Роль грибов в иммунном ответе у больных хроническим рецидивирующим полипозным риносинуситом

• Автор: Протасов, Павел Геннадиевич
• Шифр специальности: 14.03.09
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2013
• Место защиты: Москва
• Количество страниц: 94 с. : 21 ил.

ОГЛАВЛЕНИЕ
1. ВВЕДЕНИЕ
2. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
2.Е ИСТОРИЯ ВОПРОСА
2.2. ЭПИДЕМИОЛОГИЯ ПОЛИПОЗНОГО РИНОСИНУСИТА
2.3. КЛАССИФИКАЦИЯ РИНУСИНУСИТОВ
2.4. «ГРИБНОЙ РИНОСИНУСИТ»: КЛАССИФИКАЦИЯ, СЛОЖНОСТИ ДИАГНОСТИКИ, ЧАСТОТА ВЫЯВЛЕНИЯ
2.5. ГИСТОМОРФОЛОГИЯ ПОЛИПОВ
2.6. ИММУНОЛОГИЧЕСКИЕ НАРУШЕНИЯ В ТКАНИ ПОЛИПОВ
2.7. РОЛЬ ГРИБОВ В ПАТОГЕНЕЗЕ ХРОНИЧЕСКОГО РЕЦИДИВИРУЮЩЕГО ПОЛИПОЗНОГО РИНОСИНУСИТА: ЗА И ПРОТИВ
3. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1. МАТЕРИАЛЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.1.1. Характеристика обследованных пациентов
3.1.2. Биологические материалы
3.2. МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.2.1. Получение образцов сыворотки крови
3.2.2. Методика проведения клинического анализа крови
3.2.3. Метод сбора назального секрета
3.2.4. Метод получения супернатанта гомогената ткани полипа
3.2.5. Стандартизация биологических материалов
3.2.6. Иммунологические методы
3.2.6.1 .Определение общего ЦЕ
3.2.6.2.0пределение специфических IgE
3.2.6.3.Определение ЕСР в биологических материалах
3.2.6.4.Метод определения галактоманнана в биоматериалах
3.2.6.5,Определение IgG-AT к антигенам грибов рода Aspergillus в сыворотке
крови и гомогенате полипов
3.2.6.6.Определение интерлейкина-5 (IL-5)
3.2.7. Морфологические исследования
3.2.7.1,Эксфолиативный цитологический анализ назального секрета
3.2.7.2.Гистологическое исследование ткани полипов
3.2.8. Морфометрическая оценка образцов ткани
3.2.9. Микологические методы
3.2.10. Статистическая обработка
4. СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
4.1. КЛИНИКО-ИММУНОЛОГИЧЕСКАЯ ХАРАКТЕРИСТИКА
ОБСЛЕДОВАННЫХ ПАЦИЕНТОВ
4.2. МИКРОМИЦЕТЫ ПОЛОСТИ НОСА И ТКАНИ ПОЛИПОВ
4.3. ЛОКАЛЬНЫЙ И СИСТЕМНЫЙ ИММУННЫЙ ОТВЕТ НА АНТИГЕНЫ
ГРИБОВ У БОЛЬНЫХ ХРПР
4.4. ГИСТОМОРФОЛОГИЯ ПОЛИПОВ БОЛЬНЫХ ХРОНИЧЕСКИМ
РЕЦИДИВИРУЮЩИМ ПОЛИПОЗНЫМ РИНОСИНУСИТОМ
5. ОБСУЖДЕНИЕ
6. ВЫВОДЫ
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ЛИТЕРАТУРА

1. ВВЕДЕНИЕ
Острый и хронический риносинусит - наиболее распространенная патология JlOP-органов, доля которой составляет от 15 до 33,5 % [Дайняк Л.Б., 1978, Bent J.P., Kuhn F.A., 1994, de Shazo R.D., Swain R.E., 1996, Fokkens W.J. et ah, 2007, 2012]. Хронический риносинусит (XPC) - это воспаление слизистой оболочки носа и околоносовых пазух, практически всегда связано с застоем секрета и нарушением аэрации [Пискунов С.З. с соавт., 2005, Иванченко O.A. с соавт., 2012]. ХРС представляет собой разнородную группу состояний. Среди ХРС особое положение занимает хронический рецидивирующий полипозный риносинусит (ХРПР), этиология и патогенез которого изучены недостаточно. Основными этиологическими факторами ХРПР считают вирусную, бактериальную и грибную инфекции [Пискунов С.З. с соавт., 2005, Белобородова
Н.В. с соавт., 2009, Лопатин A.C., 2011, Иванченко O.A. с соавт., 2012, Crampette L., 2001, Fokkens W.J. et ah, 2007, 2012].
Среди множества теорий патогенеза ХРПР приобрела популярность «грибная гипотеза», предложенная ещё в 1983 г. профессором A.L. Katzenstein [Katzenstein
A.L. et ah, 1983]. В настоящее время эта гипотеза активно поддерживается и разрабатывается группой исследователей под руководством профессора J.U. Ponikau [Ponikau J.U. 1999, 2002, 2006, 2009, 2012]. Согласно этой гипотезе, не менее чем у 80-90% больных ХРПР причиной развития заболевания являются мицелиальные (плесневые) грибы [Ponikau J.U. et ah, 2006]. Было предложено выделить самостоятельную форму ХРС - «аллергический грибной риносинусит» (“allergic fungal rhinosinusitis”) [Kern R.C., Conley D.B. et ah, 2008]. Остается не ясным, какие таксоны микромицетов могут служить триггерным фактором в развитии ХРПР. Так, одни авторы предполагают, что эта роль принадлежит грибам рода Alternaria (Alternaria alternata) [Ponikau J.U. et ah, 2006, Sabirov A. et ah, 2008, Ponikau J.U. et ah, 2009], тогда как другие считают, что это могут быть преимущественно грибы рода Aspergillus [Katzenstein A.L. et ah, 1983, Schubert
назального секрета и риноцитограмм, также 17 образцов крови (сыворотка, цельная кровь), назального секрета и риноцитограмм у здоровых лиц.
3.2.МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
3.2.1. Получение образцов сыворотки крови
Всем пациентам кровь брали из локтевой вены натощак до 10.00 утра. Взятие крови из локтевой вены проводили в процедурном кабинете с соблюдением правил асептики и антисептики с помощью системы вакуумного забора крови VACUETTE (Австрия). Система Vacuette состоит из трёх компонентов:
1) Специальная игла,
2) Иглодержатель,
3) Вакуумная одноразовая пробирка 8мл Vacuette для клинических исследований сыворотки крови с активатором образования сгустка с разделительным гелем.
Для отделения сыворотки кровь в количестве 10 мл помещали в чистую центрифужную пробирку и центрифугировали 10 мин. при скорости 3000 оборотов в минуту.
Допускалось хранение полученных образцов сыворотки крови при температуре 2-8°С в течение 1-2 суток или при -20°С до 6 месяцев.
3.2.2. Клинический анализ крови
Всем пациентам кровь брали из локтевой вены натощак до 10.00 утра. Взятие крови из локтевой вены проводили в процедурном кабинете с соблюдением правил асептики и антисептики с помощью системы вакуумного