Роль нормальной микрофлоры и лизоцима в выборе пробиотических штаммов для профилактики аллергических заболеваний у студенческой молодежи Севера

• Автор: Куяров, Артём Александрович
• Шифр специальности: 03.02.03, 03.01.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2015
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 129 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
Введение
Глава 1. Роль нормальной микрофлоры и лизоцима в выборе пробиотических штаммов для профилактики аллергических заболеваний у студенческой молодежи (обзор литературы)

1.1. Значение микробиоценоза и лизоцима в механизмах врождённого иммунитета

1.2. Биологическое значение лактобацилл

1.3. Микробный фактор образования свободного гистамина

1.4. Подбор пробиотических штаммов лактобацилл

Глава 2. Диагностическая информативность факторов врождённого иммунитета у бактерионосителей Staphylococcus spp.
2.1. Оценка содержания лизоцима и гистамина в слюне бактерионосителей Staphylococcus spp.
2.2. Биоценоз слизистой оболочки носа и зева, содержание лизоцима и гистамина в группах риска аллергического ринита и атопического дерматита
2.3. Диагностическая информативность факторов колонизации микрофлоры слизистой носа и зева
Глава 3. Идентификация и лизоцимная активность лактобацилл при дисбактериозе кишечника в группах риска по аллергическим заболеваниям
3.1. Микробное сообщество и видовой состав лактобацилл при дисбактериозе кишечника
3.2. Лизоцимная активность бактерий рода Lactobacillus, выделенных из кишечника исследуемых лиц группы риска по аллергическим заболеваниям
Глава 4. Оптимизация выбора пробиотических штаммов лактобацилл для студенческой молодежи в условиях Севера
4.1. Кислотообразующая и сахаролитическая активность пробиотических штаммов рода Lactobacillus
4.2. Диаминооксидазная, лизоцимная и антагонистическая активность пробиотических штаммов рот Lactobacillus
4.3. Коррекция нарушений нормальной микрофлоры с использованием пробиотических штаммов лактобацилл
Заключение
Выводы
Практические рекомендации
Перспективы дальнейшей разработки темы
Список сокращений
Список литературы

