Коллоидное золото в биохимических и микробиологических исследованиях

• Автор: Дыкман, Лев Абрамович
• Шифр специальности: 03.00.04, 03.00.07
• Научная степень: Докторская
• Год защиты: 2005
• Место защиты: Саратов
• Количество страниц: 334 с. : ил.

Список сокращений
ЛГ - антиген (ы)
ЛТ - антитело (а)
БСА - бычий сывороточный альбумин
ВИЧ - вирус иммунодефицита человека
ГКР - гигантское комбинационное рассеяние
ДРС - динамическое рассеяние света
ЗХВК - золотохлористоводородная кислота
ИК — инфракрасный
ИФА — иммуноферментный анализ
КЗ - коллоидное золото
КРС - комбинационное рассеяние света
ЛПС - липополисахарид
НАФ - неполный адъювант Фрейнда
ИСТ - нитросиний тетразолий
НЦ - нитроцеллюлоза
ПАВ - поверхностно активное вещество
ПАИ - пролиферативный антиген инициапей
ПАФ - полный адъювант Фрейнда
ПВДФ - поливинилендифторид
ПЭГ — полиэтиленгликоль
ПЭИ — полиэтиленимин
ПХ - пероксидаза хрена
РА - реакция агглютинации
РИА - радиоиммуноанализ
ТЭМ - трансмиссионная электронная микроскопия
УФ — ультрафиолетовый
ЭДТА - этилендиаминтетрауксусная кислота
ЭПС - экзополисахарид
ФГЛ - фитогемагглютинин
ФИА - флуоресцентный иммуноанализ
Con А - concanavalin А (лектин из Canavalia ensiformis) ELISA - enzyme-linked immunosorbent assay EMIT - enzyme multiplied immunoassay technique Ig - immunoglobulin (s)
PNA - peanut agglutinin (лектин из Arachis hypogaea)
scFv - single chain variable fragment
SEIRA - surface-enhanced infrared absorption spectroscopy
SERS - surface-enhanced Raman scattering
SPIA - sol particle immunoassay
SPR - surface plasmon resonance
UEA - Ulex europaeus agglutinin (лектин из Ulex ewopaeus) WGA - wheat germ agglutinin (лектин из Triticum vulgaris)
Глава 1. Анализ литературы и постановка задач исследования
1.1. Иммунохимические методы в биохимической и микробиологической практике
1.2. Коллоидное золото и его конъюгаты с биомакромолекулами: основные свойства и аспекты возможного использования
1.3. Адъюванты и носители антигенов, используемые для получения антител и производства вакцин
1.3.1. Адъюванты
1.3.2. Носители
1.4. Постановка задач исследования
Глава 2. Разработка технологии синтеза биоспецифических маркеров - конъюгатов коллоидного золота
2.1. Синтез коллоидных золотых частиц с использованием низкомолекулярных восстановителей
2.1.1. Обзор распространенных методик синтеза золотых наночастиц
2.1.2. Получение коллоидного золота с требуемым размером частиц по методу Френса
2.1.3. Разработка нового метода синтеза коллоидного золота со средним диаметром частиц 5 нм
2.1.4. Определение среднего диаметра получаемых золотых наночастиц
вакцины, должны не только вызывать получение ЛТ с высоким титром, но и влиять на длительность ответа и индукцию иммунологической памяти. Индукция клеточного иммунитета — требование для защитного иммунитета против многих этиологических агентов, но она также частично ответственна за побочные эффекты адъювантов [189, 190].
Исследования влияния адъювантов на иммунный ответ, показали, что они воздействуют не только на титр ЛТ, но и на продолжительность иммунного ответа, авидность, изотипы и субклассы получаемых АТ [191]. Кроме того, большинство адъювантов вызывает также сложные межклеточные взаимодействия между макрофагами и лимфоцитами. Немаловажным оказался и тот факт, что количество вводимого животным ЛГ при иммунизации с адъювантом заметно ниже, чем при иммунизации нативным АГ [192].
Адъюванты можно разделить по их происхождению на неорганические, бактериальные, растительные, синтетические и животные (цитокины). Воздействие адъювантов на иммунный ответ в основном обусловлено, как предполагается, тремя их свойствами: способностью удерживать (или даже накапливать) АГ в том месте, где он экспонируется лимфоцитам (эффект «депо»), способностью усиливать презентацию АГ иммунокомпетентным клеткам или осуществлять транспорт к ним и способностью вызывать синтез цитокпнов, регулирующих лимфоцитарные функции. Соли алюминия действуют главным образом как депо, индуцируя образование мелких гранулём, в которых они задерживаются вместе с адсорбированным АГ. Адъюванты нового поколения, такие как липосомы и иммуностимулирующие комплексы (18СОМб), позволяют доставить заключенный в них АГ иммунокомпетентным клеткам [193, 194]. Адъюванты бактериального
происхождения, такие как компоненты клеточных стенок микобактерий, эндотоксины и др., действуют, вероятно, в основном путем активации иммунокомпетентных клеток и стимуляции образования ими соответствующих цитокинов. Это предположение подтверждается тем фактом, что цитокины