Цитотоксические реакции лимфоцитов крови у детей при инфекционном мононуклеозе

• Автор: Слепичева, Нелли Рафаиловна
• Шифр специальности: 14.03.03
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2010
• Место защиты: Томск
• Количество страниц: 114 с. : 1 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ

ВВЕДЕНИЕ

ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ

1.1. Этиология, патогенез, клиника и гематологические проявления инфекционного мононуклеоза
1.2. Морфо-функциональные и метаболические изменения мононуклеарных клеток периферической крови при инфекционном мононуклеозе
1.3. Фенотипическая характеристика лимфоцитов при инфекционном мононуклеозе. Роль отдельных субпопуляций лимфоцитов в противовирусном иммунитете при инфекционном мононуклеозе
1.4. Роль цитокинов и особенности цитокинового статуса при инфекционном мононуклеозе

1.4.1. Интерферон (IFN) у

1.4.2. Фактор некроза опухоли

1.4.3. Трансформирующий фактор роста (TGF(3)
1.5. Апоптоз цитотоксических лимфоцитов периферической крови. Роль цитотоксических лимфоцитов периферической крови в индукции и реализации апоптоза
1.6. Антителозависимая клеточная цитотоксичность при инфекционном
мононуклеозе
Заключение
ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Характеристика групп исследования
2.1.1. Клинико-лабораторная характеристика больных инфекционным мононуклеозом, вызванным вирусом Эпштейна-Барр
2.1.2. Клинико-лабораторная характеристика больных инфекционным мононуклеозом другой этиологии
2.2. Материал исследования
2.3. Методы исследования
2.3.1. Метод выделения лимфоцитов из цельной крови
2.3.2. Оценка экспрессии CD-рецепторов на лимфоцитах периферической крови в лимфоцитотоксическом тесте
2.3.3. Оценка экспрессии CD-рецепторов на лимфоцитах периферической крови методом поверхностной иммунофлуоресценции
2.3.3.1. Оценка экспрессии CD95L, CD119
2.3.3.2. Оценка экспрессии CD120a
2.3.4. Идентификация annexin V-положительных лимфоцитов иммунофлуоресцентным методом
2.3.5. Определение продукции цитокинов в культуре лимфоцитов с помощью иммуноферментного анализа (ИФА)
2.3.6. Определение содержаниятранзима В в сыворотке крови с помощью иммуноферментного анализа (ИФА)
2.3.7. Спектрофотометрический метод оценки антителозависимой клеточной цитотоксичности
2.4. Статистическая обработка результатов исследования
ГЛАВА 3. РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
3.1. Уровень экспрессии CD4, CD8 и CD16 на лимфоцитах периферической крови у детей, больных инфекционным мононуклеозом , вызванным вирусом Эпштейна-Барр
3.2. Уровень экспрессии CD4, CD8 и CD16 на лимфоцитах периферической крови у детей, больных инфекционным мононуклеозом другой этиологии
3.3. Уровень апоптоза лимфоцитов периферической крови у детей, больных инфекционным мононуклеозом , вызванным вирусом Эпштейна-Барр
3.4. Уровень апоптоза лимфоцитов периферической крови у детей, больных инфекционным мононуклеозом другой этиологии
3.5. Уровень секреции цитокинов лимфоцитами периферической крови in vitro у детей, больных инфекционным мононуклеозом
3.6. Уровень гранзима В в сыворотке крови у детей, больных инфекционным мононуклеозом
3.7. Содержание CD119- и CD120а-экспрессирующих лимфоцитов в периферической крови больных инфекционным мононуклеозом , вызванным

вирусом Эпштейна-Барр
3.8. Содержание СБ119- и СВ120а-экспрессирующих лимфоцитов в периферической крови больных инфекционным мононуклеозом другой этиологии
3.9. Уровень антителозависимой клеточной цитотоксичности у детей, больных инфекционным мононуклеозом
ГЛАВА 4. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

транскрипции. Стратегией вирусов являются манипуляции белков семейства bcl-2. Вс1-2 может ингибировать апоптоз, опосредованный некоторыми каспазами, в частности, модулировать цитохром с/АраЕ1/каспаза-9-путь, главным образом регулируя высвобождение цитохрома С. Белки bcl-2 млекопитающих имеют множество вирусных аналогов. Одним из таких белков-аналогов является аденовирусный протеин Е1В-19К. Была показана взаимосвязь этого белка с подавлением апоптоза, вызванного действием проапоптотических белков bak, bik и bax. Е1В-19К ингибирует определенную форму Ьах и в результате блокирует TNFa-опосредованный сигнальный путь, останавливая каскадную активацию каспаз 8 и 9. Кроме того, этот аденовирусный протеин обладает способностью взаимодействовать с ядерным белком - ламином, препятствуя тем самым реализации генетической программы клеточной гибели [Чечина O.E. и соавт., 2005].
ВЭБ кодирует белок BHRF1, имеющий сходную структуру и функции с белком bcl-2. Этот белок на 38% гомологичен С-концевой части bcl-2 и способен ингибировать апоптоз, вызываемый TNF или антителами против рецептора Fas. Недавно был обнаружен другой белок ВЭБ - BALF1. Структурный анализ этого белка показал, что он имеет большее сходство с bcl-2, чем BALF1, но в отличии от других аналогов bcl-2 не может преобразовываться действием каспаз [Tarnam Y., 1993; Khanna R., 1995; Чечина O.E. и соавт., 2005].
Таким образом, нарушение реализации апоптотической программы лимфоцитов (в том числе цитотоксических Т-клеток, обладающих иммунорегуляторной активностью) является, вероятно, одной из основных причин несостоятельности иммунного ответа при вирусной интервенции и формирования хронического инфекционного процесса.
1.6. Антителозависимая клеточная нитотоксичность при инфекционном мононуклеозе
Исследование феномена антителозависимой клеточной