Антибактериальное действие пептидных компонентов гемолимфы личинок Galleria Mellonella в условиях специфической и неспецифической индукции

• Автор: Костина, Динара Александровна
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2015
• Место защиты: Самара
• Количество страниц: 162 с. : ил.

Оглавление

Оглавление
введшие

ГЛАВА 1. ОИЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Строение и классификация антибактериальных пеп тидов

1.2. Мехашгш действия антибактериальных пептидов

1.3. Механизмы устойчивос ти к антимикробным пептидам

1.4.Синтез антибактериальных пептидов З

1.4. Исторический очерк применения -экстрактов ич Galleria 33 mellonella

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛГ.ДОВА1 ІИЯ
2.1. Характеристика объекта исследования - восковой моли 40 (Galleria mellonella)
2.2. Получение экстрактов ич личинок большой восковой моли
2.3. Индуцирование проичводства пептидов личинками Galleria 43 niellonella, получение гемолимфы, очисікл и фракционирование
2.4. Метод определения антибактериальной активности 48 пептидных фракций гемолимфы
2.5. Морфологическая и биохимическая характеристика тестовых 49 микрооргани змов Escherichia coli и Bacillus cercus
2.6. Методы определения ферментативной активности клеток 52 Escherichia coli
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТА ТЫ ГІССЛГ.ДОВА11ИІ1 II ИХ
ОЬСУЖДНІІИЕ
3.1 .Изучение антибактериальной активности спиртовых
же грак ІОВ личинок восковой моли
3.2.Исследование антибак і ериалыюй активности пептидных
компонентов гемолимфы личинок Galleria niellonella, полученных
после введения куль туры клеток Pseudomonas aerugenosa
3.3. Исследование антибактериальной активности пептидных компонентов гемолимфы личинок Galleria mellonella, полученных после введения культуры клеток Escherichia coli
3.4.Исследование антибактериальной активности пептидных компонентов гемолимфы личинок Galleria mellonella, полученных после введения смеси культур Escherichia coli и Bacillus cere us
3.5. Исследование антибактериальной активі гости пептидных компонентов гемолимфы личинок Galleria mellonella, полученных после введения ксенобиотика 1,1 -диметилгндразима (підрайон)
3.6.Исследование влияния пептидных компонентов гемолимфы личинок Galleria mellonella па ферментативную активность Escherichia coli
ЗАКЛЮЧЕНИЕ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
Приложение А. Значения вон задержки роста Escherichia co/i па
плотной среде вокруг дисков, пропитанных фракциями
гемолимфы личинок восковой моли, индуцированных культурой Escherichia co/i
Приложение В. Значения зон задержки роста Bacillus cereus на плотной среде вокруг дисков, пропитанных фракциями
гемолимфы личинок восковой моли, индуцированных культурой Escherichia coli
Приложение Г?. Значения зон задержки роста Escherichia coli на плотной среде вокруг дисков, пропитанных фракциями
гемолимфы индуцированных и интактных личинок восковой моли Приложение Г. Значения зон задержки роста В. cereus па плотной среде вокруг дисков, пропитанных фракциями гемолимфы индуцированных и интактных личинок восковой моли

Приложение Д. Молекулярные массы пешидных компонентов,
обнаруженных в составах фракций В'УЖХ іемолимфьі интактных и индуцированных личинок восковой моли
І Іриложеине Г.. Значения зон задержки роста Escherichia co/i на
плотной среде вокруг дисков, пропитанных фракциями гемолимфы личинок, индуцированных гидразоном
1 Іриложеине Ж. Значения зон задержки роста В. cereus па плотной 146 среде вокруг дисков, пропитанных фракциями гемолимфы личинок, индуцированных і идразопом
Приложение И. Спектр фракции №2-6 гемолимфы Galleria
mellonella larvae, индуцированных гидразоном
Приложение К. Спектр фракции №6-8 гемолимфы Galleria
mellonella larvae, индуцированных гидразоном
Приложение JI. Спектр фракции №8-10 гемолимфы Galleria
mellonella larvae, индуцированных гидразоном
Приложение М. Спектр фракции №10-12 гемолимфы Galleria
mellonella larvae, индуцированных гидразоном
Приложение П. Спектр фракции №12-14 гемолимфы Galleria
mellonella larvae, индуцированных гидразоном
1 Іриложеине 11. Спектр фракции №14-16 гемолимфы Galleria
mellonella larvae, индуцированных гидразоном
І Іриложеине Р. Спек і р фракции №16-18 гемолимфы Galleria
mellonella larvae, индуцированных гидразоном
Приложение С. Спектр фракции №18-20 гемолимфы Galleria
mellonella larvae, индуцированных гидразоном
1 Іриложеине Т. Спектр фракции №20-22 гемолимфы Galleria
mellonella larvae, индуцированных гидразоном
Приложение У. Спектр фракции №22-24 гемолимфы Galleria
mellonella larvae, индуцированных гидрантом
1 Іриложеине Ф. Спектр фракции №24-26 гемолимфы Galleria

свойств экстракта установлено, что препарат не лает побочных эффектов, малотоксичеп, активен и стабилен при храпении.
Научение свойств препарата на основе экстракта личинок большой восковой моли продолжается и в настоящее время (Сидоренко, 2003).
Данный препарат включен в государственную программу поиска новых
лекарственных средств, влияющих на иммунитет. Программу координирует РАМН. Ведутся рабсил в Институте теоретической и экспериментальной биофизики Российской академии паук (Литвинова и др., 2006).
В лаборатории МЛ I. Кондратовен (ИТЭб РА[ I г. 11уишио) в настоящее время проводятся исследования спектра действия лото старинного лекарственного препарата. Современные клинические наблюдения
подтверждают высокую лечебную эффективность препарата при туберкулезе (Спиридонов, 1990; Дмитриева, 1993; Рачков и др., 2000; Ovsepyan, 2001).
Экстракты содержат полезные биолот ически важные компоненты: флавопоиды, нуклеотиды, нуклеоэиды, аминокислоты, сахара,
ненасыщенные и насыщенные жирные кислоты, высокомолекулярные конъюгаты пептидов, углеводов, и ароматических соединений, ацетилхолин, микроэлементы, в том числе К, Mg, Zn, Си, Mil, Se, С г, Mo, Со, Se. Это обусловлено тем, что личинка восковой моли питается исключительно биоактивными продуктами пчеловодства (Spiridonov et al., 1992).
Пролип, аснаргиповая и глутаминовая кислоты, лизин, гистидин, содержащиеся в составе гемолимфы, обладают терапевтическим эффектом, так как эти амипокислоiы необходимы для сшпева гормонов и ферментов (Сидоренко, 2003).
Спиридонов II.А. установил, что экстракты восковой моли содержат факторы, стимулирующие регенерацию нейритов и рост культур лимфобластоидных клеток. Также эксiракш содержат щелочную сериповую протеазу, которая является пищеварительным ферментом и локализуется в кишечнике личинок Galleria meUoneUa (Спиридонов, 1990).