Очистка и изучение физико-химических свойств медьсодержащей аминоксидазы из кровеносных сосудов

• Автор: Меграбян, Зара Борисовна
• Шифр специальности: 03.00.04
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 1984
• Место защиты: Ереван
• Количество страниц: 140 c. : ил

ГЛАВА I. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
§ I. Биологические пути образования аминов
§ 2. Пути катаболизма аминов
§ 3. Классификация аминоксидаз
§ 4. Медьсодержащие аминоксидазы из микроорганизмов
§ 5. Медьсодержащие аминоксидазы в растениях
§ 6. Аминоксидазы из почек
§ 7. Медьсодержащие аминоксидазы из других органов
животных
§ 8. Медьсодержащие аминоксидазы из крови и друтих
жидкостей организма
§ 9. Лизилоксидаза - специфическая медьсодержащая
аминоксидаза
§ 10. Медьсодержащие аминоксидазы из сосудистой ткани
Глава II. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
§ I. Использованные реактивы
§ 2. Аппаратура
§ 3. Биологический материал
§ 4. Определение аминоксидазной активности
§ 5. Определение СОД-актинности
§ 6. Определение белка, липидов и углеводов и тиоловых групп
§ 7. Определение металлов

§ 8. Электрофорез, гель-фильтрация, хроматография
Глава III. РЕЗУЛЬТАТЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
§ I. Очистка бензиламиноксидазы из аорты
§ 2. Очистка бензиламиноксидазы из капилляров мозга
§ 3. Макромолекулярные свойства БАО из аорты капилляров
§ 4. Кинетические характеристики фермента и его ингибирование
§ 5. Оптические и магнитные свойства БАО из сосудов
§ 6. Другие медьсодержащие ферменты сосудистой ткани
§ 7. Аминоксидаза из плаценты
Глава IV. ОБСУЖДЕНИЕ РЕЗУЛЬТАТОВ
ВЫВОДЕ
СПИСОК ЦИТИРОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
ИСПОЛЬЗОВАННЫЕ СОКРАЩЕНИЯ
1. МАО - моноаминоксидаза
2. ДАО - диаминоксидаза
3. БАО - бензиламиноксидаза
4. УФ - ультрафиолетовый
5. ЭПР - электронный парамагнитный резонанс
6. ПЭГ - полиэтиленгликоль
7. ВАР/У - р -аминопропионитрил фумарат
8. ДГНБ - 5,5-дитиобис-2-нитробензойная кислота
9. ПХМБ - пара-хлормеркурибензоат
10. ДСН - додецилсульфат натрия
11. ТЭТД - тетраэтилтиурамдисулъфид
12. СОД - супероксиддисмутаза
13. ЭДТА - динатриевая соль этилендиаминтетрауксусной кислоты
14. ГАМК - у -аминомасляная кислота
15. ТХУ - трихлоруксусная кислота
16. НЕРЕ5 - 4-(2-оксиэтил)пиперазин-1-этансулъфоновая кислота
17. БСА - бычий сывороточный альбумин
18. ПААГ - полиакриламидный гель
19. кД - килодальтон

стран Т-20, ДСН фирмы " FuiaJt и ДЕАЕ-целлюлозу фирмы WUcitmOM-) а также цианид натрия фирмы fCocJL - , Реактивы для фореза,
перйодат натрия и акрилекс Р-300 были получены от фирмы йя*Х-~ vxjoJL , а нитротетразолиевый синий фирмы C&im&jpot . Все эти реактивы были использованы без дополнительной очистки.
Гель-фильтрация проводилась через сефадексы От75" , Си~100 и CL-M0
(все марки "сверхтонкий") и Сефарозы 4В и 6В, которые были получены от фирмы ' Р1ьоЛ.пишМг . в ряде экспериментов по электрофорезу мы также использовали Агарозу А той же фирмы.
Для калибровки колонок при гель-фильтрации и определении молекулярной массы белков методом электрофореза мы использовали ряд белков и ферментов, в частности, БСА, трансферрин и МАО из плазмы быка фирмы * , пероксидазу из хрена фирмы Р&ОмаЛ,
а также препараты металлоферментов, полученные сотрудниками лаборатории физ. химии белков Института биохимии АН АрмССР: цитохром с (Маркосян К.А.), ферритин (Шароян С.Г.), каталазу и СОД (Симонян М.А.), дофамин-^-гидроксилазу (Бояджян A.C.), церулоплазмин и гемоцианин (Налбандян P.M.).
Реактивы, использованные в качестве буферов, а также мочевина, фуксин, судан черный Б, метиленовая синь, сахароза, метабисульфит калия, органические растворители и другие реактивы были отечественного производства марок "х.ч.", "ч.д.а.", "ос.ч.".
§ 2. Аппаратура
В ^ходе очистки белков мы использовали ihftcolJ-£ и 'U/къ-OOld-ß фирмы инь (Швеция), снабженные одноканальным самописцем 2066 или шестиканальным самописцем 2520-8 той же фирмы.
В большинстве исследований элюционные диаграммы получались при использовании фильтра для длины волны 253 нм и плоской проточ-