и преждевременных родов в современной нерннатологии
1.2.Патогенез преждевременных родов и задержки развития
плода
1.3.Иммунологические аспекты нарушения развития плода и преждевременных родов
1.4.Интегрины и их роль репродукции
1.5.Апоптоз как концептуальное понятие
Заключение
ГЛАВА II. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
ГЛАВА Ш. КЛИНИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА
ОБСЛЕДОВАННЫХ ЖЕНЩИН
ГЛАВА IV. РЕЗУЛЬТАТЫ ЛАБОРАТОРНЫХ И
ФУНКЦИОНАЛЬНЫХ МЕТОДОВ ИССЛЕДОВАНИЯ
ГЛАВА V. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
УКАЗАТЕЛЬ ЛИТЕРАТУРЫ
Список условных сокращений.
a-AT — аутоантитела
ВПГ — вирус простого герпеса
ЗРП - задержка развития плода
ИППП — инфекции, передающиеся половым путем
ИФА — иммуноферментный анализ
КТГ - кардиотокография
ОБМ — основной белок миелина
ПН — плацентарная недостаточность
ПР — преждевременные роды
ПЦР - полимеразно-цепная реакция
РИА - радиоиммунный анализ
УЗИ - ультразвуковое исследование
УПБ - угроза прерывания беременности
УПР- угоза преждевременных родо
ФПС фетоплацентарная система
ЦНС — центральная нервная система
ЦМВ - цитомегаловирус
ЭЛИ-П-Тест-1 от «ELISA-detected Probability of Pathology in Pregnancy» GP Ша гликопротеид Ilia
PI пондераловый индекс
PL - AI аллель I гена GP Ilia
PL - АП аллель II гена GP 1Па

ВВЕДЕНИЕ
АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. В истории клинического акушерства и научных изысканий в данной области медицины одной из главных задач на протяжении многих лет продолжают оставаться ЗРП и преждевременные роды.
В структуре патологии перинатального периода, заболеваемости и летальности новорожденных, в настоящее время наиболее распространенной патологией является задержка развития плода (ЗРП), недонашивание, а также их сочетание. Частота ЗРП в последние годы по данным многих авторов колеблется от 3 до 18-22% у доношенных, от 18 до 24% - у недоношенных и имеет тенденцию к повышению (27,29).
Недонашивание беременности - одна из главных причин перинатальной смертности. Частота преждевременных родов остается стабильной в течение многих лет и составляет в РФ 6-12% и не имеет тенденции к снижению. Перинатальная смертность при преждевременных родах в 33 раза выше, чем при родах в срок (14,16,40,27).
Среди детей, умерших в перинатальном периоде, удельный вес недоношенных составляет примерно 50-60%. Это обусловлено незрелостью организма новорожденного, неполноценностью его адаптационных возможностей и качеством оказания неонатологической помощи (1,4,9). Недоношенность представляет серьезную социальную проблему в связи с большими трудовыми и экономическими затратами, связанными с выхаживанием этих детей, а также значительной долей их среди инвалидов детства и больных с хронической патологией.
Доклиническая диагностика недонашивания беременности не разработана, что во многом связано с отсутствием проявлений и

температуре. Пробу растворяли в 15 мкл буфера для нанесения на акриламидный гель.
Электрофорез в полиакриламидном геле
Разделение фрагментов проводили в 10 % полиакриламидном геле, который готовили на трис - боратном буфере ("Реахим"). Электрофорез проводили при 20 мА и 250 V в течение 1 часа. Краска для нанесения образцов содержала 0,25 % бромфенолового синего, 0,25 % ксиленцианола и 50 % глицерина в воде. В качестве маркера использовали плазмиду pUC 18, обработанную рестрикгазой MspI (размер фрагментов от 501 до 34 нуклеотидных пар). Размер фрагмента ДНК до рестрикционного расщепления имел длину 270 нуклеотидных пар, после расщепления фрагмент, соответствующий аллелю PL - AI - 212 нуклеотидных пар, а соответствующий аллелю PL - АП - 164 нуклеотидных пар (рис. 2). Гель окрашивали бромистым этидием или серебром ("Sigma", США).
2.4. Методика ЭЛИ-П-Тест
Забор крови проводили одноразовым капилляром из пальца пациентки в количестве 300 мкл. Затем кровь центрифугировали в течение 5 минут при 3000g. Надосадок (сыворотку) отбирали для постановки анализа и хранили при Т=+4°С не более 3 суток
Принцип работы метода состоит в следующем. В лунках стандартного 96-луночного полистиролового планшета для иммуноферментных реакции, с предварительно сорбированными антигенами 1,2,3 и 4 (ОБМ, белки S100, АСВР 14/18 и МР 65,соответственно), после добавления разведенных проб контрольной сыворотки и анализируемых сывороток и их инкубации, устанавливается равновесие между связанными и свободными регуляторными антителами и соответствующим