Научные и практические аспекты товароведной оценки качества растительных белков с применением гель-хроматографии в тонком слое

• Автор: Гурковская, Елена Александровна
• Шифр специальности: 05.18.15
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 381 с. : ил.

Оглавление и план изложения диссертации

Общая характеристика работы

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1Л. О гель-проникающей хроматографии

1ЛЛ. Колоночная и тонкослойная гель-проникающая хроматография. Сущность метода

1.1.2. Объемные соотношения в слое геля. Эффективность гель-хроматографии

1.1.3. Сродство анализируемых веществ к гелю. Гидрофильные гели

1.1.4. Определение молекулярной массы. Калибрование

1.1.5. Тонкослойная гель-хроматография. Особенности метода

1.1.6. Технология метода. Значение природы структуры сорбента

1.2. О структуре молекулы белка и понимании белковых реакций

1.2.1. Конформационные и конфигурационные переходы макромолекул белков
1.2.2. Факторы, определяющие конформационную устойчивость белков. Значение термина «развертывание»
1.2.3. Связанная вода
1.2.4. Функциональные свойства белков
1.3. Белки и их функциональные свойства. Химический состав зерна злаковых культур
1.3.1. Структура и биохимические компоненты злаков
1.3.2. Белковые характеристики злаков. Влияние белковых компонентов на качество сырья
1.3.3. Химический состав и технологические свойства злаков
1.3.4. Высокомолекулярные белки пшеницы и ржи
1.3.5. Химический состав и белковые характеристики ячменей
1.3.6. Химические методы анализа биополимеров
1.3.7. Физические и физико-химические методы
ГЛАВА 2. ОБЪЕКТЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1. Объекты исследования
2.2. Методы исследования
2.2.1. Определение молекулярных масс растительных белков методом
модифицированной ТСГХ
2.2.1.1. Методические вопросы
2.2.2. Методы выделения лейкозина, глобулина, проламина, глютелина
2.2.3. Аминокислотного состава
2.2.4. Пенообразующей способности и стойкости пены
2.2.5. Эмульгирующей емкости
2.2.6. Водопоглотительной способности
2.2.7. Изоэлектрической точки
2.2.8. Содержания витаминов
2.2.9. Минеральных веществ
2.2.10. Токсичных элементов
2.2.11. Микробиологические показатели
2.2.12. Реологические характеристики эмульсионных продуктов
2.3. Метрологическая обработка результатов
2.3.1. Метрологические исследования на основе статистической обработки
данных эксперимента
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЙ И ИХ АНАЛИЗ
3.1. Разработка методологии определения молекулярной массы растительных
белков как объективного показателя их качества
3.2. Разработка модифицированной модели процесса ТСГХ. Массообмен и
факторы, определяющие физико-химические закономерном анализа белков с учетом диффузионно-сорбционной кинетики процесса
3.2.1. Идеальная модель процесса ТСГХ
3.2.2. Реальная модель процесса ТСГХ
3.2.3. Некоторые особенности процесса ТСГХ

3.2.4. Сравнение и анализ динамики процессов ТСГХ и механического ситового разделения
3.2.4.1. Сходство и различия механического и молекулярно-ситового разделения
3.2.4.2. Особенности молекулярно-ситового процесса
3.2.4.3. Факторы, определяющие поведение молекул в слое сорбента
ГЛАВА 4. АНАЛИТИЧЕСКОЕ ОПИСАНИЕ ПРОЦЕССА ТСГХ
4.1. Особенности диффузионно-сорбционной кинетики в ТСГХ
4.1.1. Возможные частные случаи процесса
4.2. Общие закономерности формирования хроматографической зоны в процессе ТСГХ
4.3. Влияние факторов процесса на формирование хроматографической зоны в ТСГХ
4.3.1. Формирование хроматографических зон с учетом конвективного фактора в процессе ТСГХ
4.4. Исследование механизма формирования хроматографических зон на примере ПЭГ
4.4.1. Экспериментальное определение коэффициента диффузии
4.4.2. Зависимость коэффициентов диффузии от параметров процесса ТСГХ
4.4.3. Зависимость отношений осей эллипса от диффузии и сорбции в хроматографической зоне
4.4.4. Диффузионный и конвективный факторы, определяющие долевое участие в формировании хроматографической зоны
4.5. Факторы, определяющие закономерности хроматографического процесса
биополимеров
4.5.1. Механизм и особенности формирования хроматографических зон белков в ТСГХ
Заключение к главе

который определяется как объем выхода вещества, не проникающего в гранулы геля.
При определении ММ техника эксперимента практически та же, что и при колоночной гель-хроматографии. Необходимо лишь тщательно определять объемы выхода, под которыми подразумевают объем элюента, выходящего с колонки с момента нанесения на нее вещества до появления фракций с максимальной концентрацией, которой соответствует вершина пика. Точность определения объема выхода тем выше, чем больше объем колонки (слой геля). Если же поперечное сечение слишком велико, то необходимо наносить больший объем раствора исследуемого вещества (или соответственно калибровочного вещества.). Поэтому, чтобы избежать работы с большими количествами анализируемых веществ, для определения молекулярных масс, рядом авторов использовались тонкие колонки размером 2,5 х 50см и 1,1 х 200см [32,33].
Гораздо меньшие затраты на аппаратуру требуются для гель-хроматографии в тонком слое (ТСГХ) [28,33,37]. В этом случае в конце опыта вместо объема выхода необходимо измерить расстояние от стартовой линии до пятна вещества -длину пробега [34,39]. В планарном варианте гель-хроматографии, длину пробега исследуемого вещества относят к пути, пройденному хорошо идентифицированным веществом [35,57]. Для белков удается таким образом определить молекулярную массу, имея в распоряжении всего несколько микрограммов вещества [37,39,40,750]. В качестве стандартов используются белки с известной молекулярной массой. Отношение длины пробега ряда белков к пути, пройденному стандартным веществом, является линейной функцией от логарифма молекулярной массы [39,40]. Результаты определения молекулярной массы становятся более точными, если соответствующие стандартные белки наносить на каждую пластинку. Это вполне возможно, так как на пластинку шириной 200 мм свободно можно нанести по меньшей мере 10 образцов.
Благодаря несложному оборудованию и небольшим затратам вещества точность определения молекулярной массы методом ТСГХ можно повысить, многократно повторяя опыт и подвергая полученные результаты статистической