Молекулярные маркеры онкогенной активности вируса папилломы человека

• Автор: Золотоверхая, Екатерина Андреевна
• Шифр специальности: 03.00.06
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2009
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 125 с. : ил.

СОДЕРЖАНИЕ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
ГЛАВА 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1 Роль ВПЧ В ЭТИОЛОГИИ РАКА ШЕЙКИ МАТКИ
1.2 Профилактика рака шейки матки
1.2.1 Вакцинация
1.2.2 Скрининг женщин на рак шейки матки
1.2.2.1 Классификация цервикальных цитологических поражений
1.2.2.2 Скрининговые технологии
1.3 БИОЛОГИЯ ВИРУСА ПАПИЛЛОМЫ ЧЕЛОВЕКА
1.3.1 Классификация вируса папилломы человека
1.3.2 Жизненный цикл вируса папилломы человека
1.3.3 Организация генома вируса папилломы человека
1.3.4 Роль ранних белков вируса папилломы человека в онкогенной трансформации эпителиальных клеток
1.3.5 Молекулярные основы типоспецифических различий в трансформирующей активности вируса папилломы человека..
1.3.6 Значение интеграции ДНК вируса папилломы человека в геном хозяина для онкогенной трансформации клеток
1.4. Факторы риска цервикальной неопластической прогрессии,
АССОЦИИРОВАННЫЕ С ВИРУСОМ ПАПИЛЛОМЫ ЧЕЛОВЕКА
1.4.1 Инфицирование онкогенными типами и молекулярными вариантами вируса папилломы человека
1.4.2 Множественная папилломавирусная инфекция
1.4.3 Высокая вирусная нагрузка
1.4.4 Персистенция папилломавирусной инфекции
1.4.5 Нерегулируемая экспрессия вирусных онкогенов

ГЛАВА 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1 Схема исследования
2.2 Клинический материал
23 Цитологические исследования:
• 2.4 Выделение нуклеиновых кислот из клинического материала
2.5 Полимеразная цепная реакция с типоспецифическими
праймерами

2.6 Приготовление компетентных клеток
2.7 Выделение плазмидной ДНК
2.8 . Полимеразная цепная реакция в реальном времени
2.9 Статистическая обработка данных
РЕЗУЛЬТАТЫ СОБСТВЕННЫХ ИССЛЕДОВАНИЙ
ГЛАВА 3. ОПРЕДЕЛЕНИЕ ВИРУСНОЙ НАГРУЗКИ И
ФИЗИЧЕСКОГО СТАТУСА ВИРУСА ПАПИЛЛОМЫ ЧЕЛОВЕКА
3 .1 Количественная полимеразная щпная реакция в реальном
времени
3.2 Методика определения физического статуса ДНК вирусов
папилломы человека 16 и 18 типов
ГЛАВА 4. МОЛЕКУЛЯРНЫЕ МАРКЕРЫ ВИРУСА ПАПИЛЛОМЫ
ЧЕЛОВЕКА В РАННЕЙ ДИАГНОСТИКЕ ЦЕРВИКАЛЬНЫХ НЕОПЛАЗИЙ
4.1 Частота встречаемости онкогенных типов вируса папилломы
ЧЕЛОВЕКА ПРИ ПАТОЛОГИИ ШЕЙКИ МАТКИ
4.2 Оценка вирусной нагрузки у женщин с патологией шейки
МАТКИ:
4.3 Физический статус ДНК вируса папилломы человека при
РАЗЛИЧНЫХ СТАДИЯХ ЗАБОЛЕВАНИЯ ШЕЙКИ МАТКИ
4.4 Типоспецифическая персистенция ВПЧ
ГЛАВА 5. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЫ
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ
СПИСОК РАБОТ, ОПУБЛИКОВАННЫХ ПО ТЕМЕ ДИССЕРТАЦИИ. 104 СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ

1.3.6 Значение интеграции ДНК вируса папилломы человека в геном хозяина для онкогенной трансформации
клеток
ДНК ВПЧ может находиться в опухолевых клетках в двух формах — эписомной и интегрированной. Биологическое значение интеграции вирусной ДНК с геномом хозяина до сих пор остается неясным. Процесс интеграции сопровождается частичной потерей генетического материала вируса, при этом вирусный геном теряет способность к полной репликации, и в клетках, содержащих интегрированный клеточный геном, отсутствует продукция вирусных частиц. Однако интеграция, возможно, является ключевым событием в цервикальном канцерогенезе, так как она очень часто ассоциирована с неопластической прогрессией. Наиболее важным результатом интеграции считают повышение стабильности транскриптов Е6 и Е7 и нарушение интактности гена Е2, регулирующего их транскрипцию [79, 98, 99]. Для ВПЧ 16 и 18 типов показано, что при интеграции вирусной ДНК в ДНК хозяина обычно разрушаются ORF генов El и Е2, а ORF Е6 и Е7, а также LCR остаются интактными [100]. Картирование делеций и деструкций ORF генов El и Е2 в большой серии тканей карцином, позитивных по ВПЧ 16 типа, позволило обнаружить множественные места делеций, однако наиболее часто встречаются делеции ORF Е2, соответствующие так называемой шарнирной области белка [101, 102].
Исчезновение супрессорной функции белка Е2 обусловливает повышение экспрессии Е6 и Е7, трансформирующее действие которых способствует прогрессии неоплазий [103]. Предполагается, что ген El участвует в подавлении вирусного промотора: следствием мутации гена El являются активация транскрипции вирусного генома и увеличение трансформирующей активности вирусных онкогенов [102].