Про- и антиапоптотическое действие нейролипинов на трансформированные и нормальные клетки нервной системы

• Автор: Андрианова, Екатерина Львовна
• Шифр специальности: 03.01.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 114 с. : ил.

Оглавление
Список сокращений
Введение
Обзор литературы
Введение
Краткая характеристика нейролипинов
Этаноламиды жирных кислот
Ацшшшцерины
АА-Ст1у
АА-БА
Влияние нейролипинов на нейрогуморальную регуляцию
Системы биосинтеза нейролипинов
Инактивация нейролипинов
Каннабиноидные рецепторы
Ванилоидные рецепторы
Ко-экспрессия каннабиноидных и ванилоидных рецепторов
Заключение
Проапоптотическое действие нейролипинов на трансформированные клетки нервной
системы
Нейропротективное действие нейролипинов
Заключение
Материалы и методы
Используемые вещества
Используемые культуры клеток и их культивация
Выделение и культивирование гранулярных нейронов мозжечка крысы
Используемые методики оценки изменения количества клеток в образцах
Оценка выживаемости клеток в культуре с помощью МТТ-теста
Метод оценки количества клеток в образце прямым подсчетом в присутствии
красителя трипанового синего
Тестирование активности нейролипинов на культурах клеток
Оценка токсичности в культурах трансформированных клеток С6 и 11251
Оценка активности каспаз на фоне действия нейролипинов
Оценка нейропротективного действия в модели К+ - депривации
Оценка нейропротективного действия в модели глутаматной токсичности
Органотпичские куьтуры ткани гиппокампа 50
Использование методов флуоресцентной микроскопии
Окраска клеток пропидиумом иодидом (Р1)
Оценка морфологических изменений в клетках глиомы крысы С6 на фоне действия
нейролипинов
Статистический анализ
Результаты и обсуждения
Введение

Проапоптотическое действие нейролипинов
Цитотоксическое действие аналогов 2-арахидоноилглицина
Цитотоксическое действие аналогов 2-арахидоноилглицерина
Цитотоксическое действие аналогов Ы-арахидоноилдофамина- ацилированных
производных биогенных аминов
Токсическое действие нейролипинов на клетки глиомы Ш51
Механизм цитотоксического действия нейролипинов
Действие нейролипинов на нормальные клетки нервной системы крысы
Заключение
Нейропротективное действие нейролипинов
Нейропротективное действие нейролипинов в модели К+ -депривации
Механизмы нейропротсктивноего действия нейролипинов в модели К.''-депривации

Нейропротективное действие нейролипинов в модели глутаматной токсичности .87 Механизм нейропротективного действия нейролипинов в модели глутаматной
токсичности
Заключение
Заключительные замечания
Выводы
Список литературы

Список сокращений
АА — арахидоновая кислота
СаМКП - кальмодулинзависимая киназа II CBR - каннабиноидный рецептор DHA — докозагексаеновая кислота
ERK - киназа, регулируемая внеклеточными факторами (extracellular-regulated kinase)
FA АН - гидролаза амидов жирных кислот FAK - focal adhesion kinase FBS — fetal bovine serum
JNK — стресс-активируемая протеинкиназа (stress-activated protein-kinase/c-Jun N-terminal kinase)
Met-F-AA-EA - 2-метиларахидоноил-2-фторэтаноламид
MMP — матричная металлопротеиназа
NGF — фактор роста нервов
NMDA - N-метил-О-аспартат
NOS — NO-синтаза
PBS — фосфатно-солевой буфер
РГР2 — фосфатидилинозит-3,4-бисфосфат
РКС — протеинкиназа С (кальций-зависимая протеинкиназа)
PLC — фосфолипаза С
SPT — серинпальмитоилтрансфераза
TRP V1 — ванилоидный рецептор
VEGF — фактор роста эндотелия сосудов
СОХ-2 - циклооксигеназа
АКТЕ - адренокортикотропный гормон
ГАМК - у-аминомасляная кислота
КГД — кислородно-глюкозная депривация
ТГК — Д9-тетрагидроканнабинол

Нейропротективное действие нейролипинов
Проблемы нейродегенерации, связанные с различными патологическими состояниями мозга, такими как ишемия, воспаление, онкологические процессы, занимают одно из центральных мест в современной медицине и являются предметом широкомасштабного мультидисциплинарного исследования. Несмотря на то, что в последнее время эта область переживает период интенсивного изучения, характеризующийся появлением новых данных, как о механизмах процессов, так и о возможностях их модулирования, к сожалению, большинство проблем далеки от полного понимания.
Установлено, что одним из основных факторов ишемического повреждения нейронов центральной нервной системы является нарушение глутаматэргической передачи. Именно с массированного выброса глутамата начинается каскад патологических событий, приводящих к гибели клеток. Следствием гиперактивации глутаматных рецепторов является накопление в нейронах ионов кальция, прежде всего, в результате их усиленного поступления через ионные каналы, управляемые этими рецепторами. При этом концентрация ионов кальция в клетке достигает 30 мкМ, в то время как нормальная концентрация составляет 70 нМ [157]. Повышение концентрации внутриклеточного кальция приводит к активации киназных каскадов и активации фосфолипаз, что впоследствии инициирует синтез индукторов воспаления и образование свободных радикалов. Финалом вышеописанных событий является развитие апоптоза и гибель клетки. Во время развития этого патологического каскада область первоначального повреждения значительно увеличивается. Ряд исследований показали, что нейролипины могут защищать клетки нервной системы от различных повреждений. Каннабиноидно-ванилоидная система