Топография и функция остатков цистеина в ДНК-зависимой РНК-полимеразе Е.coli

• Автор: Селюченко, Ольга Александровна
• Шифр специальности: 02.00.10
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1985
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 111 c. : ил

1. ХИМИЧЕСКАЯ МОДИФИКАЦИЯ РШ1-ПОЛИМЕРАЗЫ Е. coli И ЕЕ ИСПОЛЬЗОВАНИЕ В ИЗУЧЕНИИ ПРОЦЕССА ТРАНСКРИПЦИИ

1.1. РНК-полимера.за. - ключевой фермент процесса транскрипции

1.1.1. Связывание с матрицей

1.1.2. Инициация синтеза РНК

1.1.3. Элонгация цепи РНК

1.1.4. Терминация транскрипции

1.2. Роль SH -групп РНК-лолимера,зы в процессе транскрипции

1.3. Химическая модификация ряда, функционально важных аминокислотных остатков РНК-полимера
1.3.1. Модификация остатков лизина, как подход к изучению каталитического центра, фермента

1.3.2. Роль остатков аргинина, и гистидина в РЩ-полимеразе

2. РЕЗУЛЬТАТЫ И ИХ ОБСУЖДЕНИЕ

3. ЭКСПЕРНЖНТАЛЫШ ЧАСТЬ
3.1 Материалы
3.2 Выделение и характеристика, субъединиц РНК-поли-меразы
3.3. Определение аминокислотной последова.тельности пептидов
3.4. Химическая модификация РНК-полимера.зы
4. ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

Одним из основных процессов передали генетической информации является процесс транскрипции, глубокое изучение которого позволяет решить многие важнейшие проблемы биологии, например, такие, как индивидуальное развитие, клеточная дифференцировка., взаимоотношение с внешней средой, а также откроет широкие перспективы в борьбе со многими инфекционными и наследственными заболеваниями.
Многостадийноеть процесса транскрипции определяет сложность структуры катализирующего его фермента РНК-полимераза E. coli - сложный белок, состоящий из пяти субъединиц: двух идентичных АО -субъединиц ( Мг 36500 ), J, - и ^'-субъединиц ( ß|. 150000 и
155000 ) и фактора инициации d ( М 70000 ).
Во многих лабораториях в нашей стране и за. рубежом проводятся исследования ДЕЖ-зависимой РНК-полимеразы и процесса, транскрипции в целом. В настоящее время охарактеризована каждая стадия транскрипции, выяснена структура сигнальных участков нуклеиновых кислот, используемых для регуляции транскрипции, получена обширная информация о свойствах фермента., а. также определена, первичная структура всех субъединиц РНК-полимеразы е. coli . Однако, сам механизм синтеза. РНК остается невыясненным. В частности, практически ничего не известно о том, какие аминокислотные остатки РНК-полимеразы участвуют в каталитическом процессе, какие - взаимодействуют с субстратами, матрицей и РНК-продуктом, т.е. какова, структура, активных центров фермента.. Знание первичной структуры фермента открывает широкие перспективы .для более детального изучения механизма функционирования ДНК-за,висимой РНК-полимеразы Escherichia coli.

Настоящая работа является частью структурно-функциональных исследований ДНК-зависимой РНК-полимеразы е. coli.
В задачу работы входило изучение роли остатков цистеина РНК-полимеразы е. coli на, различных этапах процесса, транскрипции, локализация функционально важных остатков цистеина., принимающих участие в образовании активных центров фермента, а также выяснение пространственной топографии остатков цистеина РНК-полимеразы E. coli.