Доставка любой диссертации в формате PDF и WORD за 499 руб. на e-mail - 20 мин. 800 000 наименований диссертаций и авторефератов. Все авторефераты диссертаций - БЕСПЛАТНО
Гырылова, Светлана Николаевна
03.03.04
Кандидатская
2012
Новосибирск
96 с. : 10 ил.
Стоимость:
499 руб.
ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение
Глава 1. Обзор литературы
1.1. Современные представления о молекулярных механизмах развития меланомы кожи. Нарушения клеточной пролиферации
1.2. Нарушение регуляции апоптотической гибели клеток при меланоме кожи
1.3. Апоптоз-ассоциированный белок TSPO и применение его лигандов в экспериментальной терапии злокачественных новообразований
Глава 2. Материал и методы исследования
Глава 3. Результаты собственных исследований
3.1. Модуляция уровня TSPO в клетках меланомы лигандом TSPO
PKI 1195 и ингибитором МАРК U0
3.2. Оценка интенсивности клеточной пролиферации и апоптоза после инкубации клеток меланомы с лигандом TSPO РКП 195, ингибитором МАРК U0
3.3. Молекулярно-генетический анализ биоптатов кожи . больных
первичной меланомой для верификации мутации гена BRAF V600E
Глава 4. Обсуждение полученных результатов
Выводы
Практические рекомендации
Список литературы
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
PCNA (proliferating cell nuclear ап^еп)-ядерный антиген пролиферирующих клеток
TSPO - Translocator protein
МАРК (Mitogen activating protein kinase signaling pathway) - сигнальный каскад митоген-активированных протеинкиназ
МЕК (MAP kinase kinase) - МАРК-сигналрегулирующая киназа мРНК - матричная рибонуклеиновая кислота
РК11195 -1-(2-хлорофенил)-1Т-метил-Ы-(1-метил-пропил)-
изохинолинкарбоксамид
ПДРФ анализ - анализ полиморфизма длин рестрикционных фрагментов ПЦР - полимеразная цепная реакция УФО - ультрафиолетовое облучение
ВВЕДЕНИЕ
Актуальность проблемы
Злокачественные новообразования кожи, включая меланому кожи, в структуре всех злокачественных опухолей человека составляют более чем одну третью часть, что делает их одними из наиболее часто встречающихся типов злокачественных новообразований [Pollock P.M. et al., 2003]. Злокачественная меланома кожи, являющаяся одной из наиболее агрессивных опухолей, в Российской Федерации относится к редким видам злокачественных новообразований [Кубанова A.A. и др., 2007]. Несмотря на это, в Красноярском крае заболеваемость меланомой увеличивается, параллельно идет также увеличение показателей смертности [Гырылова С.Н., 2009]. При этом прирост данных показателей происходит интенсивно, уровень смертности в Красноярском крае приближается к соответствующим показателям стран с наиболее высокими показателями заболеваемости. Все это позволяет расценивать меланому кожи как важную медико-социальную проблему, которая наносит невосполнимый экономический ущерб обществу.
Меланома кожи является не только клинически разнородной опухолью, классифицирующейся на различные клинические и гистологические варианты. По современным данным меланома характеризуется изначально молекулярным и генетическим разнообразием, определяющим клинический полиморфизм, а также особенности течения заболевания.
Пролиферация меланоцитов, выживание, дифференцировка и миграция являются важнейшими элементами нормальной физиологии кожи. Как показывают последние исследования, одним из ключевых изменений, происходящих при развитии меланомы кожи, является мутагенная активация сигнального каскада митоген-активированных протеинкиназ (МАРК).
United Kingdom) с диаминобензидином в качестве хромогена. В дальнейшем образцы докрашивали гематоксилином. Подсчёт результатов
иммуноцитохимического анализа проводили путем подсчета положительно окрашенных клеток при увеличении х400 с помощью микроскопа Olympus ВХ-41. Определялся процент положительно окрашенных клеток на 100 клеток.
Оценка уровня апоптоза
Выраженность апоптоза оценивалась с помощью окраски акридиновым оранжевым/бромистым этидием (АО/ЕВ) (Gerbu Biothechnick GmbH, MP Biomedicals Inc.) согласно Ribble D., 2005 [Ribble D. et al., 2005]. Определялся процент апоптотических клеток с ядром, окрашенным (полностью или фрагментарно) в оранжевый цвет. Ядра живых клеток окрашивались в зеленый цвет. Визуализация проводилась с помощью флюоресцентного микроскопа Primo Star (Carl Zeiss Microimaging GmbH), подсчитывалось число
апоптотических клеток на 100 визуализируемых клеток.
2.4. Молекулярно-генетические методы исследования
Выделение ДНК
Для определения полиморфизма гена BRAF V600E в качестве материала использовались гистологические срезы меланомы кожи, которые были получены от 47 пациентов, находящихся на стационарном лечении после хирургического иссечения опухоли в КГУЗ «Красноярский краевой
онкологический диспансер им. А.И. Крыжановского» с диагнозом
злокачественная меланома кожи (рубрика С43) в соответствии с МКБ-10. Из 47 пациентов 29 было женского, 18 мужского пола. Средний возраст женщин составил 53 [ДИ 95%, 47,75-59,25] года, мужчин 55 [ДИ 95%, 48-62,5] лет.
Название работы | Автор | Дата защиты |
---|---|---|
Морфологические особенности хрящевой ткани ушной раковины и ее строения в различные возрастные периоды человека | Пяткова, Екатерина Владимировна | 2014 |
Цитоскелет как система путей внутриклеточного транспорта в клетках животных | Бураков, Антон Владимирович | 2014 |
Миграция лейкоцитов и способы ее регуляции при атеросклерозе | Арефьева, Татьяна Игоревна | 2013 |