Нейроиммуномодулирующее действие антител к глутамату и ГАМК на эпилептическую активность : экспериментальное исследование

• Автор: Кузнецова, Лада Владимировна
• Шифр специальности: 14.03.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 163 с. : ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

ВВЕДЕНИЕ

Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Роль глутамата и его рецепторов в эпилептогенезе

1.2. Роль ГАМК и ее рецепторов в эпилептогенезе

1.3. Роль нейроиммунологических факторов в патогенезе эпилепсии

Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ

2.1 Модели эпилептической активности

2.1.1. Острые генерализованные судороги

2.1.2. Хроническая эпилептизация мозга — фармакологический пентилентетразоловый киндлинг
2.1.3 Фокальная эпилептическая активность
2.2. Иммунологические методы исследования
2.2.1. Методсинтеза конъюгированных антигенов
2.2.2. Метод получения антител к глутамату и ГАМК
2.2.3. Метод выявления аутоантител к нейромедиаторам
в сыворотках крови экспериментальных животных
2.3. Активная иммунизация конъюгатом глутамат-бычий сывороточный альбумин
2.4. Внутрибрюшинное введение очищенных антител
к глутамату и ГАМК
2.4.1. Влияние очищенных антител к глутамату и ГАМК на острые генерализованные судороги
2.4.2. Влияние очищенных антител к глутамату и ГАМК
на развитие хронической эпилептизации мозга

2.5. Интраназалыюе введение очищенных антител
к глутамату
2.5.1. Влияние очищенных антител к глутамату на острые генерализованные судороги при их интраназальном
введении
2.5.2. Влияние очищенных антител к глутамату на фокальную эпилептическую активность при их интраназальном введении
2.6. Статистическая обработка данных
РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
Глава 3.
Аутоантитела к глутамату и ГАМК в динамике развития хронической эпилептизации мозга (пентилентетразолового
киндлинга)
Глава 4.
Эффекты активной иммунизации конъюгатом глутамат-бычий сывороточный альбумин у мышей разных генетических линий на
острые генерализованные судороги
Глава 5.
Внутрибрюшинное введение очищенных антител к глутамату и ГАМК
5.1. Влияние очищенных антител к глутамату при их внутрибрюшинном введении на острые генерализованные судороги
5.1.1. Определение дозозависимого эффекта очищенных антител к глутамату при га внутрибрюшинном введении у мышей
С57В1/6

5.1.2. Определение продолжительности действия очищенных антител к глутамату при их внутрибрюишнпом введении мышам С57В1/6 в дозе 25 мг/кг
5.2. Влияние внутрибрюшшшого введения очищенных антител
к ГАМК на острые генерализованные судороги
5.2.1. Определение дозозависимого эффекта очищенных антител к ГАМК при их внутрибрюишнпом введении у мышей С57В1/6
5.2.2. Определение продолжительности действия антител к ГАМК при их внутрибрюшинном введении мышам С57В1/6
5.3. Влияние очищенных антител к нейромедиаторам на развитие хронической эпилептизации мозга (пентилентетразолового киндлинга)
5.3.1. Влияние очищенных антител к нейромедиаторам на латентный период появления первых судорог и тяжесть судороэ/сной реакции
5.3.2. Влияние внутрибрюшинного введения очищенных антител к глутамату на острую судорожную реакцию мышей С57В1/6, подвергшихся пентилентетразоловому киндлингу
Глава 6.
Интраназальное введение очищенных антител к глутамату
6.1. Влияние очищенных антител к глутамату при их интрапазальном введении на острые генерализованные судороги
6.2. Сравнительный анализ противосудорожной эффективности антител к глутамату при разных способах введения
6.3. Влияние интраназального введения очищенных антител
к глутамату на фокальную эпилептическую активность

Ранее аутоимунные процессы при эпилепсии связывали с наличием специфических антител к субъединице GluR3 глутаматных рецепторов АМРА-типа, обнаруживаемые в сыворотке и СМЖ больных энцефалитом Рассмусена - прогрессирующей эпилептической энцефалопатии неизвестной этиологии. Энцефалит Рассмусена первично затрагивает только одно полушарие мозга, характеризуется резистентными фокальными судорогами, прогрессирующим неврологическим дефицитом и ослаблением интеллекта (Rasmussen Т., 1958). Большинство пациентов с энцефалитом Рассмусена не чувствительны к действию антиэпилептических препаратов (АЭП). Предположение, что развитие энцефалита Рассмусена может быть результатом аутоимунных процессов, в особенности, выработки специфических антител к GluR3 базировались на данных, полученных Rogers и соавторов в 1994 году: у 2-х из 5-ти кроликов, иммунизированных внеклеточным доменом GluR3245-457, развивались судороги, а при вскрытии были обнаружены гистопатологические признаки подобные энцефалиту Рассмусена. У некоторых пациентов с энцефалитом Рассмусена благотворный эффект оказывали повторный плазмаферез (Andrews P.I. et al., 1996) или иммуноглобулиновая иммуносорбция (Antozzi С. et al., 1998). При этом уменьшение частоты судорог и улучшение неврологических функций коррелировали со снижением титра антител к GluR3. Однако более поздние исследования показали, что антитела к GluR3 не являются специфическими для энцефалита Рассмусена, так как обнаруживаются далеко не у всех больных с этим заболеванием (Wiendl Н. et al., 2001; Watson R. et al., 2004).
Патологическая роль антител к GluR3 до сих пор не достаточна ясна. Ряд исследований показал, что сыворотка животных, иммунизированных GluR3 фрагментом, может проявлять свойства подобные агонистам глутамата (Levite М. et al., 1999). Антитела к GluR3B372.395 (короткий аминокислотный внеклеточный фрагмент), полученные от мышей, и АТ к