ВВЕДЕНИЕ
Актуальность темы исследования
Среди базовых защитных систем, определяющих устойчивость человека к неблагоприятным физическим, химическим, биологическим факторам среды обитания или их комплексу, в последнее время наибольшее внимание уделяют его иммунной системе и симбиотической микробиоте, постоянно обитающей на коже и слизистых [3, 8, 53, 61].
Эти две системы находятся между собой во взаимовыгодных взаимоотношениях. Нарушение их согласованной работы обязательно влечет за собой не только модификацию функций и реакций каждой из них, но и негативно отражается на общей эффективности защиты организма [40, 60, 70].
Микроорганизмы, попадающие в организм извне, и представители инди-генной (симбиотической) микробиоты, контактируя с образраспознающими рецепторами эпителиальных и иммунокомпетентных клеток, в частности, с То11-подобными рецепторами, индуцируют в клетках продукцию широкого спектра различных медиаторов, включая провоспалительные и противовоспалительные цитокины [16, 70]. Их количество и соотношение, в конечном счёте, ответственны за развитие инфекционно-воспалительных заболеваний или за элиминацию возбудителя из очага внедрения [58, 72].
Длительное проживание в неблагоприятных условиях урбанизированного Севера ведёт к глубоким нарушениям микробной экологии и иммунитета человека. Это способствует возникновению у некоренных жителей Севера хронического воспаления, одного из ведущих факторов риска инфекционных, аллергических, хронических аутоиммунных и метаболических заболеваний [51, 57]. По данным ряда исследований, частота аллергического ринита [77], атопического дерматита [13], бронхиальной астмы [79] среди пришлого населения Севера намного выше, чем у лиц, проживающих в центральных областях Российской Федерации [135]. Особенно актуальна эта проблема для здоровья в юношеском возрасте, в период онтогенетического развития между подростковым возрастом и взрослостью [74, 88, 134].
При оценке микроэкологических последствий неблагоприятных факторов урбанизированного Севера на здоровье студенческой молодежи считаем целесообразным определять уровень стафилококкового бактерионосительства в популяции жителей Севера, поскольку изменения количества этих микроорганизмов или их биологических и патогенных свойств могут рассматриваться как показатели, позволяющие тестировать интенсивность внешнего воздействия на гомеостатическое состояние человека [19, 34, 80].
Имеются данные о способности микрофлоры не только изменить пул гистамина в организме человека [23], но и продуцировать ферменты инактивирующие лизоцим [19]. Важным, с нашей точки зрения, является также оценка содержания гистамина, как медиатора воспалительных и аллергических реакций [31, 109], и лизоцима, как фактора врождённого иммунитета у студентов, страдающих аллергическими заболеваниями, так и не имеющих их.
Вопросы профилактики и коррекции нарушений микрофлоры организма человека в настоящее время приобретают повсеместный характер [63, 75, 81, 92, 144]. При этом важное значение всё более придают пробиотикам, способным восстанавливать нарушенный микроэкологический статус человека и повышать степень иммунной защиты [2, 5, 27, 145].
Необходимость изучения влияния потенциала патогенности микрофлоры слизистой оболочки носоглотки и кишечника на взаимосвязь факторов врождённого иммунитета, одним из которых является лизоцим, с медиатором воспалительных и аллергических реакций гистамином для оптимизации выбора пробиотических штаммов и препаратов определяет актуальность избранной темы.
Степень разработанности темы исследования
Пробиотики находят всё более широкое применение в медицинской практике для профилактики и лечения различных заболеваний, связанных с нарушением микрофлоры организма человека [3, 5, 27, 145, 158].
В работах отечественных и зарубежных исследователей показано, что общий геном бактерий, обнаруженных в ЖКТ, получивший обозначение как «мик-

Молочнокислые бактерии являются важной составляющей нормальной микрофлоры пищеварительного тракта [42]. Лактобактерии, хотя и не являются доминирующими микроорганизмами кишечной микрофлоры, однако выделяются в значительном количестве из различных отделов кишечного тракта. Такие бактерии, как Lactobacillus acidophilus, L. salivarius, L.fermentum, L. plantarum, L. casei, L. reuteri, L. gasseri, L. crispatus являются представителями лактобацилль-ной микрофлоры человека. В толстом кишечнике здоровых взрослых людей преобладают L. brevis (28%), L. plantarum (19%), L. acidophilus (12%), L. cellobiosus (9,5%), L. casei (9,5%) [21,42, 73, 167].
Одним из наиболее известных биологических свойств лактобацилл является выраженная способность к продукции молочной кислоты. Активность кислотооб-разования зависит от состава питательной среды и условий культивирования. Считают, что только Ь+-изомер молочной кислоты является биологически активной формой, которая быстро и целиком утилизируется организмом человека [35, 193].
Lactobacillus spp. проявляют антагонизм по отношению к грамотрицатель-ным бактериям за счёт образования молочной кислоты, а антагонистическая активность по отношению к грамположительным бактериям связана с продукцией бактерицинов [21, 36, 66, 192].
Культуры L. casei, проявляют высокую степень антагонистической активности по отношению к S.flexnerii, В. subtilis, E. coli [116]. В отношении S. aureus и S. typhimurium выявлена вариабельность. У исследуемых L. casei не выявлено связи между высокой степенью антагонизма и образованием молочной кислоты к грамотрицательным бактериям. Механизм действия лактобацилл к данной группе микроорганизмов определяется воздействием не только молочной кислоты, но и других факторов [116].
Наряду с описанием действия одного из бактерицидных факторов, подчеркивается необходимость оценки целого ряда биологически активных соединений, которые продуцируются лактобациллами, таких как молочная кислота, которая угнетает рост патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, лизо-цим, бактерицидные вещества [131, 142].