Глюкоамилаза Aspergillus awamori 466 : Выделение, иммобилизация и свойства

• Автор: Слепокурова, Юлия Ивановна
• Шифр специальности: 03.00.04, 03.00.23
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2000
• Место защиты: Воронеж
• Количество страниц: 158 с. : ил.

Введение 2 СОДЕРЖАНИЕ
Пгава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Источники глкжоамшвзы
1.2. Влияние некоторых факторов на биосинтез глкжоамшвзы
1.3. Выделение и очистка препаратов глкжоамилазы
1.4. Иммобилизация ферментов
1.4.1. Способы и носители для иммобилизации ферментов
1.4.2 Иммобилизованные глкжоамилазы
1.5. Физико-химические свойства свободной и иммобилизован
ной глкжоамилаз
1.5.1. Свойства нативной глкжоамилазы
1.5.2 Влияние иммобилизации на физико-химические свойства
глкжоамилазы
1.6. Иэтользование свободной и иммобилизованной глюкоамилзз
1.7. Заключение
Глава 2 МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЙ
21. Объекты исследований
2.2 Метод определения пжжоамшвзной активности
23. Метод определения активности а-амилазы
2.4. Биохимические и микробиологические методы исследований
2.5. Математическое планирование экспериментов
2.6. Получение технических препаратов глкжоамилазы
2.7. Ультрафильтрация
2.8. Получение вьхюкоочищенных препаратов глюкоамилазы
2.9. Определение молекулярной массы
2.10. ЗгЕктрофоретическое исследование фермента
2.11. Методика сорбции глкжоамилазы на носителях
2.12. Методика іфиготовжния образцов для РК-шектроскопии

Глава 3. БИОСИНТЕЗ ФЕРМЕНТНОГО ПРЕПАРАТА
ГЛЮКОАМИЛАЗЫ МИКРОМИЦЕ1 ОМ А статоп 466 ПРИ ТВЕРДОФАЗНОМ КУЛЬТИВИРОВАНИИ
3.1. Влияние некоторых факторов на биосинтез глкжоамилазы
3.2 Оптимизация параметров биосинтеза глкжоамилазы
3.3. Заключение
Глава 4. ВЫДЕЛЕНИЕ И ОЧИСТКА ГЛКЖОАМИЛАЗЫ
4.1. ГЪлучение технического препарата глкжоамишзы А сматоп
4.2 С>чистка глкжоамилазы Л. статоН
4.3. Исследование некоторых физикохимических свойств глю-коамишзы А. ажгтпоп
4.4. Заключение
Глава 5. ИММОБИЛИЗАЦИЯ ГЛКЖОАМИЛАЗЫ
5.1. Предварительная модификация сорбентов - носителей для иммобилизации глюкоамшизы А. ашгтоп
5.2 Сорбция глкжоамишзы сорбентами различного типа
5.3. Сравнительная характеристика некоторых физикохимических свойств свободной и иммобилизованной глкжоамилаз А сматоп
5.4. Исследование характера взаимодействия глкжоамишзы с функциональными группами ионитов методом ИК-спектро скопии
5.4.1. Полиамфолит АНКБ-35 в Н-ОН форме
5.4.2 Характеристика комплекса полиамфолит АНКБ-35 - глкжоа-мишза
5.5. Заключение

Глава б. СОПОСТАВЛЕНИЕНЕКОТОРЫХ ФШИКО-ХИМИЧЕСКИХ СВОЙОГО НАТИВНОЙ И ИММОБИЛИЗОВАННОЙ ГЛКЖОАМИЛАЗ
б. 1. Кислотная и термическая инактивация свободной глкжоами-
]взы
6.2 Кислотная инактивация иммобилизованной глкжоамилазы
6.3. Идентификация функциональных групп активного центра глкжоамилазы А ашгтогі
6.4. Заключение
Глава 7. ИОГЮЛЬЗОВАНИЕ СВОБОДНОЙ И ММОБИЛИЗОВАННОЙ
ГЛКЖОАМИЛАЗ В ПРОИЗВОДСТВЕ ХЛЕБОБУЛОЧНЫХ ЮДЕЛИИ
7.1. Выбор компонентного состава комплексного улучшителя
7.2 Апробация комплексного улучшителя в лабораторных условиях
7.3. Использование иммобилизованной глкжоамитшы в производстве ржаного и ржано-пшеничного хлеба
ВЫВОДЫ
ЛИТЕРАТУРА
ПРИЛОЖЕНИЯ

Количество прогалролизованного крахмала находили по формуле [98]:
С = £h—£b_. од (2.2)

где jj, - оптическая шютность контрольного раствора;
jy2 - оптическая плэтность опытного раствора Активность а-амигазы определяли по формуле [98]:
АС = 7,264 С - 0,03766 (2.3)

где АС - активность а-амилазы, ед/г,
а - содержание исследуемого материала в реакционной среде, мг, С - количество превращенного крахмала г.
2.4. Биохимические и микробиологические методы исследований
Они включали:
1. Определение pH на потенциометре pH- 121;
2. Содержание сухих веществ измеряли на рефрактометре марки УРЛ- 1;
3. Микроскопирование культур проводили с помощью светового микроскопа МЕИ- 3;
4. Редуцирующие сахара определяли полумшсрометодом Бертрана [79];
5. Протеолитическую активность находили с помощью модифицированного метода Ансона с применением субстрата казеината натрия
[97];
6. Определение общего азота методом Кьельцаля [6];
7. Содержание белка методом Лоури [ 159];