Мутации митохондриального генома лейкоцитов крови при атеросклерозе сонных артерий и ишемической болезни сердца у человека

• Автор: Желанкин, Андрей Викторович
• Шифр специальности: 14.03.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 129 с. : ил.

Список сокращений
с!АТР - аденозилтрифосфат
с!СТР - цитозилтрифосфат
сЮТР - гуанозилтрифосфат
dNTPs - дезоксирибонуклеотидилтрифосфаты
сГГТР - тимидилтрифосфат
МС> - бидистилированная вода высокой степени отчистки ЫАО! I - никотинамидадениндинуклеотидфосфат - додецилсульфат натрия ТВЕ - трис-борат-ЭДТА буфер АГ - артериальная гипертония АТФ - аденозинтрифосфат ГКМП - гипертрофическая кардиомиопатия ДНК - дезоксирибонуклеиновая кислота ИБС - ишемическая болезнь сердца ИМС - интимо-медиальный слой
ИМС ОСА - интимо-медиальный слой общей сонной артерии
ЛПВП - липопротеиды высокой плотности
ЛГШП - липопротеиды низкой плотности
ЛПОНП - липопротеиды очень низкой плотности
мтДНК - митохондриальная ДНК
РТР - недостоверные различия
ПДРФ - полиморфизм длин рестрикционных фрагментов
ПЦР - полимеразная цепная реакция
рРНК - рибосомальная рибонуклеиновая кислота
ССЗ - сердечно-сосудистые заболевания
ТИМС - толщина интимо-медиального слоя
тРНК - транспортная рибонуклеиновая кислота
ЭДТА - этилендиаминтетраацетат
СОДЕРЖАНИЕ
ВВЕДЕНИЕ
Е ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 .Общие представления об атеросклерозе
1.2.Механизмы развития атеросклероза
1.3.ИБС как основное клиническое проявление атеросклероза
1.4.Заболевания, сопутствующие развитию атеросклероза и
увеличивающие риск ИБС
1.5.Еенетические факторы риска атеросклероза и ИБС
1.6.Строение и специфика митохондриального генома человека
1.7.Заболевания, вызываемые мутациями митохондриального генома
человека
1.8. Ассоциация мутаций митохондриального генома с сердечнососудистыми и метаболическими заболеваниями
1.9.Связь точечных мутаций митохондриального генома с атеросклеротической патологией
2. МАТЕРР1АЛЫ И МЕТОДЫ
2.1.Участники исследования
2.2.Методы исследования
2.2.1. Принцип проводимого исследования
2.2.2. Выделение ДНК из крови человека
2.2.3. ПДР (полимеразная цепная реакция)
2.2.4. Электрофорез в агарозном геле
2.2.5. Пиросеквенирование короткоцепочечных фрагментов ДНК
2.2.6. Количественное определение уровня гетероплазмии мутаций митохондриального генома
2.2.7. Статистические методы и представление данных
3. РЕЗУЛЬТАТЫ
3.1.Оценка повторяемости и воспроизводимости измерений

3.2.Характеристика атеросклеротических поражений сонных артерий в исследованной выборке
3.3. У ровни гетероплазмии мутаций митохондриального генома клеток крови в исследованной выборке
3.4. Ассоциация мутаций мтДНК со степенью атеросклеротических поражений сонных артерий
3.5.Ассоциация мутаций мтДНК с ИБС и перенесенным инфарктом миокарда
3.6. Ассоциация мутаций мтДНК с артериальной гипертонией и сахарным диабетом
3.7.Корреляционная связь мутаций мтДНК с липидными характеристиками крови
3.8.Оценка диагностической значимости мутаций митохондриального
генома как биомаркера атеросклероза и риска ИБС
4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
Заключение
Практические рекомендации
Выводы
Список литературы
Приложение

[175]. Также в патогенез гипертонии вовлечены гены NO-синтазы (eNOS) и эндотелина 1 (ЕТ-1), так как оксид азота (II) и эндотелин-1 являются основными вазоактивными веществами, секретируемыми эндотелием сосудов [90, 131]. Другими генами-кандидатами для артериальной
гипертонии являются гены Е-селектина (SELE), ароматазы, альфа-аддуцина (ADD1), ген рецептора эстрогена, и другие [104, 111, 146, 171].
Ряд мутаций митохондриального генома также ассоциирован с артериальной гипертонией. Мутации A4401G (гены тРНК глицина и метионина) и A4435G (ген тРНК метионина) ассоциированы с гипертонией, характеризующейся поздним началом и наследованием по материнской линии [106, 112]. Мутация A4295G (ген тРНК изолейцина) известна как ассоциированная с кардиомиопатией, и наличие мутации в нескольких генетически не связанных семьях, страдающих сердечно-сосудистыми заболеваниями, и при этом отсутствие ее у широкой выборки пациентов контроля, убедительно свидетельствует о том, что эта мутация ассоциирована с патогенезом сердечно-сосудистых заболеваний [108].
Генетический фактор риска широко изучен для различных видов кардиомиопатий — первичных невоспалительных поражений миокарда невыясненной этиологии, не связанных с клапанными пороками или внутрисердечными шунтами, артериальной или легочной гипертонией, ишемической болезнью сердца или системными заболеваниями (коллагенозы, амилоидоз, гемохроматоз и др.). Гипертрофическая кардиомиопатия (ГКМП) — это увеличение размеров сердца вследствие диффузной гипертрофии стенок левого желудочка, реже только верхушки сердца. Частота ГКМП составляет 0,2%, смертность при этом заболевании 2-4%. Доказана наследственная природа ГКМП. Это так называемая «семейная гипертрофическая кардиомиопатия». Застойная (дилатационная) кардиомиопатия (ДКМП) — это резкое расширение всех камер сердца в сочетании с незначительной их гипертрофией и неуклонно прогрессирующей, рефракторной к терапии сердечной недостаточностью,