Выявление мутаций в генах K-ras, B-raf и APC при некоторых онкологических заболеваниях

• Автор: Вдовиченко, Константин Константинович
• Шифр специальности: 03.00.15
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2006
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 200 с. : ил.

Список сокращений
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Нарушения внутриклеточной сигнальной трансдукции как
основа злокачественного роста
1.2. RAS-сигнальный каскад
1.3. Ras: ГЕНЫ и БЕЛКИ
1.3. 1. Ras-семейства
1.3.2. Ras-гены и белки в клетках млекопитающих
1.3.3. Активация Ras-белков и трансформирующие свойства
1.3.4. Различия между Н-, К- и N-Ras
1.4. Регуляторы сигнального Ras-каскада
1.5. Белки - мишени Ras
1.6. Raf
1.7. WNT-сигнальный каскад
1.8. Нарушения в генах K-ras, Braf и APC при некоторых онкологических заболеваниях
1.8.1. Ген K-ras
1.8.2. Ген B-raf
1.8.3. Ген ЛЕС
1.9. Нуклеиновые кислоты крови
1.10. Адресная терапия (таргет-терапия)

ГЛАВА 2. Материалы и методы
2.1. Распределение обследуемых лиц по группам и
характеристика изучаемых биологических образцов
2.2. Забор крови
2.3. Режимы центрифугирования
2.4. Выделение ДНК из биоматериала
2.5. Полимеразная цепная реакция (ПЦР):
ГЕН K-ras
ГЕН B-raf
ГЕН АРС
2.6. Электрофорез в полиакриламидном геле (ПААГ)
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. Ген ЛГ-ras
3.1.1. Оптимизация условий проведения обогащенной ПЦР
для выявления мутаций в 12-ом кодоне гена K-ras
3.1.2. Специфичность ПЦР гена K-ras с мутациями в 12-м кодоне
и характер точковых мутаций
3.2. Ген B-raf
3.2.1 Оптимизация условий электрофореза при оценке
дефектов гена B-raf
3.3. Ген Л PC
3.3.1. Специфичность ПЦР
3.3.2. Оптимизация условий электрофореза
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
ПРИЛОЖЕНИЕ 1

хотя в увеальных меланомах уровень его активности увеличен по сравнению с таковым в нормальной сетчатке или увеальных клетках [152-155]. Полученные данные подчеркивают различие между кожными и окулярными меланомами и дают основание предполагать, что ингибиторы В-гаР-киназы будут неэффективными при лечении окулярных меланом.
В 2003 году в литературе появились сообщения о том, что мутация У599Е в гене В-га(часто происходит в опухолях щитовидной железы. Так, в работе [167] авторы исследовали различные опухоли, в том числе и 35 папиллярных карциномы щитовидной железы, и обнаружили в 24 образцах опухолей щитовидной железы мутацию (69%), приводящую к замене У599Е в гене В-га/. Важным фактом является то, что такая мутация характерна только для папиллярных карцином щитовидной железы и не встречается при других поражениях органа, в частности, при нодулярных зобах, фолликулярных аденомах и карциномах [168-171]. Также обращает на себя внимание то, что такая мутация не происходит вместе с мутациями в Яаэ-генах одновременно [170, 172]. У мужчин в папиллярных карциномах щитовидной железы эта мутация встречается со значительно большей частотой, чем у женщин [170].
Авторы работы [124] оценили встречаемость мутаций в генах В-га/ и К-газ в 330 образцах колоректальных опухолей. Из 32 мутаций (10%), выявленных в гене В-га/ 28 были заменами У599Е, и авторы показали, что мутации являлись соматическими. Ни один из образцов не обнаружил наличие мутаций сразу в двух генах К-газ и В-га/ Есть и другие работы в