Молекулярные характеристики геропротекторных пептидов, выделенных из тимуса и мозга животных

• Автор: Жилинский, Дмитрий Владимирович
• Шифр специальности: 14.01.30
• Научная степень: Кандидатская
• Год защиты: 2012
• Место защиты: Санкт-Петербург
• Количество страниц: 125 с. : ил.

СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ВВЕДЕНИЕ
Глава 1. ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ
1.1. Феномен старения
1.2. Регуляторные пептиды
1.3. Пептиды иммунной системы
1.4. Пептидные препараты мозга
1.4.1. Церебролизин
1.4.2. Кортексин
1.5. Существующие подходы к выделению и очистке природных
пептидных препаратов
Глава 2. МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Биохимические препараты
2.1.1. Дезоксирибонуклеиновая кислота
2.1.2. Пептидные препараты эндогенного происхождения
2.1.2.1 Тималин
2.1.2.2. Церебролизин
2.1.2.3.. Кортексин
2.1.3. Синтетические пептиды
2.1.3.1. Глутатион
2.1.3.2. Вилон

2.1.3.3. Эпиталон
2.1.3.4. Вазопрессин
2.1.4. Препараты аминокислот
2.1.5. Сывороточный альбумин
2.1.6. Нейраминидаза
2.2.Материалы для хроматографии пептидов
2.2.1. Сефадекс
2.2.2. Сульфокатионит КУ-2Х8
2.2.3. Сульфокатионит Поуех50УХ8
2.2.4. Пластины для высокоэффективной тонкослойной до хроматографии
2.2.5.Приготовление раствора ДНК
2.2.6. Приготовление буферных растворов
2.3. Оборудование для препаративного выделения низкомолекулярных щ
пептидов
2.3.1. Плазмофильтр ПФМ
2.3.2. Колонки для гель-хроматографии
2.3.3. Колонки для твердофазной экстракции
2.3.4. Колонки для ионообменной хроматографии
2.4.Методы исследования
2.4.1. Экстракция пептидов
2.4.2. Тангенциальная микрофильтрация

2.4.3. Твердофазная экстракция
2.4.4. Ионообменная хроматография пептидных препаратов
2.4.5. Определение концентрации а-аминного азота по реакции с нингидрином
2.4.6. Гель-хроматография
2.4.7. Спектральные характеристики пептидных растворов
2.4.8. Высокоэффективная тонкослойная хроматография
2.4.9. Определение биологической активности пептидов при органотипическом культивировании тканей
2.4.10. Вискозиметрия
2.4.11. Лиофильная сушка пептидных растворов
2.4.12. Статистическая обработка результатов исследования
Глава 3. РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
3.1. Выделение пептидов из тимуса
3.1.1. Экстракция пептидов из тимуса
3.1.2.Фракционирование экстракта тимуса методом тангенциальной микрофильтрации
3.1.3. Твёрдофазная экстракция и хроматография пептидов
3.1.4. Сравнительная характеристика пептидных препаратов,

полученных из тимуса разными методами
3.1.5. Ионообменная хроматография пептидов, выделенных из тимуса на сульфокатионите КУ-2Х8
3.1.6. Ионообменная хроматография пептидов, выделенных из тимуса на сульфокатионите Боуех 50\ГХ8

2.1.3. Синтетические пептиды
2.1.3.1. Глутатион (С1и-Су8-С1у)
Глутатион - это трипептид у-глутамилцистеинилглицин. Глутатион содержит необычную пептидную связь между амино-группой цистеина и карбокси-группой боковой цепи остатка глутаминовой кислоты [Сьяксте
Н.И. и др., 1992]. В работе использовали глутатион, хроматографически чистый, производства фирмы “11еапа1” (Венгрия).
2.1.3.2. Вилон (Lys-Glu)
Вилон (Lys-Glu) - синтетический дипептид L-лизин-Ь- глутаминовая кислота, обладающий геропротекторным действием; синтезирован в Санкт-Петербургском Институте биорегуляции и геронтологии СЗО РАМН как аналог фрагмента, встречающегося в составе эндогенных пептидов тимуса. Молекулярная масса пептида - 275 Да.
2.1.3.3. Эпиталон (АІа-СІи-Аяр-СІу)
Эпиталон - синтетический тетрапетид (АІа-ОІи-Азр-ОІу), обладающий геропротекторным действием. Синтезирован в СПб ИБГ СЗО РАМН на основе анализа аминокислотного состава пептидного препарата эпиталамина [Хавинсон В.Х., 2001 а]. Молекулярная масса пептида 390 Да.
2.1.3.4. Вазопрессин

t Туг—Phe4 4 H,N-Cys 6 s Чіп
Cys—

Р го—-Аг g-—GІ у—С (O)N H